發(fā)酵工藝流程

1、發(fā)酵工藝標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP)創(chuàng)作：歐陽(yáng)學(xué)時(shí)間：2021.03. 03_生嚴(yán)前準(zhǔn)*每次生產(chǎn)前按品種配方將所需原料稱(chēng)童準(zhǔn)備齊全，并確認(rèn) 生產(chǎn)原料庫(kù)存量,保證原 料庫(kù)存量 足夠下次生產(chǎn)所需.二生產(chǎn)前檢査1檢查蒸汽、壓縮空氣、冷卻水進(jìn)出的管路是否暢通，所 有閥門(mén)是否良好并關(guān)閉所有閥門(mén).2檢查電路、控制柜、開(kāi)關(guān)的狀態(tài)，確?？刂乒襁\(yùn)行正常.3 檢查空壓機(jī)油表油表及軸承、三甬帶、氣缸等是否正 常，確?？諌簷C(jī)運(yùn)行正常.4檢查發(fā)酵罐攪拌減速機(jī)的油量及密封軸降溫水是否正 常.三總過(guò)法器滅菌當(dāng)蒸汽總管路上的壓力為0.2-0.25MPa時(shí),打開(kāi)總過(guò)濾器 進(jìn)代閥輸入蒸汽，同時(shí)打開(kāi)出耗閥的跑分閥、排氣閥、曲E污 閥，當(dāng)

2、三個(gè)閥均須E出蒸汽時(shí),調(diào)整進(jìn)氣閥、排污閥，穩(wěn)定總過(guò) 濾器壓力0.15-0.2MPa,此時(shí)打開(kāi)壓力表下跑分，計(jì)時(shí)滅菌2- 2.5小時(shí).滅菌結(jié)束后啟動(dòng)空壓機(jī)，當(dāng)空氣輸入管道壓力大于 總過(guò)濾器壓力時(shí)，關(guān)閉蒸汽閥，打開(kāi)空氣閥，將空氣出入總過(guò) 濾器，然后調(diào)整進(jìn)氣閥與排污閥，穩(wěn)定總過(guò)濾器壓力在 0.15- 0.2MPa,保持通氣在15-20小時(shí)，當(dāng)出氣閥跑分和排污閥放 出的空代為干燥空氣時(shí)，完成滅菌.四分過(guò)浹器滅菌1當(dāng)蒸汽管路壓力為 0.2-0.25MPa時(shí)，打開(kāi)蒸汽過(guò)濾器的 進(jìn)氣閥和須E污閥，當(dāng)蒸汽管路中無(wú)蒸汽凝結(jié)液后，再將蒸汽 輸入空代管路，然后打開(kāi)分過(guò)濾器的進(jìn)氣閥、排污閥及出氣 閥上的跑分，當(dāng)所有閥

3、門(mén)均有蒸汽曲E出后，調(diào)整進(jìn)玄與曲E污 閥,是壓力穩(wěn)定在0.1 l-0.15MPa,計(jì)時(shí)滅菌30-35分鐘.滅菌 結(jié)束后，關(guān)閉蒸汽過(guò)濾器進(jìn)出氣閥、污閥，并立即將空氣 輸入預(yù)過(guò)濾器，使空氣通過(guò)預(yù)過(guò)濾器進(jìn)入到分過(guò)濾器，再調(diào) 整分過(guò)濾器排污閥使壓力穩(wěn)定在0.110.15MPa,備用.五發(fā)酵維空消（可與分過(guò)流壽滅菌同時(shí)進(jìn)行）空消前先將發(fā)酵罐去垢洗凈，添加少量清水，然后密封進(jìn) 料口，將排氣閥打開(kāi)少許，同 事將蒸汽引 入盤(pán)管（或夾奈）進(jìn)行 預(yù)熱，待罐溫升到80©時(shí)（種子罐401：即可），關(guān)閉盤(pán)管（或夾 套）進(jìn)氣閥，再?gòu)某隽峡?、進(jìn)氣口、取樣口 三路輸入蒸汽，（蒸 汽管路壓力不低于 0.2-0.25M

4、Pa）,當(dāng)罐內(nèi)溫度達(dá)到 125- 130*0時(shí)，通過(guò)三路蒸氣浴出氣閥調(diào)整罐內(nèi)壓力，使其穩(wěn)定在 0.11-0.15MPa,計(jì)時(shí)滅菌 30-35 分鐘.空消結(jié)束后，關(guān)閉所有進(jìn)氣閥并將排氣閥開(kāi)大，當(dāng)罐內(nèi)壓 力下降至 OMPa后,打開(kāi)進(jìn)料口和排污閥，再將發(fā)酵罐進(jìn)行 一次沖洗.六發(fā)醉餛實(shí)消打開(kāi)進(jìn)水閥，按照生產(chǎn)要求放入所需水量，再根據(jù)生產(chǎn)品 種按配方依次投入培養(yǎng)基原料，并同時(shí)打開(kāi)攪拌，攪拌 5-10 分鐘后取樣，用氫氧化鈉和濃鹽酸調(diào) PH 值 7.2-7.5之間，然 后密封進(jìn)料口將排氣閥打開(kāi)少許,同時(shí)打開(kāi)盤(pán)管（或夾奈）的 進(jìn)出氣閥門(mén)輸入蒸汽進(jìn)行預(yù)熱，等到罐內(nèi)溫度到達(dá)80©以 上后，關(guān)閉盤(pán)管（或夾

5、奈）進(jìn)代閥門(mén)，并將排代閥關(guān)小,然后將 蒸汽從進(jìn)氣口、出料口、取樣 口三路直接通入罐內(nèi)，當(dāng)罐內(nèi) 溫度上升到121125*0后，打開(kāi)發(fā)酵罐體上與空氣進(jìn)代閥上 的所有跑分，再通過(guò) 調(diào)整三路進(jìn)氣與排氣閥將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定 在0.1 l0.15MPa,此時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)滅菌30-35分鐘，滅菌期間將 攪拌停止.滅菌結(jié)束后，關(guān)閉所有進(jìn)蒸汽閥門(mén)，將排氣閥開(kāi)大, 同時(shí)開(kāi)啟攪拌，并立即打開(kāi)進(jìn)氣閥，輸入無(wú)菌空氣，保證罐壓 不低于0.05-0.06MPa（當(dāng)發(fā)酵罐通入無(wú)菌空玄后，一定注怠 分過(guò)濾器與空氣總管路壓力一定要大于發(fā)酵罐內(nèi)壓力），打 開(kāi)盤(pán)管（或夾套）冷必P水進(jìn)出閥門(mén)（確定蒸汽出閥門(mén)關(guān)閉），開(kāi) 始降溫，按照不同菌種接種

6、溫度要求控制降溫纟吉束時(shí)間（一 般在34C左右），降溫結(jié)束后即可接種.七接種1種子罐接種先將進(jìn)氣閥逐漸關(guān)閉，同時(shí)將排氣閥開(kāi)大，當(dāng)罐體壓力表 與空玄流量計(jì)降到 0刻度時(shí)，關(guān)閉排氣閥，用酒精棉 圍在接 種 口四周并點(diǎn)燃，然后打開(kāi)接種口，將制備好的菌種胞子懸 ，孚液在火焰中直接從接種口倒入缶霍內(nèi)，馬上關(guān)閉接種口，同 時(shí)迅速打開(kāi)進(jìn)氣閥使罐內(nèi)壓力上升到 0.05MPa以上，打開(kāi) 排氣閥，調(diào)整進(jìn)代與排氣閥使罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0.05-0.06MPa2培養(yǎng)罐接種接種前應(yīng)先將蒸汽輸入接種管道，再把接種管道兩端的跑 分打開(kāi)，當(dāng)跑分都有蒸汽排出時(shí)，計(jì)時(shí)滅菌 1530 分鐘，滅菌 結(jié)束后關(guān)閉跑分和進(jìn)蒸汽閥，將種子罐排耗

7、閥 關(guān)小,當(dāng)種子 罐內(nèi)壓力大于培養(yǎng)罐壓力后，先將接種管道進(jìn) 口閥門(mén)打開(kāi), 再打開(kāi)培養(yǎng)罐端出口閥開(kāi)始接種，接種量按不同菌種生產(chǎn)需 求控制.接種完畢后，先將培養(yǎng)罐端出口閥關(guān)閉，再將接種管 道進(jìn)口閥關(guān)閉，完成接種，最后把種子罐所有進(jìn)出氣閥門(mén)關(guān) 閉，停止攪拌.八發(fā)酵維培養(yǎng)控制接種后調(diào)整進(jìn)氣閥與排氣閥，將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0.05- 0.06MPa,同時(shí)按照不同菌種的需求調(diào)整好罐內(nèi)的溫度和通 氣量當(dāng) 罐內(nèi)溫度超出或者低于標(biāo)準(zhǔn)溫度時(shí)，打開(kāi)盤(pán)管或夾套進(jìn) 出閥門(mén)，出入冷卻水或者蒸汽，等溫度達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)溫度后關(guān)閉 進(jìn)出閥門(mén)，停止冷卻水或者蒸汽的輸入，這就完成了 一次溫 度的控制調(diào)建.通氣量的控制，按照不同菌種的要求，在確保管內(nèi)壓力穩(wěn) 定的前提下，根據(jù)空氣流量計(jì)的顯示，通過(guò)進(jìn)氣閥和排氣閥 的調(diào)整進(jìn)行通氣量的調(diào)整.冬季結(jié)冰期到來(lái)以后，每次生產(chǎn)停止后，應(yīng)把蒸汽和空氣 管路及發(fā)酵罐盤(pán)管或者夾套的冷凝水和冷卻水排盡，排不盡 的可用空氣把水吹出來(lái)，以防止凍裂管路和設(shè)備，給生產(chǎn)造 成不便.九取樣與放罐取樣檢測(cè)時(shí)間，按照生產(chǎn)菌種的種類(lèi)來(lái)制定12-16小時(shí)不 等，開(kāi)始取樣檢測(cè)后,前期每2小時(shí)一次，后期取樣時(shí)間縮短 為 0.51小時(shí)，每次取樣前后都要對(duì)取樣 口進(jìn)行105分鐘 滅菌處理,.當(dāng)取樣檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)符合芽孑包大量形成，芽孑包含量 70%,雜菌量3%,含菌量30*108CFU/ml的放罐指標(biāo)時(shí), 即可放罐.十發(fā)醉生產(chǎn)