殺菌、殺蟲劑對(duì)作物安全性室內(nèi)試行準(zhǔn)則講述

1、殺菌、殺蟲劑對(duì)作物安全性室內(nèi)試驗(yàn)準(zhǔn)則（試行）1適用范圍本準(zhǔn)則規(guī)定了殺菌、殺蟲劑使用后可能對(duì)作物產(chǎn)生藥害風(fēng)險(xiǎn)的室內(nèi)試驗(yàn)及安全性評(píng)價(jià)的基本原則和方法。適用于評(píng)價(jià)擬申請(qǐng)登記殺菌、殺蟲劑對(duì)作物的直接藥害風(fēng)險(xiǎn)，為其登記和合理使用提供科學(xué)依據(jù)。2術(shù)語和定義2.1安全性：殺菌、殺蟲劑在推薦使用劑量范圍內(nèi)及高于推薦劑量一定范圍內(nèi)使用，對(duì)處理作物不會(huì)造成嚴(yán)重不可逆上海，不影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)。一般安全性越高，藥害風(fēng)險(xiǎn)越低。2.2藥害：殺菌、殺蟲劑使用后對(duì)作物產(chǎn)生的可視性傷害。2.3苗前處理：藥劑種子處理（包衣、拌種、浸種等）和傳播前后的苗前土壤處理（撒施、澆灌、注射、熏蒸等）。2.4生長期處理：指在作物出苗以后至

2、收獲之前的藥劑處理。其中在出苗以后至孕穗或花蕾形成之前的藥劑處理，稱為營養(yǎng)生長期處理；在孕穗或花蕾形成后的處理稱為生殖生長期處理。2.5采后處理：指在采收以后對(duì)作物的果實(shí)（或種子等）進(jìn)行的藥劑處理。3基本原則與要求3.1藥劑。試驗(yàn)藥劑采用與擬申請(qǐng)登記藥劑組分或配方一致的樣品，即配方及加工工藝相同的制劑。注明通用名、含量和劑型。3.1.2劑量設(shè)置。殺菌、殺蟲劑對(duì)作物安全性室內(nèi)試驗(yàn)中，試驗(yàn)藥劑的劑量以生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗(yàn)最高劑量為最低試驗(yàn)劑量，按1倍、2倍、4倍劑量的梯度設(shè)計(jì)試驗(yàn)處理劑量，并設(shè)不含藥處理的對(duì)照。3.2供試作物3.2.1適用靶標(biāo)作物。本準(zhǔn)則主要適用于殺菌、殺蟲劑對(duì)糧食作物、瓜菜

3、類作物、經(jīng)濟(jì)作物等作物的室內(nèi)安全性評(píng)價(jià)，及對(duì)果樹類種苗或組培苗的安全性評(píng)價(jià)。 殺菌、殺蟲劑對(duì)果樹成株生長期的安全性評(píng)價(jià)及其他特殊作物的安全性評(píng)價(jià)，可以參考本準(zhǔn)則有關(guān)規(guī)定在田間進(jìn)行試驗(yàn)。3.2.2供試作物的品種。由于不同品種或生物類型的作物對(duì)殺菌、殺蟲劑的敏感性存在很大差異，殺菌、殺蟲劑對(duì)作物安全性試驗(yàn)，須選用擬申請(qǐng)登記作物的3個(gè)以上不同常規(guī)品種（如：水稻粳稻、秈稻、糯稻，白皮小麥和紅皮小麻等）作為供試作物。3.2.3供試作物的栽培。用于評(píng)價(jià)殺菌、殺蟲劑安全性的每個(gè)作物品種，種質(zhì)或生長勢(shì)需要一致。選用干凈飽滿的種子，采用營養(yǎng)一致的土壤在氣候條件可控的培養(yǎng)箱或溫室內(nèi)培養(yǎng)，保持良好的水肥管理。4試驗(yàn)

4、方法根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗(yàn)施藥時(shí)期和施藥方法選擇。4.1苗前處理4.1.1儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱或光照培養(yǎng)箱或人工氣候室、電子天平（精確度到0.1mg）、移液器、培養(yǎng)皿、種子或土壤處理的容器、直徑150200mm的盆缽等。4.12試材。種子：種質(zhì)一致，去除空癟粒，沖洗干凈并晾干，對(duì)照發(fā)芽率應(yīng)在90%以上。土壤：試驗(yàn)用土壤經(jīng)風(fēng)干過篩，裝入金屬容器，烘箱中65下烘8小時(shí)，晾涼后備用。4.1.3藥劑處理。選用種質(zhì)一致的3個(gè)品種的供試作物種子。按照擬申請(qǐng)登記的施放方法（種子處理或土壤處理）設(shè)計(jì)劑量和進(jìn)行藥劑，應(yīng)該具有水溶性，避免兌水稀釋后沉淀或析出而處理不均勻。 浸種法：將種子浸泡在藥液中，

5、浸泡時(shí)間與生產(chǎn)常規(guī)一致。處理后撈出直接或經(jīng)清洗后晾干，編號(hào)備用。 拌種和種子包衣法：按推薦方法將藥劑與少量細(xì)土或少量水稀釋后，在適當(dāng)大小的容器內(nèi)按無藥對(duì)照和從低劑量至高劑量的順序?qū)⒎N子和藥劑攪拌均勻，晾干后編號(hào)備用。將無藥的營養(yǎng)土裝盆缽4/5，播種后撒藥土10mm，或撒藥土10mm厚后播種再覆蓋無藥或含藥土壤。 經(jīng)種子或土壤處理播種后，每天噴水保持土壤濕潤，利于種子發(fā)芽出苗。4.1.4藥劑對(duì)作物發(fā)芽或出苗的安全性試驗(yàn)方法 首先通過發(fā)芽試驗(yàn)檢測(cè)藥劑對(duì)作物種子發(fā)芽的安全性，如檢測(cè)結(jié)果為嚴(yán)重抑制發(fā)芽，則不需再做出苗試驗(yàn)；如發(fā)芽試驗(yàn)無明顯抑制，則需要通過出苗試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證藥劑對(duì)作物的安全性。 A：發(fā)芽

6、試驗(yàn)：將各藥劑處理的100粒種子，放置于培養(yǎng)皿內(nèi)保持濕潤的濾紙上，根據(jù)不同作物種子的特性，放置在適宜條件下培養(yǎng)，逐日觀察發(fā)芽情況。記錄并計(jì)算對(duì)照發(fā)芽50%，對(duì)照完全發(fā)芽及對(duì)照完全發(fā)芽35天后的各處理發(fā)芽率及根長和根數(shù)。 種子發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn)： （1）禾谷類作物種子，正常發(fā)育主根長度超過種子長度，幼芽長度超過種子長度的1/2. （2）園粒種子幼根和幼芽長度超過種子直徑。 （3）小粒豆類植物種子有正常幼根，并有一個(gè)幼根與子葉相連。 （4）林木類種子的幼根正常，并長于種子長度1/2，小粒種子幼根長度超過種子長度的，均定為發(fā)芽。 B出苗試驗(yàn)：將營養(yǎng)一致的土壤裝于盆缽內(nèi)，孔隙度相似，土壤含水量大約60%，將各

7、處理的100粒種子分別播種于盆缽內(nèi)平整的土壤表面，再覆土310mm（因種質(zhì)而異），20光照培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)，于出苗后7、14、21天定期觀察記錄出苗情況。記載作物的生長狀況和描述藥害癥狀，檢查和計(jì)算不同處理間的出苗率、出苗勢(shì)（整齊度以株高標(biāo)準(zhǔn)差表示）、苗高、根長、根數(shù)、鮮重、干重、根莖重量和長度比。4.2生長期處理4.2.1儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱、人工氣候室或可控日光溫室（光照、溫度、濕度），可控定量噴霧設(shè)備，電子天平（精準(zhǔn)度0.1mg），移液器等。4.2.2試劑。生長抑制的同一作物3個(gè)品種。4.2.3藥劑處理4.2.3.1土壤處理。包括顆粒劑撒施、毒土撒施、澆灌、土壤注射等。按藥劑各處理劑

8、量將顆粒劑均勻撒施，或按劑量將藥劑與225公斤/公頃細(xì)土混合后撒施與作物根圍，或與水稀釋后均勻澆灌或灌注于作物根圍。4.2.3.2噴施。包括噴霧、噴灑、噴粉等方法。按藥劑處理劑量，以無藥對(duì)照，低劑量/濃度至高劑量/濃度進(jìn)行處理。4.2.3.3熏蒸。將生長一致的作物放置在塑料薄膜搭建的密閉空間內(nèi)，按不同處理劑量將藥劑放置在密閉空間內(nèi)自由揮發(fā)或加熱揮發(fā)，對(duì)作物進(jìn)行熏蒸。4.2.3.4莖桿涂抹、注射。按處理劑量將藥劑與水稀釋調(diào)和后進(jìn)行莖桿涂抹或注射。4.2.3.5重復(fù)。每處理不少于4盤（4次重復(fù)），并根據(jù)植株苗大小處理不少于48株。處理后移入溫室培養(yǎng)，各處理生長管理?xiàng)l件一致。 對(duì)于果樹成株生長期的安

9、全性評(píng)價(jià)及其他特殊作物的安全性評(píng)價(jià)，如在田間進(jìn)行試驗(yàn)，每處理不少于1株，至少重復(fù)3次。5安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容 根據(jù)藥劑處理時(shí)期確定作物安全性試驗(yàn)具體評(píng)價(jià)內(nèi)容。 5.1苗前處理。種子處理的藥劑安全性需要調(diào)查隊(duì)種子發(fā)芽和出苗的影響，土壤處理的藥劑只需要調(diào)查對(duì)出苗的影響，主要評(píng)價(jià)藥劑對(duì)種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、出苗率、出苗勢(shì)、苗高/長、根系數(shù)量和主根長度，根/莖鮮重比及植株形態(tài)和葉色的傷害等。5.2營養(yǎng)生長期處理。包括苗后孕穗前或果蔬花蕾形成前藥劑處理（噴施或熏蒸等莖葉處理、撒施和澆灌等根部土壤處理）。按照擬申請(qǐng)登記藥劑推薦使用類似方法在溫室對(duì)盆/缽栽3-5葉期作物苗進(jìn)行藥劑處理。主要評(píng)價(jià)藥劑對(duì)作物株高（莖長）

10、生長速率、植株形態(tài)和葉色的傷害等。5.3生殖生長期處理。包括作物孕穗期和花蕾形成以后、幼果期至收獲期的藥劑處理（噴施和熏蒸等莖葉處理、撒施和澆灌等根部土壤處理）。在溫室和田間按照擬申請(qǐng)登記藥劑的推薦使用方法進(jìn)行藥劑處理。主要評(píng)價(jià)藥劑對(duì)作物株高（莖長）生長速率、植株形態(tài)、葉/果色、結(jié)果率的傷害等。6藥害癥的觀察6.1變色。包括褪綠、黃化、白葉、花葉、銹斑、褐化、綠化等。6.2壞死。斑點(diǎn)、枯斑、葉緣壞死、生長點(diǎn)或攀緣莖枯死、落葉、落花、落果、空秕粒等。6.3生長發(fā)育遲緩。矮化、節(jié)間縮短、葉片伸展收抑、出苗不齊、成熟期改變、生長發(fā)育停滯。6.4萎焉。植株失水萎焉、青枯。6.5畸形。分蘗異常、生長不定

11、根、側(cè)向生長、徒長、葉片卷曲或扭曲變形、莖縊縮、花穗變形。7藥害程度觀察記錄7.1抑制發(fā)芽和出苗 觀察藥劑處理后對(duì)作物種子發(fā)芽和出苗的影響，記錄作物種子發(fā)芽或出苗受抑制的比率，或延緩出苗的天數(shù)等信息。7.2變色 觀察施藥后作物葉片等部位的變色情況，記錄變色程度和變色葉片占供試作物全部作物的比率，以及變色是否可恢復(fù)和恢復(fù)所需要的天數(shù)等信息。7.3壞死 觀察施藥后作物不同器官的壞死情況，記錄出現(xiàn)斑點(diǎn)或壞死的器官占供試作物全部器官的比率，以及斑點(diǎn)或壞死面積占作物器官面積的比例，或落葉、落花、落果或空秕粒的比率等信息。7.4生長停滯觀察施藥后對(duì)作物生長的影響，記錄施藥后21天左右作物生長（植株或枝條或

12、根系新生高度或長度）受抑制情況等信息。7.5萎焉 觀察施藥后作物葉片出現(xiàn)萎焉癥狀情況，記錄出現(xiàn)萎焉癥狀時(shí)間及萎焉持續(xù)時(shí)間，是否可恢復(fù)以及恢復(fù)所需時(shí)間等信息。7.6畸形 觀察記錄施藥后21天左右作物植株分蘗異常、生長不定根、側(cè)向生長、徒長、葉片卷曲或扭曲變形、莖縊縮、花穗變形等情況，記錄產(chǎn)生畸形的植株數(shù)量及占全部植株的比例等信息。8有關(guān)藥害程度系數(shù)的計(jì)算8.1發(fā)芽率和出苗率的抑制率發(fā)芽率或出苗率（%）：G為發(fā)芽率或出苗率，為發(fā)芽或出苗數(shù)，為測(cè)試種子數(shù)或苗數(shù)發(fā)芽率和出苗率的抑制率（%）：I為發(fā)芽率或出苗率的抑制率（%）；C為空白對(duì)照發(fā)芽率或出苗率（%）；T為藥劑處理的發(fā)芽率或出苗率（%）8.2落花（果、葉）率或空秕粒率增加率落花（果、葉）率或空秕粒率（%）： P為落花（果、葉）率或空秕粒率（%），為藥劑處理后落花（果、葉）數(shù)， 為處理前花（果、葉）總數(shù)落花（果、葉）率或空秕粒率增加率（%）：I為落花（果、葉）率或空秕粒率增加率（%）；C為空白對(duì)照落花（果、葉）率或