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文檔簡介

1、課題 2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段一、單項選擇題1下列有關(guān) PCR的描述,不正確的是()A PCR技術(shù)的原理是 DNA復(fù)制B用 PCR技術(shù)擴增 DNA是一個酶促反應(yīng),需耐高溫的解旋酶和DNA聚合酶C一個 DNA片段經(jīng) PCR擴增,可形成nn2解析: PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù),它以極少量的DNA為模板,以四種脫氧核苷酸為原料,在引物作用下使DNA聚合酶從引物的3' 端連接脫氧核苷酸,短時間內(nèi)迅速復(fù)制上百萬份的DNA拷貝。 PCR利用 DNA在不同溫度下變性解聚或復(fù)性的特性來解旋并結(jié)合引物,不用解旋酶解旋。答案: B2.PCR 技術(shù)最突出的優(yōu)點是()A原理簡單B原料易找C

2、 Taq DNA 聚合酶有耐熱性D快速、高效、靈活、易于操作答案: D3 PCR技術(shù)的操作步驟依次是()A高溫變性、中溫延伸、低溫復(fù)性B高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸C中溫延伸、高溫變性、低溫復(fù)性D中溫延伸、低溫復(fù)性、高溫變性答案: B4聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù) ) 是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進(jìn)行, 使目的 DNA得以迅速擴增, 其簡要過程如下圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述,不正確的是()A PCR技術(shù)是在實驗室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板C PCR技術(shù)中以核糖核苷酸

3、為原料,以指數(shù)方式擴增D應(yīng)用 PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變解析: PCR技術(shù)是人工合成DNA的方法,原料是脫氧核苷酸,不是核糖核苷酸。答案: C5 PCR 實驗室中使用的微量離心管、緩沖溶液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是()A反復(fù)洗滌B用酒精擦洗C高壓滅菌D在 20 下儲存解析: 為了避免外源DNA等因素的污染,PCR實驗室中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在20 儲存 。使用前,將所需的試劑從冰箱內(nèi)拿出,放在冰塊上緩慢融化。答案: C6 PCR技術(shù)中,引物的作用是()A打開 DNA雙鏈B催化合成DNA

4、子鏈C使 DNA聚合酶能夠從引物的3端開始復(fù)制D提供模板解析: DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA,而只能從 3端延伸 DNA鏈,引物的作用就在于此。答案: C7有關(guān) PCR反應(yīng)的敘述中,正確的是()A PCR反應(yīng)所需要的引物只有RNAB PCR反應(yīng)所需要的原料是核糖核苷酸C PCR反應(yīng)所需要的酶在60 會變性D PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行答案: D8 DNA 檢測技術(shù)可應(yīng)用于親子鑒定、遺傳病檢測等領(lǐng)域。DNA檢測離不開對樣品DNA的 PCR擴增。不同樣品DNA的擴增過程或條件不同的是()A引物B DNA聚合酶C四種脫氧核苷酸D預(yù)變性的溫度解析: 不同的樣品DNA有不同的核苷酸序列

5、,由于引物能與模板DNA(樣品基互補配對原則結(jié)合,因此不同樣品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。答案: ADNA)按照堿9復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至4060,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合,原因不包括()A由于模板DNA比引物復(fù)雜得多B引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞C加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少D模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性,不可能再次結(jié)合解析: DNA分子在 80100 的溫度范圍內(nèi)雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈打開,在DNA分子復(fù)制時提供模板,這個過程稱為變性。當(dāng)溫度緩慢降低到50 左右時

6、,兩條解聚的單鏈重新結(jié)合成雙鏈,稱為復(fù)性,故D 項闡述錯誤。答案: D10在 PCR擴增 DNA的實驗中,根據(jù)設(shè)計,一分子DNA經(jīng) 3010循環(huán)次數(shù)不夠 Taq DNA聚合酶活力不夠或其活性受到抑制次循環(huán)后,應(yīng)得到約()引物不能與親鏈結(jié)230合系統(tǒng)設(shè)計欠妥AB CD 解析: 該現(xiàn)象屬于在PCR擴增中假陰性現(xiàn)象。其原因有:(1) Taq DNA 聚合酶活力不夠或其活性受到抑制導(dǎo)致催化效率降低,得到的產(chǎn)物比預(yù)期的少; (2) 引物設(shè)計不合理,可能不能與模板DNA結(jié)合,導(dǎo)致無法進(jìn)行擴增;(3) 提取的模板數(shù)量或質(zhì)量不過關(guān),可能不能起模板作用。也無法進(jìn)行擴增;(4)PCR 系統(tǒng)設(shè)置不妥,達(dá)不到預(yù)期的效

7、果;(5) 循環(huán)次數(shù)過少,產(chǎn)物的量比預(yù)期的少。答案: D二、雙項選擇題11關(guān)于 DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是()A DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5端延伸DNA鏈B DNA復(fù)制需要引物C引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進(jìn)行結(jié)合D DNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸解析:由于 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3端即復(fù)制方向是由3端向 5端延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補配對的原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5端向 3端延伸。答案: BC12 PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同,它們是()A PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或 RNAB PCR過程不需要DNA聚合酶C PCR

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