酶標(biāo)儀軟件操作步驟

1、酶標(biāo)儀軟件操作步驟一、軟件運(yùn)行前的連接酶標(biāo)儀插上電源 , 和電腦連接好后 , 打開電腦和酶標(biāo)儀開關(guān) , 酶標(biāo)儀至少穩(wěn)定15min 后開始讀數(shù) , 效果比較好。注意 , 當(dāng)酶標(biāo)儀處于 power on 的狀態(tài)時(shí) , 不要手動打開酶標(biāo)板室和比色皿室的門, 以免紫外輻射的傷害或者儀器的損傷。二、軟件的運(yùn)行1. 打開桌面快捷方式skanit re for mss 2.4.2 運(yùn)行軟件 , 出現(xiàn) log on to skanit software的界面。2.use name 默認(rèn)為“ admin”, password為空3. 點(diǎn) ok進(jìn)入 skanit software 2. 4.2 界面,new se

2、ssion- 新建任務(wù)程序 ,open session- 打開已有程序。4. 在界面上方的 setting中選擇 instrument,出現(xiàn) instrument setting的界面, 在 instrument中選中 multiskan spectrum on com ,themo electron 。點(diǎn)擊右側(cè)的 setup, 在 serial number中輸入 1500-850, 然后點(diǎn)擊 ok 。再點(diǎn)擊 default instrument 右邊的 connect, 即可設(shè)定好連接。然后點(diǎn)擊close 關(guān)閉窗口。三.new session 操作1. 新建任務(wù)程序 : 點(diǎn)擊 new se

3、ssion 進(jìn)入 protocol options界面, 在 session name 中輸入新的程序名稱點(diǎn)擊 next 進(jìn)入 plate layout options界面, 在 select plate template中選擇所需模板類型 (一般 96 孔板選擇 use default,比色皿選擇 cuvette,其他的可以選擇相應(yīng)的類型 ) 輸入 plate layout name(系統(tǒng)默認(rèn)的與 session name 相同) 點(diǎn)擊 next 進(jìn)入 definition done界面, 在 select location中選擇任務(wù)程序所要保存的目的文件夾(該界面可進(jìn)行新建 , 重命名及刪

4、除文件夾操作 )點(diǎn)擊finish完成新建 , 進(jìn)入 skanit software 2.4.2程序操作主界面 (主要有三大塊:platelayout用于模板區(qū)域選擇 ,protocol用于程序編輯 ,results用于數(shù)據(jù)處理)。2.plate layout對模板區(qū)域進(jìn)行選取1 點(diǎn)擊 wizard 進(jìn)入選取模板區(qū)域操作界面fill wizard(任務(wù)類型 type 有: blank 空白,calibrator標(biāo)準(zhǔn)蛋白 ,control對照,empty 空白,unkown 一般為樣品)。在右邊模板中選取開始點(diǎn)位置, 即紅圓點(diǎn)所在位置。選取方向 , 在 filling order中可通過箭頭設(shè)定。

5、對于 blank, 在 no.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù) , 選擇好開始位點(diǎn)和方向 ,點(diǎn)擊 add可完成。對于 calibrator,在 no.of calibrators 中填寫標(biāo)準(zhǔn)蛋白的個數(shù) , 在 no.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù) , 選擇好開始位點(diǎn)和方向。如有濃度梯度, 可選擇generate series進(jìn)行設(shè)置。例如, 取 7 個濃度蛋白做標(biāo)準(zhǔn)曲線 , 稀釋倍數(shù)分別為20,40,80,160,320, 640,1320, 每個濃度重復(fù)兩次 , 則在 no.of calibrators 中填寫 7, 在 no.of replicates 中填寫 2, 選擇

6、好開始位點(diǎn)和方向。然后選中g(shù)enerate series,出現(xiàn)conventions 的界面 , 在 initial value中填寫 20, 在 operators中選擇multiply,step by中填寫 2, 點(diǎn)擊 ok。對于 control,操作基本和 calibrators相似。對于 empty操作基本和 blank 相似。對于 unknown,填寫好 no.of replicates,no.of unknowns并選擇好開始位點(diǎn)和方向 , 點(diǎn)擊 add即可完成。第一塊板填滿后 , 有時(shí)會自動進(jìn)入第二塊板的編輯, 注意看 fill wizard的模板下方的 current plat

7、e,如果顯示為 2/2, 則可以直接關(guān)掉窗口 , 模板區(qū)域即可編好。標(biāo)注: 對于單一型任務(wù)可先選取全模板【即在no.of unkown 選項(xiàng)中設(shè)為模板最大孔數(shù)】 , 然后對不要的區(qū)域進(jìn)行刪除。對于非 blank 和 empty型任務(wù) , 若有濃度差 , 可勾選 generate series,然后進(jìn)行設(shè)定 :series為有規(guī)則的濃度差 ,multiple values為不規(guī)則的濃度差。有規(guī)則的可通過運(yùn)算公式 , 系統(tǒng)直接算出 , 無規(guī)則的通過鍵盤輸入 , 點(diǎn)擊 add 進(jìn)行添加。3. 編輯程序選好所用模板區(qū)域后 , 點(diǎn)擊 protocol進(jìn)入程序編輯界面。在 protocol propert

8、ies所屬框內(nèi)的 execution order選項(xiàng)中選中數(shù)據(jù)讀取路徑( 共有四種 , 第一種一般為常用路徑 , 一次讀四個孔 )。在 settle delay選項(xiàng)中設(shè)定讀數(shù)時(shí)間間隔。一般比色皿不需要讀書時(shí)間間隔, 設(shè)置為零即可 , 對于測量板而言 , 由于板在移動過程中液體表面共振波的影響, 需要穩(wěn)定一段時(shí)間 , 一般設(shè)置為 5s in a 6-well plate,300ms in a 96-well plate, 20ms in a 384-well plate。在 steps 所屬框內(nèi)空白處或選中程序單擊鼠標(biāo)右鍵得到應(yīng)用程序子菜單。在子菜單中選取你所要運(yùn)行的程序( 如常用的程序有pho

9、tometric,photometric-scanning,incubate和 shake 等), 并在該程序的選項(xiàng)中設(shè)定你所需的參數(shù)。一般測蛋白含量選擇photometric,在 wavelength 中設(shè)置好波長即可。所有程序編寫好后 , 在 session 中點(diǎn)擊 save 保存好模板程序 , 不保存將無法運(yùn)行上面所設(shè)的模板程序。4. 測讀數(shù)據(jù)在 execution 所屬框內(nèi)點(diǎn)擊 connect 鏈接機(jī)器 , 鏈接過程中會出現(xiàn)機(jī)器狀態(tài)列表窗口 , 無異常后點(diǎn) close 關(guān)閉。在 execution 所屬框內(nèi)點(diǎn)擊 run plate out彈出酶標(biāo)板載板 , 把酶標(biāo)板底部擦干后放上去后

10、, 確保平穩(wěn)后點(diǎn)擊 run plate in,等酶標(biāo)板進(jìn)去。在 execution 所屬框內(nèi)點(diǎn)擊 execute session按鈕運(yùn)行所設(shè)程序 , 彈出 run name窗口, 點(diǎn)擊 ok確認(rèn)運(yùn)行。接著會出現(xiàn)讀數(shù)窗口, 不要關(guān)閉讀數(shù)窗口 , 讀數(shù)完畢后窗口會自動消失 , 并彈出酶標(biāo)板載板。注: 以前, 無法進(jìn)行人工讀板 , 這是因?yàn)闄C(jī)器序列號的設(shè)置不對, 要仔細(xì)查看機(jī)器上的機(jī)器序列號 , 將正確的序列號填入操作軟件中的設(shè)置中。5. 數(shù)據(jù)分析及保存儀器讀數(shù)完畢后 , 系統(tǒng)自動進(jìn)入 results 操作界面 , 在 result 界面所屬框中 ,可對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。在 result 所屬框中

11、, 單擊要分析數(shù)據(jù)的程序 , 如測蛋白一般選擇的photometric,點(diǎn)鼠標(biāo)右鍵得到數(shù)據(jù)分析方法主菜單。選擇要分析的方法 , 測蛋白選擇 quantitative curve fit,出現(xiàn) parameters, graph,table,list可以點(diǎn)擊查看結(jié)果。如果需要標(biāo)準(zhǔn)曲線 , 則在 graph的曲線圖中單擊右鍵選擇toolbar, 圖標(biāo)上方會出現(xiàn)一系列圖標(biāo) , 點(diǎn)擊 copy to clipboard選擇 as a bitmap, 將其粘貼在新建word 文檔中并保存。點(diǎn)擊 result 左側(cè)圖標(biāo)框中選擇export, 在 parameters 中的 select items to

12、report中選擇要保存的內(nèi)容 , 一般選擇 layout,photometric,quantitative curve fit,然后點(diǎn)擊 add,在; 右邊的 report items中出現(xiàn)所選擇的內(nèi)容。在 after execution中選中 save to file,通過右下方的 browse 選擇要保存的文件。注意此次操作可能沒有保存到目的文件夾。必須進(jìn)行以下步驟。點(diǎn)擊上方的 report 可看見結(jié)果 , 點(diǎn)擊 save選擇所要保存到的目的文件夾。并檢查是否所有要保存的數(shù)據(jù)都已經(jīng)保存到相應(yīng)文件夾中。四、open session 操作若要運(yùn)行或查看已有的程序, 在登錄界面點(diǎn)擊 open session, 打開程序所在文件夾, 單擊所要運(yùn)行或查看的程序( 提示: 在