甘油分析方法

1、甘油分析方法甘油的化學(xué)分析方法過碘酸鈉法（ GB/T 13216.6 91）原理： 在強(qiáng)酸性介質(zhì)中， 過碘酸鈉將三個相連羥基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值計(jì)指示終點(diǎn)。從NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量計(jì) 算甘油的含量。CHOHCHOHCHOH+2NaI8 2HCHO+HCOOH+2NaIO+HO23242 試劑蒸餾水：不含二氧化碳。乙二醇稀釋溶液： 1 體積不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示劑中和后，再用1體積水稀釋。硫酸溶液：約0.1mol/L。甲酸鈉溶液：約0.1mol/L。過碘酸鈉酸性溶液的制備：稱取60g精確至0.1g）過碘酸鈉，溶于已加入120mL 硫酸溶液的約5

2、00mL的水中，邊加入邊冷卻，轉(zhuǎn)移到1000mL容量瓶中，用水稀 釋到刻度并搖勻。必要時(shí)用玻璃過濾器過濾。溶液的酸度校核：空白試驗(yàn)所用 NaOH溶液的體積應(yīng)不少于4.5mL,這與基本 反應(yīng)產(chǎn)生的酸度相當(dāng)。NaOH溶液：約 0.05mol/L。NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液：約 0.125 mol/L。酚猷指示劑：溶解0.5g酚獻(xiàn)于95% （體積比）乙醇中，稀釋至100mLo儀器滴定管： 50mL。pH 值計(jì)： pH 值計(jì)應(yīng)用兩種緩沖溶液校準(zhǔn)。a： 鄰苯二甲酸氫鉀溶液：0.05mol/L （10.12g/L）, 20c 時(shí) pH 值為 4.00;b: 10 水四硼酸二鈉（NaBO10HO）溶液：0.01mol

3、/L （3.81g/L）, 20 c 時(shí) 2274PH 值為 9.22。測定步驟（1）試驗(yàn)份：稱取含甘油不大于0.5g的樣品（精確至0.0002g）。如果不知甘油的大致含量，應(yīng)稱取0.5g樣品進(jìn)行預(yù)測（如果甘油含量大于 75%,最好稱取 0.5g+0.1g樣品，精確至0.0002g）,置于500mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖 勻后取50mL此溶液用于測定。（ 2） 試驗(yàn)溶液的制備： 對堿性樣品或樣品酸化時(shí)出現(xiàn)焦油沉淀， 可將試驗(yàn)份放入配有回流冷凝器的燒并中，需要時(shí)稀釋到50mL,加2滴酚猷指示劑，用硫酸溶液中和到剛好褪色。再加入 5mL硫酸溶液，煮沸5min ,冷卻，必要時(shí)過濾， 并用水洗滌

4、過濾器。濾液轉(zhuǎn)入 600mL燒杯中。無上述情況時(shí)則可將樣品直接放 入燒杯進(jìn)行測定。（3）滴定：用水稀釋試樣至體積約 250mL,在不斷攪才下，加入 NaOH溶液， 調(diào)節(jié)pH值至7.9 ±0.1。加入50mL過碘酸鈉溶液，混合攪勻，蓋上表面皿，在 溫度不超過35c的暗處放置30min。然后加入10mL乙二醇稀釋1 / 5 溶液，混合，在相同條件下放置 20min。力口 5.0mL甲酸鈉溶液，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶 液滴定至 pH 值 7.9± 0.2。 .（4）空白試驗(yàn)：在相同條件下，用相同量的試劑和稀釋水，用50mL水代替樣品，做空白試驗(yàn)。但加入過碘酸鈉溶液之前，空白溶液應(yīng)調(diào)節(jié)p

5、H 值至6.5，加入過碘酸鈉溶液之后，滴定終點(diǎn)至pH 值也是6.5。（ 5） 計(jì)算：甘油含量（質(zhì)量，） = （V1-V2） XcX 0.0921 X 100+m=9.21c（VlV2）/m 式中V1測定樣品耗用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL;V2一空白實(shí)驗(yàn)耗用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL;m一試驗(yàn)份的質(zhì)量，g;c-NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L ;0.0921甘油的毫摩爾質(zhì)量，g/mmol 。兩個平行實(shí)驗(yàn)的允許誤差為0.2。JIS食品甘油標(biāo)準(zhǔn)、FCCI標(biāo)準(zhǔn)、美國藥典甘油標(biāo)準(zhǔn)等敘述的方法（與 GB/T 13216.6 91 相當(dāng)）操作如下：正確取出約0.5g的甘油，加水成500mL,正確抽取5

6、0mL,加水約200mL。加入 NaOH或H2SO4溶液調(diào)節(jié)pH值至7.9±0.1。然后力口入50mL6%勺過碘酸鈉，輕輕 搖動，放置30min后，加入10mL50%勺乙二醇，搖動，再放置暗處20min。加入 5mL濃度為1mol/L的甲酸鈉水溶液，用0.1mol/L的NaOH溶液（ISO用0.125mol/L 的NaOH溶液）滴定到pH值為7.9± 0.1表示終點(diǎn)，同時(shí)做空白試驗(yàn)。并且試驗(yàn) 時(shí)用新煮沸的蒸餾水。每毫升0.1mol/L的NaOH溶液相當(dāng)于9.209mg的甘油。重鉻酸鉀法 高純度甘油可以采用重鉻酸鉀法。原理： 甘油在酸性溶液中能被重鉻酸鉀氧化成二氧化碳和水，

7、過量的重鉻酸鉀將 碘化鉀氧化成碘，用硫代硫酸鈉滴定析出的碘，從而計(jì)算甘油含量。3CHO+7KCO+28Hss 7KSO+9CO+7Cr（SO）40HO222437232843422 KCrO+6KI+7HSO- Cr（SO+4KSO+3I+7O2222242424732-2-O+3SO3I+6A 6卜2243有以上三式可知，1mol硫代硫酸鈉相當(dāng)于 92.0944+ 2 + 7=6.578g甘油。試劑硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液： 0.1mol/L。碘化鉀：20%溶液。淀粉指示劑：0.5%溶液。重鉻酸鉀溶液： 89g/L。測定：稱取樣品1g左右（精確至0.0002g）,移入250mL容量瓶中，用水稀釋至

8、 刻度，搖勻。取出10mL于錐形瓶中，加入25mL重銘酸鉀溶液及30mL硫酸（1:1, 體積比），瓶口放置一玻璃漏斗，于水浴上加熱2h,冷卻后移入250mL容量瓶中， 用水稀釋到刻度，搖勻。取 25mL于500mL具塞錐形瓶中，加入15mL20%勺碘 化鉀溶液，蓋上瓶塞，于暗處放置10min,加水300mL,然后用0.1mol/L的硫代 硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定， 近終點(diǎn)時(shí)加入淀粉指示劑數(shù)滴， 繼續(xù)滴定至溶液由藍(lán)色變 成亮綠色。同時(shí)作空白試驗(yàn)。計(jì)算：甘油含量按下式計(jì)算。甘油 = （V2-V1） XcX 0.006578/ （m X 10/250 X 25/250） X 1002 / 5式中V1一滴定

9、樣品時(shí)耗用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL;V2一滴定空白時(shí)耗用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL;L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L ;m一試驗(yàn)份的質(zhì)量，g;0.006578 Immol硫代硫酸鈉相當(dāng)于甘油的質(zhì)量，g。比色法在堿性條件下，把甘油生成銅絡(luò)合物，進(jìn)行比色測定。在10mL甘油中，加入10mL21%NaOH溶液，再加入6mL6%勺氯化亞銅溶液，充分混合后并離心分離，取上層溶液在 635nm處進(jìn)行比色測定。另外，也有把甘油用重銘酸鉀氧化分解進(jìn)行定量的方法。在甘油（0.25g以下）中，加入25mL0.0092%勺重銘酸鉀溶液和 30mL濃硫酸， 在水浴中煮沸20min,使甘油分解，在587

10、nm處測定重銘酸鉀的消耗量。作為 重銘酸鉀方法的變更方法，再加入二苯胺月尿，在 540nm處進(jìn)行測定。止匕外，對低含量的甘油如皂基中的甘油含量的測定，可采用如下操作的分光光度法進(jìn)行。原理：將定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醴 萃取后，殘留于水中的甘油用過碘酸氧化成甲酸和甲醛，將甲醛用 1, 8-二羥基 -3,6-二蔡磺酸顯色，用分光光度計(jì)測定紫紅色溶液的吸光度，求出甘油的含量。本法適于測定甘油含量低于0.5%的試樣。操作：將定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醴 萃取后，殘留水溶液（250mL）作為試樣。（1） 取樣量參考： 樣品中估計(jì)的甘油含量

11、樣品的取樣量/g試樣溶液取樣量/mL/%0.25-0.50 1 10.12-0.24 2 10.06-0.1122320.0 以取試樣溶液數(shù)毫升，加入過碘酸鈉溶1m,放15mi（3）加入1mL氯化亞錫溶液和10mL1, 8-二羥基-3,6-二蔡磺酸，混合。在水浴 上加熱30min,冷卻后用稀硫酸稀釋到100mLo（4）用10nm比色池在571nm處（本溶液最大吸收波長在 571nm附近）測定 吸光度，同時(shí)用水進(jìn)行空白測定。由試樣的吸光度與空白試驗(yàn)的吸光度之差， 從 預(yù)先制作的甘油吸光度曲線求出甘油的含量（）。C=mx 100 X 250/ VX m X 1000 x 1000=0.025m/

12、Vm11式中C一甘油含量,%m 一由標(biāo)準(zhǔn)曲線求出的甘油含量，心 g； 1V取試樣溶液的量，mL;m一樣品量，go3 / 5色譜法測定甘油氣相色譜法氣相色譜法測定甘油的色譜柱有許多種，通常柱溫控制在180左右，以Celite（ 硅藻土、鎂氟石 ）作為擔(dān)體，聚乙二醇-6000 作固定液，可以圓滿地分析甘油產(chǎn)品。J.Synder用Tenax-GCtt,柱溫從150c升至240c對甘油進(jìn)行分析，并和過 碘酸法進(jìn)行了比較。N.Chambers 對潤濕劑中的甘油、甘露醇、山梨糖醇等乙?；镉?1.5%的QFI-HMDS80-10（E色譜柱，在柱溫200c的條件下進(jìn)行分析。乙?；僮魅缦拢?在60-100m

13、g樣品中，加入叱噬、無水乙酸（50:50,體積比）10mL在水浴中進(jìn) 行反應(yīng)。也有用 80-100 目的活性炭，0.8%的 THEED-CarbopackC 色譜柱， 在柱溫125下進(jìn)行分析的報(bào)告。另外，三甲基硅烷化的甘油、聚合甘油用 Silicone OV-17 1.3% 為固定液，擔(dān)體 100-200 目的色譜柱，從90升溫至350，升溫速率在5 /min 下進(jìn)行。三甲基硅烷化操作如下：在 0.18-0.22g 甘油中，加入1mL叱噬和0.4mL六甲 基二氯硅烷、0.4mL三甲基氯硅烷，在80c下反應(yīng)5min,靜止后取上層消液進(jìn) 行分析。高壓液相色譜法用屋太芝公司分析糖類專用的反向柱，以乙

14、腈：水=92.5:7.5 （體積比）作為洗脫劑，以視差折光儀為檢測器，可以對甘油進(jìn)行分析。另外，也可以用水系的凝膠滲透色譜對甘油進(jìn)行分析。分析條件如下。色譜柱：Asahipak GS-220H（7.6mmIDX250mL）。柱溫：40。流量：0.5mL/min 。檢測器：視差折光儀。樣品：0.5%t油 20nL。洗脫劑：水。相關(guān)文獻(xiàn)1 .HPLC僉測生物柴油生產(chǎn)過程中副產(chǎn)物甘油含量的研究張宏武，王璐，產(chǎn)竹華，夏永軍 ,陳蘊(yùn) ,許贛榮（江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇無錫214122）主要儀器Angilent 1100系列高效液相色譜儀，KDC16H高速臺式離心機(jī)。最佳色譜條件：色譜柱

15、:ZORBAX NH（250mrm（ 4. 6 mm,5i m）;檢測器:示差檢測器;2 柱溫30c ;流動相:70%乙月青;流速1mL/min。甘油最低檢測限為2mg/L,回收率為94.34%99.43%相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為,1.03%。與傳統(tǒng)化學(xué)方法相比,高效液相色譜法快速簡便 ,結(jié)果準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好。2 .分光光度法測定甘油合劑中甘油的含量徐秀麗 ,成立軍,劉倫（泰山醫(yī)學(xué)院第一教學(xué)醫(yī)院,山東泰安271000）根據(jù)甘油與氫氧化銅懸濁液作用生成絳藍(lán)色的甘油銅溶液,采用分光光度法在630 nm 波長處測定吸光度,建立回歸方程,以確定甘油的含量。3 .氣相色譜法測定工業(yè)甘油含量申書昌 王文波 齊齊哈爾輕工學(xué)院4 / 5本文使用Chromosorb 101 固定相作為柱填料,采用氣相色譜法測定水溶液中甘油。操作過程簡便,測定結(jié)果準(zhǔn)確。色譜柱：3X2000 （mm）不銹鋼柱，內(nèi)填Chromosorb101（6080目）固定相;柱 溫:235C；載氣：氫氣，60mL/min；檢測器：TCQ汽化溫度：270C。4.生物柴油一甘油聯(lián)產(chǎn)工藝及甘油含量測定方法的研究杜曉剛 南京理工大學(xué)美國HP 6890氣相色譜儀譜儀帶FID TCD雙檢器，分流不分流進(jìn)樣口HP