細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)大綱

1、細(xì)胞生物學(xué)實驗教學(xué)大綱【課程編號】17314359【英文名稱】Experiment of Cell Biology 【課程學(xué)時】32【適用專業(yè)】生物技術(shù)一、本實驗課程的教學(xué)目的和要求細(xì)胞生物學(xué)是一門實踐性強(qiáng)，對實驗技能實驗儀器要求較高的課程，因此開設(shè)本課程的目的是通過實驗教學(xué)，使理論與實踐統(tǒng)一，使學(xué)生加深對課堂講授內(nèi)容的認(rèn)識與理解，掌握細(xì)胞生物學(xué)實驗設(shè)備的操作方法，具備觀察和研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的基本方法，學(xué)會發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的基本技能，為畢業(yè)后從事生物學(xué)相關(guān)的科研和教學(xué)工作奠定基礎(chǔ)。實驗內(nèi)容既包括經(jīng)典的細(xì)胞生物學(xué)實驗技術(shù)與方法，又安排了一些反映當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展水平的內(nèi)容。通過實驗課不僅加深

2、對理論知識的理解和認(rèn)證，而且通過對細(xì)胞生命現(xiàn)象的觀察和親手操作，使學(xué)生獲得有關(guān)細(xì)胞生命活動的感性知識，有效地提高理論課的教學(xué)效果，提高學(xué)生實驗技能，并培養(yǎng)學(xué)生樹立獨立設(shè)計實驗的思考觀念和獨立處理問題、解決問題的能力。本實驗計劃學(xué)時32學(xué)時，開設(shè)7-9個實驗項目，并有部分實驗可供同學(xué)們選作。二、本實驗課程與其它課程的關(guān)系細(xì)胞生物學(xué)實驗是對細(xì)胞生物學(xué)理論課程教學(xué)的重要補(bǔ)充和完善。本課程應(yīng)在植物學(xué)實驗、無機(jī)及分析化學(xué)實驗、有機(jī)化學(xué)實驗和生物化學(xué)實驗等課程之后開設(shè)，而遺傳學(xué)染色體研究技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)以細(xì)胞生物學(xué)實驗為基礎(chǔ)，因此本課程應(yīng)在遺傳學(xué)實驗、分子生物學(xué)實驗、細(xì)胞工程實驗等課程之前開設(shè)，并盡量

3、同細(xì)胞生物學(xué)理論課教學(xué)同步。三、實驗課程理論教學(xué)內(nèi)容安排本實驗課程不安排理論教學(xué)內(nèi)容。四、實驗內(nèi)容安排1、實驗項目的類型及性質(zhì)序號實驗項目名稱學(xué)時類型性質(zhì)驗證綜合設(shè)計演示必做自選1細(xì)胞凝集反應(yīng)22不同因素對細(xì)胞膜的通透性影響23巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察24植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察25細(xì)胞器的分離與提取技術(shù)26動植物細(xì)胞線粒體和液泡系的超活染色與觀察47動物細(xì)胞培養(yǎng)248抗癌藥物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡的形態(tài)和生化特征觀察149動植物染色體標(biāo)本的制備與觀察 8實驗學(xué)時合計6022240143228實驗個數(shù)合計97101452、實驗項目說明實驗一、細(xì)胞凝集反應(yīng)（2學(xué)時）【目的要求】通過本實驗可以使

4、學(xué)生熟悉并理解細(xì)胞凝集反應(yīng)的原理，掌握臨時裝片技術(shù)和顯微鏡的使用方法；能熟練地將理論教學(xué)中細(xì)胞膜的相關(guān)知識與實際操作觀察相結(jié)合?！緝?nèi)容】顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象，學(xué)會配置PBS緩沖液和兔子靜脈采集血液方法?！痉椒ā渴褂媒叹呤痉?，要求學(xué)生親自操作臨時制片法、無菌法抽取兔子靜脈血（含抗凝劑）?！緟⒖假Y料】楊漢民編，細(xì)胞生物學(xué)實驗，高等教育出版社出版，1997年第二版。實驗二、不同因素對細(xì)胞膜的通透性影響（2學(xué)時）【目的要求】了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度；能熟練地將理論教學(xué)中細(xì)胞膜的相關(guān)知識與實際操作觀察相結(jié)合?！緝?nèi)容】制備羊血細(xì)胞懸液和低滲溶液、等滲鹽溶液，將不同等滲溶液加入到相同體

5、積的羊血中觀察溶液顏色變化和溶血現(xiàn)象?！痉椒ā渴褂媒叹呤痉?，要求學(xué)生親自操作。【參考資料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版實驗三、巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察（2學(xué)時）【目的要求】通過對小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞活動的觀察，加深理解細(xì)胞吞噬作用的過程及意義；掌握小鼠腹腔注射給藥和頸椎脫臼處死方法?！緝?nèi)容】實驗前一天給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯；實驗時腹腔注射1%雞紅細(xì)胞懸液；脫臼處死小鼠，注射器吸取腹腔液；制片顯微鏡觀察?！痉椒ā渴褂媒叹呤痉叮髮W(xué)生親自操作小鼠腹腔注射給藥和頸椎脫臼處死方法以及制片?！緟⒖假Y料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，200

6、3年第一版實驗四、植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察（2學(xué)時）【目的要求】掌握用光學(xué)顯微鏡觀察植物細(xì)胞骨架的原理及方法，觀察光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞骨架的網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu)。【內(nèi)容】植物細(xì)胞用適當(dāng)濃度的TritonX100處理 后，可破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，但細(xì)胞骨架系統(tǒng)的蛋白質(zhì)卻保護(hù)完好?？捡R斯亮藍(lán)R250(Coomassie brilliant blue R250)是一種蛋白質(zhì)染料，處理后的材料用考馬斯亮藍(lán)R250(考馬斯亮藍(lán)R250) 染色后，用光學(xué)顯微鏡觀察，可以見到一種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，即是細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)?！痉椒ā渴褂媒叹呤痉?，要求學(xué)生親自操作?！緟⒖假Y料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版楊

7、漢民編，細(xì)胞生物學(xué)實驗，高等教育出版社出版，1997年第二版。實驗五、細(xì)胞器的分離與提取技術(shù)（2學(xué)時）【目的要求】用差速離心法分離動植物細(xì)胞核與染色體；了解差速離心的原理；掌握有關(guān)操作方法?！緝?nèi)容】樣品處理；離心；分離物鑒定；鏡檢?！痉椒ā渴褂媒叹呤痉叮髮W(xué)生親自操作?！緟⒖假Y料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版實驗六、動植物細(xì)胞線粒體和液泡系的超活染色與觀察（4學(xué)時）【目的要求】觀察動植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)、數(shù)量與分布；掌握一些細(xì)胞器的超活染色技術(shù)。【內(nèi)容】樣品處理；制片；染色；鏡檢。【方法】理論講授結(jié)合教具示范，要求學(xué)生親自操作?！緟⒖假Y料】楊漢民

8、編，細(xì)胞生物學(xué)實驗，高等教育出版社出版，1997年第二版。實驗七、動物細(xì)胞培養(yǎng)（24學(xué)時）【目的要求】掌握原代細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法和操作過程及原代培養(yǎng)細(xì)胞觀察方法。以原代培養(yǎng)的小鼠胎兒細(xì)胞為材料，學(xué)習(xí)動物細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的消化法進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)的實驗過程，為細(xì)胞純化、冷凍保存、生長曲線的測定和細(xì)胞活性檢查等實驗奠定基礎(chǔ)，并進(jìn)一步練習(xí)無菌操作技術(shù)。【內(nèi)容】處死動物取材；樣品處理；分裝培養(yǎng)；觀察?！痉椒ā坷碚撝v授結(jié)合教具示范，要求學(xué)生親自操作?！緟⒖假Y料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版實驗八、抗癌藥物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡的形態(tài)和生化特征觀察（14學(xué)時）【目的要求】掌

9、握細(xì)胞凋亡的形態(tài)特征；學(xué)會根據(jù)染色質(zhì)的凝集程度、是否形成凋亡小體和細(xì)胞膜通透性變化，鑒別凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞、正常細(xì)胞；了解凋亡細(xì)胞的生化特征，學(xué)會制作DNA laddered的 一種方法；掌握鑒別凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞和正常細(xì)胞的原理；掌握誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法?！緝?nèi)容】培養(yǎng)細(xì)胞；樣品處理；鏡檢觀察凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞、正常細(xì)胞；從凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞、正常細(xì)胞中提取細(xì)胞DNA，進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳并觀察和攝影?！痉椒ā坷碚撝v授結(jié)合教學(xué)工具示范，學(xué)生親自操作。【參考資料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版實驗九、動植物染色體標(biāo)本的制備與觀察（8學(xué)時）【目的要求】學(xué)習(xí)動植物染色體標(biāo)本的制備技術(shù)，掌握染色體計數(shù)和分析的方法?！緝?nèi)容】取材；0.1秋水仙素液室溫預(yù)處理； Carnoy固定；70酒精保存；鹽酸酒精離析液，60水解；清水漂洗兩次； 1%醋酸洋紅染色（植物細(xì)胞）和姬姆薩染色（動物細(xì)胞），壓片觀察?！痉椒ā坷碚撝v授結(jié)合教學(xué)工具示范，學(xué)生親自操作?！緟⒖假Y料】王金發(fā)編，細(xì)胞生物學(xué)實驗教程，科學(xué)出版社出版，2003年第一版五、實驗考核方式(報告)及成績評定實驗總成績：實驗過程表現(xiàn)成績40%、實驗報告成績占60%。實驗過程表現(xiàn)成績：包括學(xué)習(xí)態(tài)度是否認(rèn)真、實驗操作是否正確規(guī)范、實驗結(jié)果是否正確、是否具有創(chuàng)新意識、打掃衛(wèi)生等方面。實驗報告成績：包括實