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1、會(huì)計(jì)學(xué)1病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)二病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)二第1頁(yè)/共35頁(yè)第2頁(yè)/共35頁(yè)第3頁(yè)/共35頁(yè)第4頁(yè)/共35頁(yè)第5頁(yè)/共35頁(yè)第6頁(yè)/共35頁(yè)3.3.半固體穿刺接種法:半固體穿刺接種法:保存菌種或觀察細(xì)菌的動(dòng)力和保存菌種或觀察細(xì)菌的動(dòng)力和生化反應(yīng)。生化反應(yīng)。4.4.液體接種法:液體接種法:用于肉湯、蛋白胨水、糖發(fā)酵管等液用于肉湯、蛋白胨水、糖發(fā)酵管等液體培養(yǎng)基的接種。體培養(yǎng)基的接種。第7頁(yè)/共35頁(yè)四四種種接接種種方方法法第8頁(yè)/共35頁(yè)第9頁(yè)/共35頁(yè)第10頁(yè)/共35頁(yè)第11頁(yè)/共35頁(yè)菌落與菌苔菌落與菌苔菌落菌落菌苔菌苔第12頁(yè)/共35頁(yè)第13頁(yè)/共35頁(yè)菌膜菌膜菌沉淀菌沉淀均勻渾濁均勻渾濁對(duì)照
2、對(duì)照第14頁(yè)/共35頁(yè)第15頁(yè)/共35頁(yè)有動(dòng)力有動(dòng)力 現(xiàn)象現(xiàn)象無(wú)動(dòng)無(wú)動(dòng)力力 現(xiàn)象現(xiàn)象第16頁(yè)/共35頁(yè)第17頁(yè)/共35頁(yè) 一.腸道桿菌的生物學(xué)性狀 二.S-S培養(yǎng)基的特性及用途 三.分離培養(yǎng)方法 主要內(nèi)容第18頁(yè)/共35頁(yè)(一)腸道桿菌的生物學(xué)性狀 埃希菌屬:大腸埃希菌沙門(mén)菌屬:傷寒沙門(mén)菌 甲型、乙型、丙型副傷寒志賀菌屬:痢疾志賀菌腸桿菌科的重要菌屬及代表菌種第19頁(yè)/共35頁(yè)1.相似的形態(tài)染色第20頁(yè)/共35頁(yè)乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 腸道致病菌 腸道非致病菌 多數(shù)不發(fā)酵乳糖 多數(shù)發(fā)酵乳糖 初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌第21頁(yè)/共35頁(yè) +/- - +傷寒桿菌 - - +痢疾桿菌 - 大腸桿菌 硫化
3、氫 乳糖 葡萄糖 菌名 三種細(xì)菌的生化反應(yīng) 第22頁(yè)/共35頁(yè)成成 分分含量(含量(g/Lg/L)作作 用用牛肉膏牛肉膏5 5營(yíng)養(yǎng)成分營(yíng)養(yǎng)成分乳糖乳糖1010營(yíng)養(yǎng)成分,發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)成分,發(fā)酵蛋白胨蛋白胨5 5營(yíng)養(yǎng)成分營(yíng)養(yǎng)成分膽酸鈉、膽酸膽酸鈉、膽酸- -脫氧膽脫氧膽酸鈉鹽混合物(三號(hào)酸鈉鹽混合物(三號(hào))3.53.5抑制抑制G+G+、大部分大腸菌群和變形、大部分大腸菌群和變形桿菌桿菌檸檬酸鈉檸檬酸鈉8.58.5抑制抑制G+G+、大部分大腸菌群和變形、大部分大腸菌群和變形0.1%0.1%煌綠溶液煌綠溶液0.33ml0.33ml抑制抑制G G+ +、大部分大腸菌群和變形、大部分大腸菌群和變形硫代硫酸鈉硫
4、代硫酸鈉8.58.5檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生10%10%檸檬酸鐵溶液檸檬酸鐵溶液10ml10ml檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生1%1%中性紅溶液中性紅溶液2.5ml2.5ml指示劑指示劑瓊脂瓊脂1717凝固劑凝固劑(二)SS培養(yǎng)基 (Salmonella Shigella Agar )第23頁(yè)/共35頁(yè) (二)SS培養(yǎng)基第24頁(yè)/共35頁(yè)細(xì)細(xì) 菌菌SS平板平板大腸桿菌大腸桿菌粉紅色粉紅色大菌落大菌落痢疾桿菌痢疾桿菌無(wú)色細(xì)小,半透明菌落無(wú)色細(xì)小,半透明菌落傷寒桿菌傷寒桿菌無(wú)色細(xì)小無(wú)色細(xì)小 半透明菌落半透明菌落 ( (中間有黑色沉淀)中間有黑色沉淀)SS培養(yǎng)基中菌落特點(diǎn)第25頁(yè)/共35頁(yè)
5、第26頁(yè)/共35頁(yè)放放44冰箱中保存?zhèn)溆谩1渲斜4鎮(zhèn)溆谩?(三)糞便標(biāo)本的分離培養(yǎng)第27頁(yè)/共35頁(yè)1.1.空氣中細(xì)菌的檢查(空氣中細(xì)菌的檢查(每個(gè)班每個(gè)班2 2個(gè)平皿個(gè)平皿) 原理:原理:根據(jù)空氣中攜帶有微生物氣溶膠(以固體或液根據(jù)空氣中攜帶有微生物氣溶膠(以固體或液體微小顆粒分散于空氣中的分散體系稱為氣溶膠,其中的體微小顆粒分散于空氣中的分散體系稱為氣溶膠,其中的氣體是分散介質(zhì))粒子在地心引力的作用下,以垂直的自氣體是分散介質(zhì))粒子在地心引力的作用下,以垂直的自然方式沉降到瓊脂培養(yǎng)基上。然方式沉降到瓊脂培養(yǎng)基上。 方法:方法:在室內(nèi)選擇一處放一個(gè)平皿。揭開(kāi)皿蓋,皿蓋在室內(nèi)選擇一處放一個(gè)平
6、皿。揭開(kāi)皿蓋,皿蓋扣置于皿底下,暴露扣置于皿底下,暴露放置放置15min,即蓋上皿蓋,放入,即蓋上皿蓋,放入37 培養(yǎng)培養(yǎng)24小時(shí),觀察結(jié)果。小時(shí),觀察結(jié)果。細(xì)菌在自然界的分布細(xì)菌在自然界的分布第28頁(yè)/共35頁(yè)2.2.紫外線對(duì)細(xì)菌的影響紫外線對(duì)細(xì)菌的影響(每個(gè)實(shí)驗(yàn)室(每個(gè)實(shí)驗(yàn)室2 2個(gè)培養(yǎng)皿)個(gè)培養(yǎng)皿)第29頁(yè)/共35頁(yè) 分三次接種,分三次接種,每次取一環(huán)。每次取一環(huán)。第一次密涂接第一次密涂接種后旋轉(zhuǎn)種后旋轉(zhuǎn)60度二度二次密涂接種,次密涂接種,然后同方向旋然后同方向旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)60度后再次密度后再次密涂接種。涂接種。第30頁(yè)/共35頁(yè)第31頁(yè)/共35頁(yè)方法方法:取一普通平皿培養(yǎng)基,取一普通平皿培養(yǎng)基,一部分寫(xiě)上一部分寫(xiě)上“前前”,另一部分,另一部分寫(xiě)上寫(xiě)上“后后”,然后將手指在寫(xiě),然后將手指在寫(xiě)有有“前前”的部分沾一下,再將的部分沾一下,再將手指用酒精進(jìn)行消毒,在寫(xiě)手指用酒精進(jìn)行消毒,在寫(xiě)有有“后后”的部分沾一下。放入的部分沾一下。放入3737溫箱培養(yǎng)溫箱培養(yǎng)2424小時(shí)小時(shí)后觀察。后觀察。 (每個(gè)實(shí)驗(yàn)室(每個(gè)實(shí)驗(yàn)室4 4個(gè)平皿)個(gè)平皿)第32頁(yè)/共35頁(yè)5.5.自選細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)自選細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)(4(4個(gè)個(gè)) )方法方
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