Ezrin和Moesin在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義

1、Ezrin和Moesin在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義 作者：李瑩杰，陶曉峰，賀巖，付紅【摘要】 目的 探討Ezrin、Moesin在胃癌組織中的表達(dá)情況及其與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。 方法 采用免疫組化法檢測(cè)50例胃癌組織、25例胃黏膜不典型增生和25例正常胃黏膜中Ezrin、Moesin的表達(dá)。 結(jié)果 Ezrin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌中的陽性表達(dá)率分別為28.0%、36.0%和86.0%。Moesin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌中的陽性表達(dá)率分別為12.0%、24.0%和78.0%。Ezrin的表達(dá)程度與胃癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.01)，與胃癌的分化程度無

2、關(guān)(P>0.05)。Moesin的表達(dá)程度與胃癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度有關(guān)(P<0.01)。Ezrin和Moesin的表達(dá)之間呈正相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論 Ezrin、Moesin在胃癌中的高表達(dá)與胃癌的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，兩者的聯(lián)合檢測(cè)可能成為預(yù)測(cè)胃癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的重要指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】 胃腫瘤 Expression of Ezrin, Moesin in the Gastric Carcinoma and Its Clinical Significance Abstract: Purpose To explore the expre

3、ssion of Ezrin and Moesin and its correlation to clinico-pathological pro gastric carcinoma. Methods The expression of Ezrin and Moesin in 50 specimens of gastric carcinoma, 25 specimens of gastric epithelial dysplasia and 25 specimens of normal gastric tissues were detected by immunohistochemistry.

4、 Results The positive expression rates of Ezrin in normal gastric tissues, gastric epithelial dysplasia and gastric carcinoma were 28.0%, 36.0% and 86.0% and those were 12.0%, 24.0% and 78.0% respetively. The expression of Ezrin was correlated to clinical stage, lymph node metastasis(P<0.01),

5、 but not to differentiation(P>0.05), the expression of Moesin was correlated to clinical stage, lymph node metastasis and differentiation(P<0.01). The expression of Ezrin was positively correlated to that of Moesin in gastric carcinoma(P<0.01). Conclusions High expression of Ezr

6、in and Moesin is correlated with the clinical stage and lymph node metastasis in gastric carcinoma, combined both detection might be important marker for forecasting metastasis and prognosis in gastric carcinoma examining Ezrin and Moesin. Key words: gastric neoplasms; Ezrin; Moesin; immunochemistry

7、 近年來的研究發(fā)現(xiàn)，作為ERM家族成員的Ezrin（埃茲蛋白）、Moesin（膜突蛋白）可以通過對(duì)腫瘤細(xì)胞黏附分子的調(diào)節(jié)對(duì)惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移發(fā)揮重要作用。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)這方面的研究報(bào)道很少。本研究旨在探討胃癌中Ezrin、Moesin的表達(dá)情況及其與胃癌進(jìn)展、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，為胃癌的診斷、預(yù)后判斷和臨床治療提供新依據(jù)。 1 材料與方法 1.1 標(biāo)本來源 病例資料取自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院2003年1月2005年12月間手術(shù)的胃癌患者，其中男性38例，女性12例，年齡3176歲，平均年齡52.44±1.40歲。50例病例均為腺癌，按組織學(xué)類型和分化程度分為兩組：乳頭狀腺癌和高中分化管

8、狀腺癌為分化較好組，21例；低分化腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌和未分化癌為分化較差組，29例。按TNM分期：期 4例；期 11例；期 23例；期 12例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（N1）30例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（N0）20例。另取胃鏡檢出的正常胃黏膜組織25例及胃黏膜不典型增生25例。 1.2 試劑與方法 濃縮型鼠抗人Ezrin、Moesin單克隆抗體購自NewoMarkers公司。羊抗鼠二抗購自北京中杉試劑公司。采用免疫組化SP法，即鏈霉素抗生物素蛋白過氧化物酶法。實(shí)驗(yàn)步驟按說明書進(jìn)行。用已知的陽性片作陽性對(duì)照；用PBS液代替一抗作陰性對(duì)照。 1.3 結(jié)果判斷 Ezrin、Moesin均在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)，呈棕

9、黃色顆粒。按染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)，參考Mathew等1分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：無表達(dá)為“-”；50細(xì)胞陽性表達(dá)或染色較淺為“+”；50陽性表達(dá)或深染為“+”。 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS10.0 統(tǒng)計(jì)軟件。Ezrin、Moesin在不同胃組織中表達(dá)的差異及與臨床病理因素的關(guān)系采用2檢驗(yàn)。Ezrin、Moesin表達(dá)的相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法，P<0.05 為差異有顯著性，P<0.01為差異有極其顯著性。 2 結(jié) 果 2.1 Ezrin、Moesin在胃組織中的表達(dá) Ezrin在胞質(zhì)呈棕色顆粒分布，腫瘤組織表達(dá)從局部或灶性至彌漫性均有，以彌漫性為主，正

10、常胃黏膜及不典型增生組織陽性表達(dá)以彌漫性為主。Ezrin在25例正常胃黏膜、25例不典型增生和50例胃癌組織的表達(dá)陽性率分別為28.0%(7/25)，36.0%(11/25)，86.0%(43/50)。見表1。 Moesin在胞質(zhì)呈棕色顆粒分布，腫瘤組織表達(dá)從局部或灶性至彌漫性均有，以彌漫性為主，正常胃黏膜及不典型增生組織陽性表達(dá)以彌漫性為主。Moesin在25例正常胃黏膜、25例不典型增生和50例胃癌組織的表達(dá)陽性率分別為12.0%(3/25)，24.0%(6/25)，78.0%(39/50)。見表1。 Ezrin、Moesin的表達(dá)在正常胃黏膜和胃癌之間以及不典型增生和胃癌之間有顯著性差異

11、（P<0.01），而正常胃黏膜和不典型增生組織之間Ezrin和Moesin的表達(dá)差異無顯著性(P>0.05)。 2.2 胃癌中Ezrin、Moesin表達(dá)與臨床病理因素關(guān)系 見表2。Ezrin的表達(dá)程度與胃癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.01)，與胃癌的分化程度無關(guān)(P>0.05)。Moesin的表達(dá)程度與胃癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度有關(guān)(P<0.01)。 2.3 Ezrin、Moesin在胃癌中表達(dá)的相關(guān)性分析 Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示Ezrin、Moesin在胃癌中的表達(dá)呈顯著性正相關(guān)（r=0.70

12、1，P=0.0009)。見表3。 3 討 論 Ezrin是1981年由Betscher在雞的小腸上皮細(xì)胞刷狀緣中首次被純化的。ERM家族在結(jié)構(gòu)上的同源性主要體現(xiàn)在它們都在N-末端有一個(gè)同源性很高的FERM功能域，以及C-末端的不同氨基酸位置上有一個(gè)關(guān)鍵的與其激活有關(guān)的蘇氨酸磷酸化位點(diǎn)2，F(xiàn)ERM功能域在介導(dǎo)細(xì)胞表面黏附分子（如CD44、E-cadherin、ICAM-2）與細(xì)胞骨架通過EMR家族蛋白連接的生理功能中起著關(guān)鍵作用；而暴露的C-末端尾部具有肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架結(jié)合位點(diǎn)，故通過Ezrin的橋接作用，可將肌動(dòng)蛋白細(xì)胞微絲與細(xì)胞膜相連，從而產(chǎn)生一系列細(xì)胞功能，如細(xì)胞形態(tài)改變、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)粘附、有

13、絲分裂和細(xì)胞極性等。因此，越來越多的研究證實(shí)，Ezrin與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)。我們的研究發(fā)現(xiàn)，Ezrin在胃癌中的表達(dá)顯著高于正常和不典型增生的胃黏膜組織，并且其表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，即隨著胃癌惡性程度和臨床分期的增高，Ezrin的表達(dá)隨之增加，這一結(jié)論與大部分文獻(xiàn)的報(bào)道基本一致。Yu等3報(bào)道Ezrin的表達(dá)在兒童橫紋肌肉瘤和骨肉瘤的轉(zhuǎn)移過程中起重要作用，提示Ezrin蛋白是兒童腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素4，并且Ezrin的表達(dá)與腫瘤的預(yù)后有關(guān)。但在成人腫瘤中卻存在兩種不同的結(jié)論，卵巢漿液性囊腺癌中Ezrin的低表達(dá)提示預(yù)后差5，但胰腺癌中Ezrin的高表達(dá)者預(yù)后

14、不好6。這一結(jié)果說明，Ezrin蛋白在成人腫瘤轉(zhuǎn)移過程中存在著更復(fù)雜的作用機(jī)制， Ezrin蛋白的過度表達(dá)可能參與了腫瘤轉(zhuǎn)移的多個(gè)環(huán)節(jié)。Ezrin蛋白可以直接與細(xì)胞基質(zhì)透明質(zhì)酸受體CD44分子的胞漿部分發(fā)生作用，而CD44分子過表達(dá)可引起膜細(xì)胞骨架連接蛋白Ezrin的功能激活，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)7，8。另外，Ezrin蛋白還可以通過協(xié)同和放大細(xì)胞表面的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)，改變細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)平衡，參與腫瘤的轉(zhuǎn)移機(jī)制。 ERM家族的另一成員Moesin常與Ezrin共同表達(dá)于細(xì)胞膜內(nèi)面，對(duì)維持細(xì)胞形態(tài)和運(yùn)動(dòng)起重要作用，并參與多種疾病的發(fā)病過程。Carmeci等9對(duì)雌激素受體陰性和陽性的乳腺

15、癌細(xì)胞Moesin的表達(dá)情況研究推測(cè)Moesin可能參加了雌激素受體陰性腫瘤的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。我們的研究發(fā)現(xiàn)，Moesin在胃癌的表達(dá)與腫瘤的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度有關(guān)，Moesin與 Ezrin的表達(dá)有很好的相關(guān)性，但Moesin蛋白具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。 Ezrin在原發(fā)腫瘤的高表達(dá)可以導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移，因此，Ezrin及其相關(guān)分子可能成為未來治療腫瘤轉(zhuǎn)移的一個(gè)新靶點(diǎn)，但是對(duì)Ezrin表達(dá)上調(diào)的啟動(dòng)機(jī)制目前還不十分清楚，對(duì)于Ezrin蛋白更加深入的研究，將促進(jìn)人們對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的認(rèn)識(shí)，并發(fā)展更有效的干預(yù)途徑，從而提高腫瘤患者的生存率。【參考文獻(xiàn)】 1 Mathew J, Hine

16、s JE, Obafunwa JO, et al. CD44 is expressed in heaptocellular carcinomas showing vascular invasionJ. J Pathol, 1996, 179(10):74-79. 2 Louvet-Vallee S. ERM proteins: from cellular architecture to cell signalingJ. Biol Cell, 2002, 92(5):305-316.3 Yu Y, Khan J, Khanna C, et al. Expression profiling ide

17、ntifies the cytoskeletal organizer Ezrin and the developmental homeoprotein Six-1 as key metastatic regulatorsJ. Nat Med, 2004, 10(2):175-181.4 Khanna C,Wan X, Bose S, et al. The membrane-cytoskeleton linker Ezrin is necessary for osteosarcoma metastasis J. Nat Med, 2004, 10(2):182-186.5 Moilanen J,

18、 Lassus H, Leminen A, et al. Ezrin immunoreactivity in relation to survival in serious ovarian carcinoma patientsJ. Gynecol Oncol, 2003, 90(2):273-281.6 Akisawa N, Nishimori I, Iwamura T, et al. High levels of ezrin expressed by human pancreatic adenocarcinoma cell lines with high metastatic potentialJ. Biochem Biophys Res Commun, 1999, 258(2):395-400.7 Martin TA, Harrison G, Mansel RE, et al. The role of the CD44/ezrin complex in cancer metastasisJ. Crit Rev Oncol Hematol, 2003, 46(2):165-186.8 Pujuguel P, Del Maeslro L, Gautreau A, et al. Expression of CD44s