抗小葉增生合劑對(duì)乳腺小葉增生模型大鼠的影響

1、抗小葉增生合劑對(duì)乳腺小葉增生模型大鼠的影響【摘要】 目的 觀(guān)察抗小葉增生合劑對(duì)乳腺增生病動(dòng)物模型的治療作用。方法 采用苯甲酸雌二醇聯(lián)合黃體酮肌注的方法，復(fù)制大鼠乳腺增生模型，用抗小葉增生合劑30.0，15.0，7.5ml/kg 3個(gè)劑量治療30天，測(cè)定大鼠乳頭直徑，觀(guān)察乳頭大體形態(tài)變化及顯微鏡下乳腺組織變化，觀(guān)察對(duì)血液流變學(xué)的影響；測(cè)定血清苯甲酸雌二醇含量。結(jié)果 抗小葉增生合劑能明顯減小大鼠增生乳頭直徑，減少乳腺小葉數(shù)、腺泡數(shù)和腺泡腔直徑，改善血液流變學(xué)參數(shù)，顯著減輕乳頭形態(tài)學(xué)癥狀和降低血清苯甲酸雌二醇含量。結(jié)論 抗小葉增生合劑對(duì)雌激素引起的大鼠乳腺增生病有較好的療效。 【關(guān)鍵詞】 抗小葉增生

2、合劑 乳腺增生 雌激素類(lèi) 大鼠 Abstract: Objective To observe the effect of Kangruxianxiaoyezengsheng on rats with mastoplasia. Methods After benzoate estradiol and progestogen had been injected into rats, the mastoplasia models were produced. The model rats were treated with Kangruxianxiaoyezengsheng (30.0, 15.0,

3、 7.5ml/kg) for 30 days, the mammary papilla diameter of the rats in all groups were measured, morphologic changes of mammary papilla and the changes of mammary gland were observed under microscope, the content of estradiol in blood serum and blood rheology were determined by radio-immunity. Results

4、Kangruxianxiaoyezengsheng could significantly shrink the mammary papilla's diameter of the mastoplasia rats, lessen mammary papilla's symptoms in morphology, reduce the quantity of lobule of mammary gland, lobule-alveolus in mammary gland and the diameter of acinar lumina. Kangruxianxiaoyeze

5、ngsheng could also significantly improve blood rheological nature and reduce content of estradiol in blood serum. Conclusions Kangruxianxiaoyezengsheng can be effective for rat's mastoplasia induced by benzoate estradiol. Key words: Kangruxianxiaoyezengsheng; mastoplasia;estrogens;rats乳腺增生是婦女乳房疾

6、患中的常見(jiàn)病、多發(fā)病，臨床上以乳痛、乳腺組織局部增厚或有多個(gè)大小不等的結(jié)節(jié)為主要癥狀，在病理上以上皮增生、纖維組織增生及部分以淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)為主要變化的疾病，其患病率有逐漸增高趨勢(shì)?？谷橄傩∪~增生合劑是按我院的協(xié)定處方煎煮而成，處方由當(dāng)歸、柴胡、白芍等八味藥材組成，方中當(dāng)歸、柴胡為君藥，具有活血化淤，通絡(luò)止痛作用。本研究選用苯甲酸雌二醇聯(lián)合黃體酮長(zhǎng)期大量刺激造成大鼠乳腺增生模型，觀(guān)察中藥抗乳腺小葉增生合劑對(duì)大鼠乳腺增生的影響。1 材料與方法1.1 動(dòng)物選用成年雌性未孕Wista大鼠(由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SYXK桂2003-0005)72只，體重180200g。

7、1.2 藥物及試劑抗乳腺小葉增生合劑，本院制劑室提供;苯甲酸雌二醇注射液10mg/ml，上海第九制藥廠(chǎng)生產(chǎn)；黃體酮注射液1mg/ml，浙江仙琚制藥股份有限公司生產(chǎn)；雌二醇放射免疫分析藥盒，天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司產(chǎn)品；肝素鈉注射劑，2ml(12 500u)，江蘇萬(wàn)邦生化制藥有限公司生產(chǎn)。1.3 儀器LBY-N6B全自動(dòng)清洗血流變儀，北京普利生儀器有限公司;FJ2008G Y免疫計(jì)數(shù)器，西安262廠(chǎng)。1.4 造模1實(shí)驗(yàn)大鼠72只，其中對(duì)照組15只，另57只大鼠用于造模，每只大鼠后肢肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/(kg·d)，共30天，改用黃體酮注射液4mg/(kg·

8、;d)肌肉注射，共5天，可見(jiàn)乳頭出現(xiàn)紅、腫和增大，并有部分乳暈出現(xiàn)，處死4只(對(duì)照組和造模組各2只)送病理切片檢查，確證造模成功。1.5 分組及治療將造模大鼠隨機(jī)分為5組：即模型組(A組)、對(duì)照組(B組)及抗乳腺小葉增生合劑高(C組)、中(D組)、低劑量組(E組)，給藥劑量分別為30.0，15.0，7.5ml/kg，相當(dāng)于成人臨床擬用劑量的10倍、5倍及2.5倍；對(duì)照組給蒸餾水，每天1次，共30天。1.6 觀(guān)察指標(biāo)末次給藥24h后，乙醚麻醉，腹主動(dòng)脈取血，留取血液及雙側(cè)乳房，采用肝素鈉抗凝，離心提取血漿，用LBY-N6B全自動(dòng)清洗血流變儀測(cè)全血黏度及血漿黏度，用壓積管法測(cè)紅細(xì)胞壓積；用FJ20

9、08GY免疫計(jì)數(shù)器檢測(cè)血漿中苯甲酸雌二醇含量。用精密游標(biāo)卡尺測(cè)定各組大鼠前第二對(duì)左右乳頭直徑，并進(jìn)行形態(tài)學(xué)肉眼大體觀(guān)察，進(jìn)行4級(jí)半定量分析。其形態(tài)觀(guān)察評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為4級(jí):級(jí):乳頭紅、腫大明顯，解剖可見(jiàn)乳腺組織明顯增大。乳房連接成片，分界不清;級(jí):乳頭腫大，解剖可見(jiàn)乳腺組織明顯增大，乳房呈片狀，但分界尚清;級(jí):乳頭稍增大，解剖可見(jiàn)乳腺組織明顯增大，分界清楚;級(jí):無(wú)變化，乳腺組織很少。在10%中性福爾馬林中固定后，常規(guī)石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀(guān)察。乳腺小葉增生程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)按4級(jí)半定量評(píng)分21.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)。等級(jí)比較采用Ridit分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。

10、2 結(jié)果2.1 各組大鼠乳頭直徑大小變化及血清苯甲酸雌二醇含量比較 D、C、E三組大鼠乳頭直徑比A組減??；雌二醇含量明顯減少(P<0.05或P<0.01)，見(jiàn)表1。表1 各組大鼠乳頭直徑大小變化及血清苯甲酸雌二醇含量測(cè)定比較 (略)2.2 各組大鼠乳頭形態(tài)學(xué)觀(guān)察評(píng)級(jí)及病理組織學(xué)變化評(píng)分比較C、D、E三組形態(tài)觀(guān)察評(píng)級(jí)與A組比較差異有高度顯著性(P均<0.01)；病理組織學(xué)變化評(píng)分與A組比較差異也有顯著性(P均<0.05)，見(jiàn)表2，表3。表2 各組大鼠乳頭形態(tài)學(xué)的變化（略）表3 各組大鼠病理組織學(xué)變化評(píng)分（略）2.3 各組大鼠血液流變學(xué)參數(shù)的

11、變化C組全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積比A組明顯降低；D、E組除血漿黏度，E組除紅細(xì)胞壓積與A組比較差異無(wú)顯著性外，其余指標(biāo)差異均有顯著性(P<0.05或P<0.01)，見(jiàn)表4。表4 抗小葉增生合劑對(duì)大鼠血液流變學(xué)參數(shù)的變化（略）3 討論 根據(jù)本病的癥候?qū)W特點(diǎn)，祖國(guó)醫(yī)學(xué)將其劃歸“乳癖”范疇，多由肝氣郁結(jié)、思慮過(guò)度而傷脾胃，所致肝郁痰凝或沖任失調(diào)，經(jīng)脈氣血運(yùn)行不暢，以致氣、血、痰、瘀互結(jié)而成腫塊?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，乳腺增生病的發(fā)生與內(nèi)分泌功能紊亂，卵巢功能失調(diào)，致使體內(nèi)雌激素、孕激素以及垂體催乳素，促卵泡成熟激素等的紊亂有關(guān)3，當(dāng)雌二醇過(guò)度刺激時(shí)，可促使乳腺導(dǎo)管上皮和乳腺

12、小葉的腺泡發(fā)育增多，伴有小葉腺泡數(shù)增多，使乳腺組織從正常到增生。因而雌二醇配合黃體酮肌注成為常用的乳腺增生造模方法?？剐∪~增生合劑具有活血化瘀、疏肝解郁、消腫止痛的作用，在其所含中藥成分中，當(dāng)歸有補(bǔ)血、活血、調(diào)經(jīng)止痛等作用，當(dāng)歸的主要成分是阿魏酸，阿魏酸具有抑制血小板聚集、促進(jìn)血小板解聚、抗血栓、抗氧化和自由基、解除血管平滑肌痙攣、提高膜穩(wěn)定性，以及抗炎、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)免疫等藥理作用；柴胡具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)疼、解熱、抗炎、防止纖維增生等作用；白芍可養(yǎng)肝體、斂肝氣、緩肝急、補(bǔ)肝陰、平肝陽(yáng)、調(diào)血海而止疼痛；白芷解表散風(fēng)，通竅，止痛，消腫排膿；元胡、丹參、田七有活血祛瘀的作用；生牡蠣味咸、澀，性微寒，入肝腎經(jīng)

13、，本品為貝殼之屬，質(zhì)體重墜，能平肝潛陽(yáng)，能增加軟堅(jiān)散結(jié)的效果。在本研究中，經(jīng)服用抗乳腺小葉增生合劑治療的絕大多數(shù)患者癥狀消失，腫塊質(zhì)地軟化，服用抗小葉增生合劑后，大鼠增生的乳房直徑與模型組比明顯減小，乳頭形態(tài)學(xué)癥狀顯著減輕，血清雌二醇含量顯著降低，組織切片中的乳腺小葉數(shù)目明顯減少，小葉腺泡數(shù)減少，腔內(nèi)分泌物少，說(shuō)明抗小葉增生合劑對(duì)大鼠乳腺組織病理改變有明顯減輕或促進(jìn)其組織病理病變的恢復(fù)作用。乳腺增生病患者血液流變性呈高黏狀態(tài)4，本研究表明乳腺增生大鼠血液流變性也發(fā)生變化，而服用抗小葉增生合劑后能明顯降低乳腺小葉增生大鼠全血和血漿黏度比，降低紅細(xì)胞壓積，表明活血化瘀作用也是抗小葉增生合劑治療乳腺增生病的機(jī)制之一?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1饒金才，李蘭珍，陳云生，等.乳腺增生病動(dòng)物模型的復(fù)制與病理類(lèi)型J.中國(guó)病理生理雜志，1992，8(6):671-672.2SUN Qingguo, AN Bingyin, WANG Jianjun, et al. Experimental study of rufukang tablets on hyperplasia of mammary gland J. Chines