葉片熒光測量實驗報告精品資料

1、葉片熒光測量實驗報告1. 實驗?zāi)康?. 實驗方法利用 PAM100,熒光成像系統(tǒng)測量葉綠素?zé)晒?. 實驗原理及一些參數(shù)的意義熒光的變化反映光合與熱耗散的變化。光化學(xué)淬滅（ Photochemical Quenching）:由于光合作用引起的熒光下降，反映了光合活性的高低。qP=(Fm-Fs)/Fv=1-(Fs-Fo)/(Fm-Fo) （基于 “沼澤模型 ”）qL=(Fm-F)/(Fm-Fo)·Fo/F=qP ·Fo/F（基于 “湖泊模型 ”）非光化學(xué)淬滅（ Non-Photochemical Quenching）:由于熱耗散引起的熒光下降。qN=(Fv-Fv )/Fv=1-

2、(Fm-Fo)/(Fm-Fo) NPQ=(Fm-Fm)/Fm=Fm/Fm-1 ，不需測定 Fo，適合野外調(diào)查 qN 或 NPQ 反映了植物耗散過剩光能轉(zhuǎn)化為熱的能力， 反映了植物的光保護(hù)能力。Fv/Fm =(Fm-Fo)/Fm : PS II 的最大量子效率，反映植物潛在最大光合能力，高等植物一般在 0.80.84 之間，當(dāng)植物受到脅迫 （Stress）時，F(xiàn)v/Fm 顯著下降。PS II = Yield = (Fm -Fs)/Fm=F/Fm = qP·Fv/Fm: 任一光照狀態(tài)下 PS II 的實際量子產(chǎn)量（實際光合能力、實際光合效率）不需暗適應(yīng)，不需測定Fo，適合野外調(diào)查。Y(N

3、PQ)=1-Y(II)-1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)：調(diào)節(jié)性能量耗散， PS II處調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)量。若Y(NPQ)較高，一方面表明植物接受的光強(qiáng)過剩， 另一方面則說明植物仍可以通過調(diào)節(jié)（如將過剩光能耗散為熱）來保護(hù)自身。Y（NPQ）是光保護(hù)的重要指標(biāo)。Y(NO)=1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1) ：非調(diào)節(jié)性能量耗散PS II 處非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)量。若Y(NO) 較高，則表明光化學(xué)能量轉(zhuǎn)換和保護(hù)性的調(diào)節(jié)機(jī)制（如熱耗散） 不足以將植物吸收的光能完全消耗掉。也就是說，入射光強(qiáng)超過了植物能接受的程度。這時，植物可能已經(jīng)受到損傷，或者（盡管還未受到損傷）繼續(xù)照光的話

4、植物將要受到損傷。Y（NO）是光損傷的重要指標(biāo)。P：光合速率，即相對電子傳遞速率rETRPm: 最大光合速率，即最大相對電子傳遞速率rETRmax：初始斜率，反映了光能的利用效率：光抑制參數(shù)Ik=Pm/：半飽和光強(qiáng)，反映了樣品對強(qiáng)光的耐受能力。AL: 作用光ML: 檢測光SP/P+Fsp:飽和脈沖光注：光化學(xué)淬滅可以被一種短飽和脈沖光（0.21 s）暫時完全抑制，剩余的熒光淬滅就是非光化學(xué)淬滅。 （葉綠素 a 熒光理論及其應(yīng)用張西斌）4. 實驗步驟4.1 Dual-Pam100的操作步驟參數(shù)調(diào)整打開 Dual-Pam100 的界面，更改下面參數(shù)：Mode:fluo+P700;Means lig

5、ht:fiuo-int=10P700-int=5Act light:Far red light=5Width=40sSat pulse:P+F+sp-int=10;點 Light ，進(jìn)入界面，再點edit 進(jìn)行下面參數(shù)的編輯：Intense1，4,8,12,14,16,18,19,20Time2,2,2,2,2,2,2,2,2,之后的全部設(shè)置為0；進(jìn)入測定界面開始測定回到 slow kinetics 界面點擊 F0， Fm(確定 Y（II ）值 0.8-0.85 之間 )點 Bal( 平衡光系統(tǒng) I ， II ) 點 Pm( 待回復(fù)灰色 ) 點 start(過 4s 后) 點 Al 作用光（過

6、 3min半）點 P+F+sp 飽和光（ 此時一般會觀察到紅色曲線達(dá)到平衡 ）過 30s 左右關(guān)掉 Al( 曲線會下降 ) 再過 1min 左右（曲線平穩(wěn)）點 stop在當(dāng)前界面點擊曲線保存按鈕保存曲線?；氐?light curve 界面點 Bal點 start（出現(xiàn)對話框 new F0,Fm and Pm-determindtion 點NO ）等曲線繪成后點report 保存數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)保存后手動清空當(dāng)前界面數(shù)據(jù)。4.2 熒光成像系統(tǒng)的操作先打開熒光成像儀再打開電腦對應(yīng)系統(tǒng)將葉片按要求放在葉室；進(jìn)入 setting 界面如下調(diào)整參數(shù)：Meas.Light-int=1Frequence=1;Act.