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1、 53聚合酶活性;聚合酶活性; 酶與模板結(jié)合后構(gòu)象改動(dòng),識(shí)別堿基,正確配對(duì)后才發(fā)揚(yáng)聚協(xié)酶與模板結(jié)合后構(gòu)象改動(dòng),識(shí)別堿基,正確配對(duì)后才發(fā)揚(yáng)聚協(xié)作用。作用。 3 5外切酶活性;外切酶活性; 主要是對(duì)新生主要是對(duì)新生DNA鏈進(jìn)展校正,防止鏈進(jìn)展校正,防止“錯(cuò)配錯(cuò)配 53外切酶活性;外切酶活性; 主要是對(duì)主要是對(duì)DNA損傷的修復(fù),以及在損傷的修復(fù),以及在DNA復(fù)制時(shí)復(fù)制時(shí)RNA引物引物 的的切除及其空隙的填補(bǔ)切除及其空隙的填補(bǔ)內(nèi)切酶活性:切掉不配對(duì)堿基內(nèi)切酶活性:切掉不配對(duì)堿基 53聚合酶活性;聚合酶活性; 35外切酶活性。外切酶活性。 該酶無(wú)該酶無(wú)53外切酶活性;且活性很低,功能尚不清楚外切酶活性;
2、且活性很低,功能尚不清楚 3535OHOHP P全保管復(fù)制?分散式復(fù)制?半保管復(fù)制?DNA復(fù)制方式?復(fù)制方式?半保管復(fù)制半保管復(fù)制半保管復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)半保管復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù) 1958年年Meselson和和Stahl用同位素用同位素15N標(biāo)標(biāo)志大腸桿菌志大腸桿菌DNA,首,首先證明了先證明了DNA的半保的半保管復(fù)制。管復(fù)制。親親代代第第一一代代第第二二代代DNA旋轉(zhuǎn)酶旋轉(zhuǎn)酶(拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶)、 DNA解鏈酶、單鏈結(jié)解鏈酶、單鏈結(jié)合蛋白協(xié)同作用合蛋白協(xié)同作用條新生鏈都只能從5端向3端延伸,前導(dǎo)鏈延續(xù)合成,滯后鏈分段合成。這些分段合成的新生DNA片段稱(chēng)岡崎片段。1、在、在DNA聚合酶聚合酶催化下切除催化下切除RNA引物;留下的空隙由引物;留下的空隙由該酶催化合成一段該酶催化合成一段DNA填補(bǔ)上;填補(bǔ)上;2、在、在DNA銜接酶作用下,銜接相鄰的銜接酶作用下,銜接相鄰的DNA鏈;鏈;3、修復(fù)摻入、修復(fù)摻入DNA鏈的錯(cuò)配堿基;以修復(fù)方式填補(bǔ)終止區(qū)鏈的錯(cuò)配堿基;以修復(fù)方式填補(bǔ)終止區(qū)50-100bp的空缺。的空缺。 這樣以?xún)蓷l親代這樣以?xún)蓷l親代DNA鏈為模板,各自構(gòu)成一條新的鏈為模板,各自構(gòu)成一條新的DN
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