土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)(1)ppt課件

1、規(guī)規(guī)范范培育基類(lèi)型培育基類(lèi)型配制特點(diǎn)配制特點(diǎn)主要運(yùn)用主要運(yùn)用物物理理性性質(zhì)質(zhì)固體培育基固體培育基參與瓊脂較多參與瓊脂較多微生物的分別、計(jì)數(shù)等微生物的分別、計(jì)數(shù)等半固體培育基半固體培育基參與瓊脂較少參與瓊脂較少察看微生物運(yùn)動(dòng)、鑒定察看微生物運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種、保藏菌種等菌種、保藏菌種等液體培育基液體培育基不參與瓊脂不參與瓊脂工業(yè)消費(fèi)，延續(xù)培育工業(yè)消費(fèi)，延續(xù)培育化化學(xué)學(xué)組組成成合成培育基合成培育基由知成分配制而成，由知成分配制而成，培育基成清楚確培育基成清楚確菌種分類(lèi)、鑒定菌種分類(lèi)、鑒定天然培育基天然培育基由天然成分配制而成，由天然成分配制而成，培育基成分不明確培育基成分不明確工業(yè)消費(fèi)工業(yè)消費(fèi)目目的的

2、用用途途鑒別培育基鑒別培育基添加某種指示劑或化學(xué)藥品添加某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物鑒別不同種類(lèi)的微生物選擇培育基選擇培育基添加或短少某種化學(xué)物質(zhì)添加或短少某種化學(xué)物質(zhì) 培育、分別出特定的培育、分別出特定的微生物微生物培育基：詳細(xì)配方可以不同，但普通都含有水、碳源、培育基：詳細(xì)配方可以不同，但普通都含有水、碳源、 氮源和無(wú)機(jī)鹽。氮源和無(wú)機(jī)鹽。 12+H2O345678 1 1、分析該配方的培育基對(duì)微生物能否具有挑、分析該配方的培育基對(duì)微生物能否具有挑選作用？假設(shè)有，又是如何進(jìn)展挑選的？選作用？假設(shè)有，又是如何進(jìn)展挑選的？ 有挑選作用。尿素是培育基中的獨(dú)一氮源，有挑選作用。尿素是培育

3、基中的獨(dú)一氮源，因此，原那么上只需可以利用尿素的微生物才可因此，原那么上只需可以利用尿素的微生物才可以生長(zhǎng)。以生長(zhǎng)。答：不一定，有些微生物可以利用其他微生物答：不一定，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)繁衍，因此可以在選擇培育基的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)繁衍，因此可以在選擇培育基上生長(zhǎng)的微生物不一定是所需求的微生物，還上生長(zhǎng)的微生物不一定是所需求的微生物，還需求進(jìn)一步的驗(yàn)證。需求進(jìn)一步的驗(yàn)證。 2、只需可以在選擇培育基上生長(zhǎng)的微生物能否就、只需可以在選擇培育基上生長(zhǎng)的微生物能否就是所需求的微生物？是所需求的微生物？910以尿素為以尿素為獨(dú)一氮源獨(dú)一氮源的培育基的培育基牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨培育基

4、培育基是分別分別尿素尿素細(xì)菌細(xì)菌判別該判別該培育基培育基有無(wú)選有無(wú)選擇性擇性實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組對(duì)照組培育基類(lèi)型培育基類(lèi)型能否能否接種接種 目的目的 結(jié)果結(jié)果只生長(zhǎng)尿只生長(zhǎng)尿素細(xì)菌素細(xì)菌生長(zhǎng)多種生長(zhǎng)多種微生物微生物是是1112液的體積液的體積(ml)(ml)； M M 代表稀釋倍數(shù)。代表稀釋倍數(shù)。 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表 面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋 液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的 菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有 多少活菌。多少活菌。13普通以三個(gè)稀釋

5、度中的第二個(gè)稀釋度普通以三個(gè)稀釋度中的第二個(gè)稀釋度所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在5050個(gè)左右為最個(gè)左右為最好。好。14 例：兩位同窗用稀釋涂布平板法測(cè)定同例：兩位同窗用稀釋涂布平板法測(cè)定同 一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106106的培育基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。的培育基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 1 1、甲同窗在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的、甲同窗在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為菌落數(shù)為230230。 2 2、乙同窗在該濃度下涂布了、乙同窗在該濃度下涂布了A A、B B、C C三個(gè)平板，三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為統(tǒng)計(jì)的菌

6、落數(shù)分別為2121、212212、256256，該同窗以這三，該同窗以這三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 他以為這兩位同窗的作法正確嗎？假設(shè)有問(wèn)題，他以為這兩位同窗的作法正確嗎？假設(shè)有問(wèn)題，錯(cuò)在哪？錯(cuò)在哪？ 甲：沒(méi)有反復(fù)實(shí)驗(yàn)至少涂布甲：沒(méi)有反復(fù)實(shí)驗(yàn)至少涂布3 3個(gè)平板個(gè)平板 乙：乙：A A組結(jié)果誤差過(guò)大，不運(yùn)用于計(jì)算平均值組結(jié)果誤差過(guò)大，不運(yùn)用于計(jì)算平均值15三設(shè)置對(duì)照三設(shè)置對(duì)照 1 1、設(shè)置對(duì)照的目的：、設(shè)置對(duì)照的目的： 排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試要素對(duì)實(shí)排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。

7、信度。 對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除了對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除了 被測(cè)試被測(cè)試 的條的條件外，其他條件都件外，其他條件都 一樣一樣 的實(shí)驗(yàn)。的實(shí)驗(yàn)。滿(mǎn)足該條件的稱(chēng)為滿(mǎn)足該條件的稱(chēng)為 對(duì)照組，未滿(mǎn)足對(duì)照組，未滿(mǎn)足該條件的稱(chēng)為該條件的稱(chēng)為 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn) 組。組。162.設(shè)置對(duì)照的方法：設(shè)置對(duì)照的方法：空白對(duì)照：不給對(duì)照組任何處置要素?？瞻讓?duì)照：不給對(duì)照組任何處置要素。條件對(duì)照：給對(duì)照組施以部分實(shí)驗(yàn)要素，但不是所要研討的條件對(duì)照：給對(duì)照組施以部分實(shí)驗(yàn)要素，但不是所要研討的 處置要素。處置要素。本身對(duì)照：對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研討對(duì)象上進(jìn)展。本身對(duì)照：對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研討對(duì)象上進(jìn)展。相互對(duì)照：不單設(shè)對(duì)照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相

8、互對(duì)照。相互對(duì)照：不單設(shè)對(duì)照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對(duì)照。課本課本2323頁(yè)例子中頁(yè)例子中A A同窗的結(jié)果與其他同窗的結(jié)果與其他同窗不同，能夠的解釋有兩種，怎樣辦？同窗不同，能夠的解釋有兩種，怎樣辦？一是由于土樣不同；一是由于土樣不同；二是由于培育基污染混入其他二是由于培育基污染混入其他N源或操作失誤。源或操作失誤。171819 由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此選擇了一個(gè)較為廣泛的范圍：稀釋倍數(shù)為選擇了一個(gè)較為廣泛的范圍：稀釋倍數(shù)為103103107107。 預(yù)備牛肉膏蛋白胨培育基和以尿素為獨(dú)一氮源的預(yù)備牛肉膏蛋白胨培育基和以尿素為獨(dú)一氮源的選

9、擇培育基。每個(gè)稀釋度下需求選擇培育基。每個(gè)稀釋度下需求3 3個(gè)選擇培育基，個(gè)選擇培育基，1 1個(gè)牛個(gè)牛肉膏蛋白胨培育基。還需求肉膏蛋白胨培育基。還需求8 8個(gè)滅菌試管和個(gè)滅菌試管和1 1個(gè)滅菌移液個(gè)滅菌移液管管 。 將稀釋一樣倍數(shù)的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基將稀釋一樣倍數(shù)的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的數(shù)目，因上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培育基可以作為對(duì)照，用來(lái)判別選擇此，牛肉膏蛋白胨培育基可以作為對(duì)照，用來(lái)判別選擇培育基能否起到了選擇作用。培育基能否起到了選擇作用。2021測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，普通選用104105106

10、測(cè)定放線(xiàn)菌的數(shù)量，普通選用103104105測(cè)定真菌的數(shù)量，普通選用10210310422問(wèn)題：為什么分別不同的微生物要采用不同的稀問(wèn)題：為什么分別不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍一樣嗎？解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍一樣嗎？23實(shí)驗(yàn)時(shí)要實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)培育皿作對(duì)培育皿作好標(biāo)志。注好標(biāo)志。注明培育基類(lèi)明培育基類(lèi)型、培育時(shí)型、培育時(shí)間、稀釋度、間、稀釋度、培育物等。培育物等。假設(shè)得到了假設(shè)得到了2個(gè)或個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在個(gè)以上菌落數(shù)目在30300的平板，的平板，那么闡明稀釋操作比較勝利

11、，并可以進(jìn)展菌落的計(jì)數(shù)，那么闡明稀釋操作比較勝利，并可以進(jìn)展菌落的計(jì)數(shù)，假好像一稀釋倍數(shù)的三個(gè)反復(fù)的菌落數(shù)相差較大，闡明假好像一稀釋倍數(shù)的三個(gè)反復(fù)的菌落數(shù)相差較大，闡明實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確，需求重新實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確，需求重新實(shí)驗(yàn)。242526 三、操作提示三、操作提示27大，表示實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確。大，表示實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確。2829303132六、例題解析六、例題解析 例例1 1對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是A A在液體培育基上進(jìn)展在液體培育基上進(jìn)展 B B至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C C接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 D D及時(shí)補(bǔ)充耗費(fèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充耗費(fèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 解

12、析：細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定是人們?cè)谝欢l件下進(jìn)展的。解析：細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定是人們?cè)谝欢l件下進(jìn)展的。這些條件是：一種細(xì)菌、恒定容積的培育基，液體培育基、定這些條件是：一種細(xì)菌、恒定容積的培育基，液體培育基、定時(shí)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。在這些條件下，才干測(cè)定出細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律。時(shí)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。在這些條件下，才干測(cè)定出細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律。測(cè)定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微生物的測(cè)定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微生物的生長(zhǎng)；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體培育基生長(zhǎng)；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體培育基才干經(jīng)過(guò)樣品推測(cè)細(xì)菌總數(shù)。假設(shè)接種多種細(xì)菌，那么會(huì)發(fā)生才干

13、經(jīng)過(guò)樣品推測(cè)細(xì)菌總數(shù)。假設(shè)接種多種細(xì)菌，那么會(huì)發(fā)生種間斗爭(zhēng)而不能測(cè)定一種微生物的生長(zhǎng)規(guī)律。在接種時(shí)，要保種間斗爭(zhēng)而不能測(cè)定一種微生物的生長(zhǎng)規(guī)律。在接種時(shí)，要保證一定的接種量。證一定的接種量。答案：答案：A A33例例2 2在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，種內(nèi)在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，種內(nèi)斗爭(zhēng)最顯著最猛烈的時(shí)期是斗爭(zhēng)最顯著最猛烈的時(shí)期是A A調(diào)整期調(diào)整期 B B對(duì)數(shù)期對(duì)數(shù)期 C C穩(wěn)定期穩(wěn)定期 D D衰亡期衰亡期解析：種內(nèi)斗爭(zhēng)是一種生態(tài)要素。種內(nèi)斗爭(zhēng)反響了種內(nèi)生物解析：種內(nèi)斗爭(zhēng)是一種生態(tài)要素。種內(nèi)斗爭(zhēng)反響了種內(nèi)生物對(duì)生存空間和生活資源的爭(zhēng)奪。在生活空間富余，營(yíng)養(yǎng)充足的時(shí)對(duì)生存空間和生活資源的爭(zhēng)

14、奪。在生活空間富余，營(yíng)養(yǎng)充足的時(shí)候，種內(nèi)斗爭(zhēng)的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的添加，候，種內(nèi)斗爭(zhēng)的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的添加，每個(gè)個(gè)體的生存空間越來(lái)越少，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也越來(lái)越少，每個(gè)個(gè)體每個(gè)個(gè)體的生存空間越來(lái)越少，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也越來(lái)越少，每個(gè)個(gè)體對(duì)生存空間和資源的爭(zhēng)奪也越來(lái)越猛烈，種內(nèi)斗爭(zhēng)就越來(lái)越猛烈。對(duì)生存空間和資源的爭(zhēng)奪也越來(lái)越猛烈，種內(nèi)斗爭(zhēng)就越來(lái)越猛烈。由此可知，在穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭(zhēng)最猛烈。在衰亡期，微生物的數(shù)由此可知，在穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭(zhēng)最猛烈。在衰亡期，微生物的數(shù)目曾經(jīng)開(kāi)場(chǎng)減少，目曾經(jīng)開(kāi)場(chǎng)減少，pHpH曾經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級(jí)代謝產(chǎn)曾經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級(jí)代謝產(chǎn)

15、物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭(zhēng)主要是與無(wú)機(jī)環(huán)物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭(zhēng)主要是與無(wú)機(jī)環(huán)境的斗爭(zhēng)。境的斗爭(zhēng)。答案：答案：C C341.1.對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是 A. A.在液體培育基上進(jìn)展在液體培育基上進(jìn)展 B. B.至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C. C.接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 D. D.及時(shí)補(bǔ)充耗費(fèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充耗費(fèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2.2.運(yùn)用選擇培育基的目的是運(yùn)用選擇培育基的目的是 A. A.培育細(xì)菌培育細(xì)菌 B. B.培育真菌培育真菌 C. C.使需求的微生物大量繁衍使需求的微生物大量繁衍 D. D.表現(xiàn)

16、某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別3.3.能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分別是( )( ) A.CO2 A.CO2和和N2 B.N2 B.葡萄糖和葡萄糖和NH3NH3 C.CO2 C.CO2和尿素和尿素 D. D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素A A C CD D354.4.以下說(shuō)法不正確的選項(xiàng)是以下說(shuō)法不正確的選項(xiàng)是 A. A.科學(xué)家從科學(xué)家從70708080度熱泉中分別到耐高溫的度熱泉中分別到耐高溫的TaqDNATaqDNA聚聚合酶合酶 B. B.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次

17、為個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值 C. C.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 D. D.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類(lèi)最多。種類(lèi)最多。5.5.為培育和分別出酵母菌并淘汰雜菌，常在培育基中為培育和分別出酵母菌并淘汰雜菌，常在培育基中參與參與 A. A.較多的氮源物質(zhì)較多的氮源物質(zhì) B. B.較多的碳源物質(zhì)較多的碳源物質(zhì) C. C.青霉素類(lèi)藥物青霉素類(lèi)藥物 D. D.高濃度食鹽高濃度食鹽B BC C36例例3 320052005年江蘇抗生素作為治療細(xì)菌感年江蘇抗生素作為治療細(xì)菌感染的藥物，其高效性和宏大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值使抗生素工業(yè)染的藥物，其高效性和宏大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值使抗生素工業(yè)經(jīng)久不衰。其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)器具有劃時(shí)代的意經(jīng)久不衰。其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)器具有劃時(shí)代的意義。義。青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。青霉菌的新陳代謝類(lèi)型青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。青霉菌的新陳代謝類(lèi)型是是 ，青霉素是青霉菌的，青