10蛋白質(zhì)和維生素的測定(選用)

1、第四章第四章 食品的食品的一般成分分析一般成分分析第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定一、概述1、食品中的蛋白質(zhì)含量2、蛋白質(zhì)的生理功用及在食品中的作用構(gòu)成人體的重要成分；構(gòu)成體內(nèi)多種具有重要生理功能的物質(zhì)；參與調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)的酸堿平衡及膠體滲透壓；參與神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)、思維活動和遺傳信息的傳遞 提供能量 ； 食品的重要營養(yǎng)指標(biāo)。 各種不同食品的蛋白質(zhì)含量各不相同，一般動物性食品的蛋白質(zhì)含量高于植物性食品。 樣品蛋白質(zhì)系數(shù)樣品蛋白質(zhì)系數(shù)小麥粉及其制品5.70畜禽肉及其制品6.25全麥5.83芝麻5.30大米5.95乳類6.38花生5.46黃豆5.713、蛋白質(zhì)系數(shù) 蛋白質(zhì)是復(fù)雜的含氮有機化合物

2、，一般蛋白質(zhì)含氮量為16，即一份氮素相當(dāng)于6.25份蛋白質(zhì)，此數(shù)值（6.25）稱為蛋白質(zhì)系數(shù)，不同種類食品的蛋白質(zhì)系數(shù)有所不同。第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定二、測定方法蛋白質(zhì)測定方法凱氏定氮法蛋白質(zhì)快速測定法第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（一）凱氏定氮法1、原理 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O (NH4)2SO4+2NaOH2NH3+Na2SO4+2H2O33427424274243334+2=2+5+)(5+)(=4+2BOHClNHHClOHOBNHOHOBNHBOHN

3、H第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定2、儀器凱氏燒瓶、可調(diào)式電爐、蒸汽蒸餾裝置第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定3、試劑（1）硫酸銅（CuSO45HO2）；（2）硫酸鉀；（3）濃硫酸；（4）40氫氧化鈉溶液；（5） 4硼酸溶液；（6） 0.1molL鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 （7）95%乙醇。（8）甲基紅一次甲基藍混合指示液 將次甲基藍（乙醇溶液1g/L）與甲基紅（乙醇溶液1gL）按1十2體積比混合。第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定4、操作方法 樣品消化蒸餾滴定（1）樣品消化樣品+0.2g硫酸銅+6g硫酸鉀+20ml濃硫酸+玻珠數(shù)粒先小火炭化，無泡沫后，加大火力，液體變藍綠透明，繼續(xù)加熱

4、微沸30分鐘45度角消化終點瓶口不能對著人蓋上小漏斗（2）蒸餾第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定按下圖連接好蒸餾裝置圖加水至2/3體積處，加數(shù)滴甲基橙指示劑和硫酸幾毫升，使水呈酸性夾緊螺旋夾加熱蒸汽發(fā)生瓶中的水，檢查整套裝置是否有漏氣現(xiàn)象，不能漏氣第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（2）蒸餾將消化液全部轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中加10ml硼酸溶液和混合指示劑23d加入NaOH溶液后顏色為深藍色或褐色通入蒸汽開始蒸餾冷凝管下口浸入硼酸溶液中取10ml消化稀釋液沿小玻璃杯移入反應(yīng)室，少量蒸餾水沖洗，塞緊棒狀玻璃塞，向小玻璃杯內(nèi)加入10ml40%NaOH,提起玻璃塞，使NaOH緩慢流入反應(yīng)室，

5、立即塞緊玻璃塞，并在小玻璃杯中加水使之密封。吸收液變藍色后繼續(xù)蒸餾5分鐘，將冷凝管尖端提離液面再蒸餾1min，用蒸餾水沖洗冷凝管尖端，取下接收瓶，關(guān)閉電源第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（3）滴定 取下接收瓶，用0.1000mol/L的鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點。滴定前滴定終點同時做一試劑空白實驗，記錄空白滴定消耗鹽酸的體積。第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定5、計算10010010014. 0)(=%2-1FmVVc）蛋白質(zhì)（第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定6、說明及注意事項（1） 試劑溶液應(yīng)用無氨蒸餾水配制（2）消化時不要用強火，應(yīng)保

6、持和緩沸騰，消化中不時轉(zhuǎn)動凱氏燒瓶，以便冷凝酸液洗下附在瓶壁上的固體殘渣，促進其消化完全。（3）為加速消化，常加入 硫酸鉀：可提高消化體系溶液溫度 硫酸銅：催化劑、消化終點指示劑、蒸餾時堿性反應(yīng)指示劑第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（4）樣品中若含較多脂肪或糖，在開始消化時應(yīng)用小火加熱，并時時搖動；或者加入少量辛醇或液體石蠟或硅油消泡劑，并同時注意控制熱源強度。（5）當(dāng)樣品消化液不易澄清透明時，可將凱氏燒瓶冷卻，加入30%過氧化氫23ml后再繼續(xù)加熱消化。（6）若取樣量較大，如干試樣超過5g，可按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。（7）一般消化至呈透明后，繼續(xù)消化30分鐘即可，一般消化時

7、間約4小時，時間延長可能引起氨的損失。有機物如分解完全，消化液呈藍色或淺綠色，但含鐵量多時，呈較深綠色。（8）蒸餾裝置不能漏氣第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（9）蒸餾前若加堿量不足，消化液呈藍色不生成氫氧化銅沉淀，需再增加氫氧化鈉用量（10）硼酸吸收液的溫度不應(yīng)超過40，否則對氨的吸收作用減弱，置于冷水浴中使用。（11）蒸餾完畢后，應(yīng)先將冷凝管下端提離液面,清洗管口，再蒸1分鐘后關(guān)掉熱源，否則可能造成吸收液倒吸。（二）微量凱氏定氮法1、原理及適用范圍同前、原理及適用范圍同前2、與常量法不同點：、與常量法不同點：加入硼酸量加入硼酸量由由50 ml 變?yōu)樽優(yōu)?10 ml,滴定用鹽酸濃度由滴

8、定用鹽酸濃度由0.1 mol/L 變?yōu)樽優(yōu)?.01 mol/L ,可用微量滴定管?？捎梦⒘康味ü堋?.儀器有了一定改進。儀器有了一定改進。第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（三）自動凱氏定氮儀法 在凱氏定氮法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的自動凱氏定氮儀法，具有安全、高效、準(zhǔn)確的優(yōu)點。儀器：消化爐自動蒸餾裝置第六節(jié)第六節(jié) 蛋白質(zhì)的測定蛋白質(zhì)的測定（二）蛋白質(zhì)快速測定法雙縮脲法 紫外分光光度法 染料結(jié)合法 水楊酸比色法 第七節(jié)第七節(jié) 維生素的測定維生素的測定一、概述二、水溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定 維生素是調(diào)節(jié)人體各種新陳代謝過程必不可少的重要營養(yǎng)素。維生素水溶性維生素脂溶性維生素維生素B、C

9、等維生素A、D、E、K第七節(jié)第七節(jié) 維生素的測定維生素的測定維生素都具有以下共同特點：維生素都具有以下共同特點： 這些化合物或其前體化合物都在天然食物中存在；這些化合物或其前體化合物都在天然食物中存在；它們不能供給機體熱能。也不是構(gòu)成組織的基本原它們不能供給機體熱能。也不是構(gòu)成組織的基本原料，主要功用是通過作為輔酶的成份調(diào)節(jié)代謝過程，料，主要功用是通過作為輔酶的成份調(diào)節(jié)代謝過程，需要量極?。凰鼈円话阍隗w內(nèi)不能合成，或合成量需要量極??；它們一般在體內(nèi)不能合成，或合成量不能滿足生理需要，必須經(jīng)常從食物中攝??；長期不能滿足生理需要，必須經(jīng)常從食物中攝??；長期缺乏任何一種維生素都會導(dǎo)致相應(yīng)的疾病。缺乏

10、任何一種維生素都會導(dǎo)致相應(yīng)的疾病。第七節(jié)第七節(jié) 維生素的測定維生素的測定 我們在評價食品的營養(yǎng)價值，開發(fā)利用高含量維生素的我們在評價食品的營養(yǎng)價值，開發(fā)利用高含量維生素的食品資源，指導(dǎo)人們合理調(diào)整膳食結(jié)構(gòu)，指導(dǎo)制定加工工藝食品資源，指導(dǎo)人們合理調(diào)整膳食結(jié)構(gòu)，指導(dǎo)制定加工工藝或貯存條件，最大限量地保留各種維生素，還要控制強化食或貯存條件，最大限量地保留各種維生素，還要控制強化食品中加入量，防中毒，都離不開分析檢測工作。品中加入量，防中毒，都離不開分析檢測工作。二、二、 水溶性維生素的測定水溶性維生素的測定 水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、

11、氯仿等大多數(shù)有機溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；大多數(shù)有機溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，持別在堿性條件下加熱，但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，持別在堿性條件下加熱，可大部或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子可大部或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響；等的影響； 維生素維生素B B2 2對光，特別是紫外線敏感，易被光線破壞；對光，特別是紫外線敏感，易被光線破壞； 維生素維生素C C對氧、銅離子敏感，易被氧化。對氧、銅離子敏感，易被氧化。二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定 維生素維生素C的測定的測定總維

12、生素C包括：還原型、脫氫型及二酮古樂糖酸。 維生素C常用的測定方法有測定方法 2,6-二氯靛酚法（還原型VC） 熒光法2,4-二硝基苯肼法 (總VC)碘酸法 碘量法 GB/T 5009.862003 第一法第一法GB/T 5009.862003第一法第一法二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定（一）二氯靛酚法（測定還原型抗壞血酸）1、原理還原型抗壞血酸還原型2，6-二氯靛酚法（無色）H+2，6-二氯靛酚法（粉紅色）+脫氫型抗壞血酸+2、試劑（1）2%草酸溶液（2）0.000167mol/L KIO3標(biāo)液（3）1%淀粉溶液；（4）6%KI溶液；二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定（

13、5）抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml)標(biāo)定：吸標(biāo)液（VC）5ml于三角瓶加6%KI溶液0.5ml加1%淀粉3滴用0.001N KIO3標(biāo)液滴定到淡蘭色。088. 0=21VVT二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定（6）0.02%2，6二氯靛酚溶液 標(biāo)定：吸5ml已知濃度V C標(biāo)液 加5ml 1%草酸 用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色，在15秒不褪色為終點。 計算：每毫升2，6-二氯靛酚相當(dāng)于維生素C的毫克數(shù)等于滴定度（T）21=VVCT二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定3、測定步驟樣品還原型Vc的提取還原型Vc的測定（1）提取 鮮樣的提?。悍Q100g鮮樣加等量1%草酸溶

14、液，倒入搗碎機中打成勻漿，取10-40g勻漿（含1-2 mg抗壞血酸）倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀釋定容，混勻。 干樣的制備：稱1-4g （含1-2 mg抗壞血酸）放入研缽內(nèi)，加入1%草酸溶液磨成勻漿，用草酸溶液定容到100ml。 上述溶液若顏色深，可加入白陶土，將上述溶液過濾，濾液備用。二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定（2）滴定 吸取5-10ml濾液，置于50ml三角瓶，快速加入2,6二氯靛酚溶液滴定，直到紅色不能立即消失，而后再盡快，逐滴加入，以呈現(xiàn)的粉紅色在15秒內(nèi)不消失為終點。二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定4、計算 V -消耗染料體積（ml）V0-

15、滴定空白時所消耗的燃料的體積（ml）T -1ml染料所能氧化維生素C的毫克數(shù) 含有樣 品的克數(shù)M-滴定時所取濾液中含樣品重量，g100)-(=)100/0MTVVgmgC（維生素二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定5、說明及注意事項（1）樣品采取后，應(yīng)浸泡在已知量的2%草酸溶液中，以防止維生素C氧化損失，測定過程要迅速測定過程要迅速。（2）若樣品濾液顏色較深，可加入白陶土再過濾。不能使用活性碳進行脫色處理脫色處理，因為活性碳會氧化維生素C，同時還會吸附維生素C。（3）貯存過久的罐頭食品，可能含大量的含大量的FeFe2+2+，要用8%8%的醋酸的醋酸代替2%草酸。 （4）本法適用于果品、

16、蔬菜及其加工制品中還原型抗壞血酸的測定（不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽和硫代硫酸鹽）。二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定（二） 2，4-二硝基苯肼法 1、原理還原型抗壞血酸脫氫型抗壞血酸氧化二酮古樂糖酸氧化二酮古樂糖酸2，4-二硝基苯肼脎520nm比色二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定2、試劑4.5mol/L硫酸（9+1）硫酸2% 2，4-二硝基苯肼2%草酸抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml2%硫尿1%硫尿1mol/ml鹽酸1%草酸活性炭二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定3、測定步驟樣品的制備顯色硫酸處理比色氧化稱一定樣（100g)鮮樣 加等量1%草酸

17、于高速搗碎機搗碎 取勻漿140g 用1%草酸定容100ml 過濾濾液待用取濾液25ml 加2g活性炭 搖1分鐘 靜置過濾 棄去初濾液，取濾液10ml 加入2%硫脲溶液 混勻 得樣品氧化液取上述氧化液各4ml于三支試管中向其中兩支管加入2%2，4-二硝基苯肼1.0ml,另一管作空白 將三支管加蓋 于37保溫箱3小時 取出后樣品管放入冰水中 樣品空白管取出后冷至室溫 在樣品空白管加入2，4-二硝基苯肼 1ml 置于室溫下放置10-15min 樣品管和空白管都于冰浴中 向上述已放入冰水中的三支試管各加入（9+1）H2SO4 5ml于各管中（邊加邊搖） 將試管從冰浴中取出 室溫下放置30分鐘后立即比色

18、，在520nm測吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的含量二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定4、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 加2g活性碳 于50ml抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液中，振搖1min，過濾，過濾。取10ml濾液置于500ml容量瓶中，加5.0g硫尿，用1%草酸溶液稀釋至刻度，抗壞血酸濃度為20ug/ml。取7個100ml容量瓶編號 1 2 3 4 5 6 7加VC標(biāo)液20ug/ml 5 10 20 25 40 50 60ml加硫脲溶液（ml） 95 90 80 75 60 50 40ml2，4-二硝基苯肼（ml） 1 1 1 1 1 1 1ml 按樣品測定步驟進行顯色反應(yīng)，形成脎并比色。以抗壞血酸為縱坐標(biāo)，

19、吸光度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。二、水溶性維生素的測定二、水溶性維生素的測定5、結(jié)果計算1000100=FmVCX式中：X-樣品中總抗壞血酸含量，mg/100g c- 從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得“樣品氧化液”中總Vc的濃度，ug/ml V-試樣用1%草酸定容的體積，ml m-樣品質(zhì)量，g F-樣品氧化處理過程中的稀釋倍數(shù)三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定（一）性質(zhì)（1）脂溶性維生素不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有機溶劑（2）維生素A、維生素D對酸不穩(wěn)定，維生素E對酸穩(wěn)定。維生素A、維生素D對堿穩(wěn)定，維生素E對堿不穩(wěn)定，但在抗氧化劑存在下或惰性氣體保護下，也能經(jīng)受堿的煮沸（3）維生

20、素A、D、E耐熱性好，能經(jīng)受煮沸三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定（二）脂溶性維生素測定 脂溶性維生素測定樣品預(yù)處理 樣品樣品 皂化脫脂皂化脫脂 脫脂樣品脫脂樣品 有機溶劑提取有機溶劑提取脂溶性維生素脂溶性維生素 有機溶有機溶劑提取液劑提取液 濃縮測定濃縮測定三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定 v 維生素維生素A存在于動物性脂肪中，主要來源于肝臟、魚干存在于動物性脂肪中，主要來源于肝臟、魚干油、蛋類、乳類等動物性食品中。植物性食品中不合油、蛋類、乳類等動物性食品中。植物性食品中不合VA，但，但在深色果蔬中含有胡蘿卜素，它在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)樵谏钌咧泻泻}卜素，它在人體內(nèi)可

21、轉(zhuǎn)變?yōu)閂A，故稱，故稱為為VA原。原。 維生素維生素A A的測定常用的方法有三氯化銻比色法、的測定常用的方法有三氯化銻比色法、紫外分光光度法、熒光分析法、液相色譜法。紫外分光光度法、熒光分析法、液相色譜法。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定v1 1、高效液相色譜法測定食物中、高效液相色譜法測定食物中VAVA、VE VE （GB/T 5009.822003GB/T 5009.822003中第一法）中第一法） 高效液相色譜法高效液相色譜法測定維生素測定維生素A A是近幾年發(fā)展起是近幾年發(fā)展起來的方法，此法能快速分離和測定視黃醇和它的同來的方法，

22、此法能快速分離和測定視黃醇和它的同分異構(gòu)體、酯及其衍生物。這里介紹的是同時測定分異構(gòu)體、酯及其衍生物。這里介紹的是同時測定維生素維生素A A和維生素和維生素E E的方法。的方法。 試劑：具體見教材試劑：具體見教材重蒸水：蒸餾水中加少量高錳酸鉀，臨用前再蒸餾一重蒸水：蒸餾水中加少量高錳酸鉀，臨用前再蒸餾一次。次。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定v 高效液相色譜儀的組成與工作主要流程如下圖所示：三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定v（1）測定原理;v 樣品中的VA和VE經(jīng)皂化提取處理后，將其從可皂化部分提取至有機溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將VA和VE分離，經(jīng)紫外檢測器

23、檢測，并用內(nèi)標(biāo)法定量測定。v（2）操作步驟：v 樣品處理 、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備、設(shè)定好高效液相設(shè)定好高效液相色譜條件色譜條件、樣品分析和結(jié)果計算 色譜條件（參考條件）：色譜條件（參考條件）：v色譜柱：C18柱；v流動相：甲醇+水（98+2）；v流速：1.7ml/min；v紫外檢測波長：300nm；v進樣量：20微升。v樣品進樣前需要用樣品進樣前需要用0.45微米的濾膜過濾，裝入進樣微米的濾膜過濾，裝入進樣瓶中。瓶中。2、三氯化銻比色法三氯化銻比色法（GB/T 5009.822003中第二法）中第二法）（1）原理維生素A+三氯化銻三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定氯仿溶液中蘭色可溶性配合物

24、620nm波長比色三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定（2）適用范圍及特點適用范圍及特點本法適用于維生素A含量較高的各種樣品（含量高于510g/g）。該法的主要缺點是生成的藍色配合物的穩(wěn)定性差，比色測定必須在6S內(nèi)完成，否則藍色會迅速消退，將造成極大誤差。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定（3）試劑無水硫酸鈉、乙酸酐無水乙醚（不含過氧化物）無水乙醇（不含醛類物質(zhì)）三氯甲烷（不含分解物和水）250g/L三氯化銻三氯甲烷溶液1+1氫氧化鈉溶液、0.5mol/L氫氧化鉀三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定（4）測定步驟樣品預(yù)處理樣品測定樣品預(yù)處理含有維生素A的樣品大多需首先

25、除去脂肪，把維生素A從脂肪中分離出來。常規(guī)的去脂方法是采用皂化法和研磨法。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定A、皂化法:適用于維生素A含量不高的樣品，但全部試驗過程費時，且易導(dǎo)致維生素A的損失。皂化:稱取0.55g經(jīng)組織搗碎機搗碎或充分混勻的樣品于三角瓶中，加入l0ml 1：1氫氧化鉀及2040ml乙醇，在電熱板上回流30min。加入10m1水，稍稍振搖,若無渾濁現(xiàn)象，表示皂化完全。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定提取 將皂化液移入分液漏斗，先用30ml水分兩次沖洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗。再用 50ml乙醚分兩次沖洗皂化瓶，所有洗液并入分液漏斗，振搖2min，提取不皂化

26、部分。靜止分層后，水層放入第二分液漏斗。皂化瓶再用 30ml乙醚分兩次沖洗，洗液傾入第二分液漏斗，振搖后靜止分層，將水層放入第三分液漏斗，醚層并入第一分液漏斗。如此重復(fù)操作，直至醚層不再使三氯化銻一三氯甲烷溶液呈藍色為止。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定洗滌 在第一分液漏斗中加30ml水，輕輕振搖，靜止片刻后，放出水層。再加入1520ml 0.5mol/L的氫氧化鉀溶液，輕輕振搖后，棄去下層堿液（除去醚溶性酸皂），繼續(xù)用水洗滌，至水洗液不再使酚酞變紅為止。醚液靜置10 20rnin后，小心放掉析出的水。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定濃縮 將醚層液經(jīng)過無水硫酸鈉濾入三角瓶中，再用約25ml乙醚沖洗分液漏斗和硫酸鈉兩次，洗液并入三角瓶內(nèi)。用水浴蒸餾，回收乙醚。待瓶中剩約5ml乙醚時取下。減壓抽干，立即準(zhǔn)確加入一定量三氯甲烷（約5ml左右），使溶液中維生素A含量在適宜濃度范圍內(nèi)(35g）。三、脂溶性維生素的測定三、脂溶性維生素的測定B、研磨法 適用于每克樣品維生素A的含量大于510g樣品的測定，如豬肝的分析。步驟簡單、省時，結(jié)果準(zhǔn)確。研磨 精確稱取2