2017-2018學(xué)年高中生物專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

1、課題 2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)、選擇題i 下列關(guān)于土壤取樣的敘述，錯(cuò)誤的是（）A. 土壤取樣時(shí)，應(yīng)選取肥沃、濕潤(rùn)的土壤B. 先鏟去表層土 3 cm 左右，再取樣C. 取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D.應(yīng)在酒精燈火焰旁稱(chēng)取土壤解析：在“分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中，必須在含微生物豐富的濕潤(rùn)、肥沃土壤中取樣，所用小鐵鏟和信封必須滅菌。答案：C2用以尿素為唯一氮源加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基，培養(yǎng)尿素分解菌后，指示劑將（）答案：B3.測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選104 105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),量一般選用 102、103和 104倍稀釋液，其原因是（）A.細(xì)菌個(gè)體小，真菌

2、個(gè)體大B. 細(xì)菌易稀釋?zhuān)婢灰紫♂孋. 細(xì)菌在土壤中的含量比真菌高D. 隨機(jī)的，沒(méi)有原因解析：細(xì)菌在土壤中的含量多于真菌，因此稀釋涂布時(shí)， 細(xì)菌的稀釋倍數(shù)要大于真菌的稀釋倍數(shù)，這樣才能使平板上培養(yǎng)出的菌落清晰易辨。答案：C4.下列能分離出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是（）7 IA. KHPO4、NQHPG MgSO7H2Q 葡萄糖、尿素、瓊脂、水B. KHPO4、NQHPO、MgSO7H2O 葡萄糖、瓊脂、水C. KHPC4、NstHPO、MgSO7H2O 尿素、瓊脂、水解析：要想分離尿素分解菌，應(yīng)把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源，而 無(wú)碳源，D 項(xiàng)中牛肉膏、蛋白胨都可作為氮源。答案：A5.用來(lái)判斷選

3、擇培養(yǎng)基是否起到04課后鞏固提升賊- -科學(xué)設(shè)題蓋全面A.C.變藍(lán)色變黑色B.變紅色D.變棕色解析：尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成了氨，會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),酚紅指示劑將變紅。pH 升高，加入而測(cè)定真菌的數(shù)D.KHPC4、 NstHPO、MgSO7H2CB 項(xiàng)中無(wú)氮源，C 項(xiàng)中2了選擇作用，需要設(shè)置的對(duì)照是（）A. 未接種的選擇培養(yǎng)基B. 未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C. 接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D.接種了的選擇培養(yǎng)基解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù)并接種，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，因此，應(yīng)選擇接種菌種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。對(duì)照實(shí)驗(yàn)遵循的原則是單一變量

4、原則。答案：C6.在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，一同學(xué)從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150 個(gè)菌落，而其他同學(xué)只篩選出大約50 個(gè)菌落。該同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有（）1土樣不同 培養(yǎng)基被污染 操作失誤 沒(méi)有設(shè)置對(duì)照A.B.C.D.a 1解析：實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同，最可能的原因是土樣不同，其次是操作失誤或培養(yǎng)基被污染，而與是否設(shè)置對(duì)照沒(méi)有關(guān)系。答案：A7. 抗生素可由微生物產(chǎn)生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時(shí)，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線(xiàn)接種一種從土壤中獲得的甲菌，在27C下培養(yǎng) 3 天,形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌（圖 A），繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng) 3

5、天，結(jié)果如圖B。分析結(jié)果，得出的結(jié)論是（）AB1甲菌產(chǎn)生了抗生素2丁菌的生長(zhǎng)被丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制3乙菌的生長(zhǎng)被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制4丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制了乙菌的生長(zhǎng)A.B.C.D.解析：乙、丙、丁三種致病菌不會(huì)產(chǎn)生抗生素，否則靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生長(zhǎng)。從圖 B 來(lái)看，乙菌的生長(zhǎng)被抑制，最可能的原因是甲菌產(chǎn)生了抗生素，此種抗生素只能抑制乙菌的生長(zhǎng)，而對(duì)丙、丁兩種致病菌沒(méi)有影響。答案：A3&下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A. 可采用干熱滅菌法對(duì)微生物培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B. 測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計(jì)數(shù)法C. 分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D. 分離能

6、分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：培養(yǎng)基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法，而干熱滅菌法通常適用于玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品；分離能分解尿素的細(xì)菌， 用的選擇培養(yǎng)基里尿素是唯4一的氮源，這樣才能分離出分解尿素的細(xì)菌。答案： A9下列有關(guān)土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的說(shuō)法，不正確的是( )A. 因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量不同，所以為獲得不同類(lèi)型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離B. 測(cè)定土壤中不同微生物的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C.如果得到了 2 個(gè)或 2 個(gè)以上菌落數(shù)目在 30300 的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并 能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)D. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的

7、菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出 一些細(xì)菌菌落解析：樣品的稀釋度直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目。 實(shí)際操作中， 通常選用一定稀釋范圍 的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)， 以保證獲得菌落在 30300 之間適于計(jì)數(shù)的平板。 土壤中不同類(lèi)型的微 生物的數(shù)量不同，因此在測(cè)定其數(shù)量時(shí)，選用的稀釋范圍也不同。將菌液稀釋相同的倍數(shù)， 在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，從而說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的篩選作用。答案： D10欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作不正確的是()A. 將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B. 同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板C. 可將未接種

8、的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照D. 用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌解析： 欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，要將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)?同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板， 同時(shí)要將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為 對(duì)照，以檢查培養(yǎng)基滅菌是否徹底；篩選分解尿素的細(xì)菌要用酚紅指示劑。答案： D11 下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是解析：在 A 項(xiàng)的培養(yǎng)基中既有尿素作為唯一氮源，又有其他各種成分，可以選擇出分解尿素的細(xì)菌；而 C 項(xiàng)中缺少碳源，B 項(xiàng)中無(wú)尿素作氮源，D 項(xiàng)中有牛肉膏可提供氮源的成分。答案： A12 某同學(xué)對(duì) 101、102、103倍稀釋液計(jì)

9、數(shù)的平均菌落數(shù)分別為2 760、295 和 16，則菌落總數(shù)為 (所用稀釋液體積為 0.1 mL)( )A. 2.76X104個(gè)/mLB . 2.95X105個(gè)/mLC. 4.6X104個(gè)/mLD. 3.755X104個(gè)/mL解析：菌落計(jì)數(shù)法是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。 首先選擇平均菌落數(shù)在KH2PO4、Na2HPO4、MgSQ7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、蒸餾水KH2PO4、Na2HPO4、MgSO7H2O、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水KH2PO4、Na2HPO4、MgSO7H2O、尿素、瓊脂、蒸餾水KH2PO4、Na2HPO4、MgSO7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、蒸餾水若所有稀釋倍數(shù)的5平板

10、，以該平均菌落數(shù)與體積之比乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細(xì)菌總數(shù)。菌落數(shù)均不在 30300 之間，則應(yīng)以最接近 300 或 30 的平均菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)算。答案：B 二、非選擇題13.下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題:KHPQNazHPQMgSQ7HbQ葡萄糖尿素蒸餾水1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g定容至1 000 mL(1)該培養(yǎng)基按作用劃分屬于_培 養(yǎng) 基 ， 該 培 養(yǎng) 基 具 有 選 擇 作 用 的 原 因 是_。(2)若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是_,接種時(shí)應(yīng)米用 _法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，不可能是圖中的

11、AI?CD某同學(xué)用 0.1 mL 稀釋液在稀釋倍數(shù)為106的平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是 _。*(4)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其做進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入_指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。 解析：(1)由于尿素是該培養(yǎng)基的唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能在上面生存，因 此該培養(yǎng)基具有選擇作用，屬于選擇培養(yǎng)基。(2)若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中的菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，應(yīng)使用固體培養(yǎng)基， 并采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，因此需加入凝固劑如瓊脂；D 為平板劃線(xiàn)法得到的平板。(3)每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)=(C+V)XM

12、163 十 0.1X10 T =1.63X10。(4)尿素分解會(huì)產(chǎn)生氨，氨能使酚紅指示劑變紅，據(jù)此可以推測(cè)培養(yǎng)基中的尿素是否被分解。答案：(1)選擇 該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖(2)瓊脂 稀釋涂布平板D (3)1.63X109酚紅 紅14.下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)，完成下列問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿，接 種到無(wú)氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。用這種方法， 可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離。材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨

13、培養(yǎng)基、盛有9 mL 無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布器、無(wú)菌培養(yǎng)皿、盛有90 mL 無(wú)菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟：1倒平板：分別將無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應(yīng)在_ 操作。2制備土壤稀釋液：取土樣10 g 加入盛有 90 mL 無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無(wú)菌吸管吸取上清液 1 mL,轉(zhuǎn)至盛有 9 mL 的無(wú)菌水的試管中，依次稀釋到107稀釋度。6373涂布：按照由 1010 稀釋度的順序分別吸取0.1 mL 進(jìn)行平板涂布，每個(gè)稀釋度下，無(wú)氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布 _ 個(gè)平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布 _ 個(gè)平板。4_培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在 2830C下培養(yǎng) 34 d。細(xì)菌的計(jì)

14、數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)， 選取菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果測(cè)定的平均值為_(kāi)50,則每克樣品中的菌株數(shù)是_。（稀釋度是 10）（2）預(yù)期結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù) _ （填“多于”或“少于”） 無(wú) 氮 培 養(yǎng) 基 上 的 數(shù) 目。 原 因 是解析：（1）在酒精燈火焰旁倒平板，可以避免雜菌的污染。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，一般設(shè) 置 35個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在 30300 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值，則每克樣品中的菌 株數(shù)為（50 十 0.1）XI05= 5X107個(gè)。（2）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照，以消除無(wú)關(guān)變量對(duì) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，該培養(yǎng)基適合土壤中幾乎所有細(xì)菌生存，所以它比無(wú)氮

15、培養(yǎng)基上的菌落數(shù) 目多。答案：（1）酒精燈火焰旁3130300 5X107（2）多于 無(wú)氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類(lèi)生存15.在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使 用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明傕取托期使用辰日2謹(jǐn)除就削的Y事A.M*土壤譽(yù)出帶（1）_ 制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行 _ 處理。（2）要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、用途方面來(lái)看，

16、上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是_ 。（3）_在劃線(xiàn)培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是 _或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。（4）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無(wú)透明帶菌落利用的氮源主要是_，有透明帶菌落利用的氮源主要是 _ ，據(jù)此可篩選出目的菌。（5）科研人員用放射線(xiàn)處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A 和 B,然后對(duì)突變株 A 和 B 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示：.無(wú)透團(tuán)I村透明帶葡熱岐焙莽雄左血 U 峯2阮及H以府劃線(xiàn)總D.培芥蘋(píng)申養(yǎng) 旌履劃純是從I啟劃魄末端畀始7該種的菌種般培 口養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng)B不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng)A+ B能生長(zhǎng)不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng)突變株 A 不能在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的原因是 _。突變株 A 和 B 混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是解析：（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理。（2）從物理性質(zhì)來(lái)看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；從用途方面來(lái)看，該培養(yǎng)基是以含氮除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。（3）在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細(xì)菌（除具有固氮能力的細(xì)菌外）是不能生長(zhǎng)的。（4）含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明， 菌落周?chē)纬赏该鲙怯?/p>