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文檔簡介
1、第一章1 何為蛋白質(zhì)的變性作用?其實質(zhì)是什么?答:在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間構(gòu)象被破壞,也即有序的空間構(gòu)象變成無序的空間結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)和生物活性的喪失。變性的實質(zhì)是破壞非共價鍵和二硫鍵,不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。2.何謂分子伴侶?它在蛋白質(zhì)分子折疊中有何作用?答:分子伴侶:是指通過提供一個保護環(huán)境從而加速蛋白質(zhì)折疊成天然構(gòu)象或形成四級結(jié)構(gòu)的一類蛋白質(zhì)。它在蛋白質(zhì)分子折疊中的作用是:(1)可逆地與未折疊肽段的疏水部分結(jié)合隨后松開,如此重復(fù)進行可防止錯誤的聚集發(fā)生,使肽鏈正確折疊;(2)可與錯誤聚集的肽段結(jié)合,使之解聚后,再誘導(dǎo)其正確折疊;(3)在蛋白質(zhì)分子折疊過程中指導(dǎo)二硫
2、鍵正確配對。3.試述蛋白質(zhì)等電點與溶液的pH和電泳行為的相互關(guān)系。答:PI>PH時,蛋白質(zhì)帶凈正電荷,電泳時,蛋白質(zhì)向陰極移動; PI<PH時,蛋白質(zhì)帶凈負電荷,電泳時,蛋白質(zhì)向陽極移動;PI=PH是,蛋白質(zhì)凈電荷為零,電泳時,蛋白質(zhì)不移動。4.試述蛋白質(zhì)變性作用的實際應(yīng)用?答:蛋白質(zhì)的變性有許多實際應(yīng)用,例如,第一方面利用變性:(1)臨床上可以進行乙醇、煮沸、高壓、紫外線照射等消毒殺菌;(2)臨床化驗室進行加熱凝固反應(yīng)檢查尿中蛋白質(zhì);(3)日常生活中將蛋白質(zhì)煮熟食用,便于消化。第二方面防止變性:當(dāng)制備保存蛋白質(zhì)制劑(如酶、疫苗、免疫血清等)過程中,則應(yīng)避免蛋白質(zhì)變性,以防止失去活
3、性。第三方面取代變性:乳品解毒(用于急救重金屬中毒)。第二章1.簡述RNA的種類及其生物學(xué)作用。答:(1)RNA有三種:mRNA、tRANA、rRNA; (2)各種RNA的生物學(xué)作用: mRNA是DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,含有DNA的遺傳信息,從5-末端起的第一個AUG開始,每三個相鄰堿基決定一個氨基酸,是蛋白質(zhì)生物合成中的模板。tRNA攜帶運輸活化的氨基酸,參與蛋白質(zhì)的生物合成。rRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合構(gòu)成核糖體,核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所。2.簡述tRNA二級結(jié)構(gòu)的基本特點。答:tRNA二級結(jié)構(gòu)為典型的三葉草形結(jié)構(gòu),其特點為:(1)氨基酸臂:3-末端為-C-C-A-OH結(jié)構(gòu);(2)二氫尿嘧啶環(huán):環(huán)中有二
4、氫尿嘧啶;(3)反密碼環(huán):環(huán)中間部分三個相鄰核苷酸組成反密碼子;(4)TC環(huán):環(huán)中含胸苷,假尿苷和胞苷;(5)附加叉:是tRNA分類標志。3.試述B-DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的要點。答:(1)DNA是一反向平行、右手螺旋的雙鏈結(jié)構(gòu):脫氧核糖基和磷酸親水性骨架位于雙鏈的外側(cè),疏水性堿基位于雙鏈的內(nèi)側(cè),螺旋一周含10.5對堿基,螺距3.54nm,直徑2.37nm。(2)DNA雙鏈之間形成了互補堿基對:兩條鏈的堿基之間以氫鍵相連。腺嘌呤與胸腺嘧啶配對,形成兩個氫鍵(A=T),鳥嘌呤與胞嘧啶配對,形成三個氫鍵(GC)。(3)疏水作用力和氫鍵共同維系DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定:DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)橫向的穩(wěn)定性靠兩條鏈間
5、互補堿基的氫鍵維系,縱向的穩(wěn)定性則靠堿基平面間的疏水性堿基堆積力維持。4.何為增色效應(yīng)?為什么DNA變形后出現(xiàn)增色效應(yīng)?答:增色效應(yīng):核酸變性后,在260nm處對紫外光的吸光度增加,此現(xiàn)象為增色效應(yīng)。原因:嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)中含有共軛雙鍵,因此對260nm波長的紫外光有最大的吸收峰,堿基平時在DNA雙螺旋的內(nèi)側(cè)。當(dāng)DNA變性后,氫鍵破壞,成為兩股單鏈DNA,在螺旋內(nèi)側(cè)的堿基暴露出來,故出現(xiàn)增色效應(yīng)。5.試述真核生物mRNA的特點。答:成熟的真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點是:(1)大多數(shù)的真核mRNA在5-端以7-甲基鳥嘌呤及三磷酸鳥苷為分子的起始結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)稱為帽子結(jié)構(gòu)。帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻
6、譯成蛋白質(zhì)的過程中具有促進核糖體與mRNA的結(jié)合,加速翻譯起始速度的作用,同時可以增強mRNA的穩(wěn)定性。(2)在真核mRNA的3末端,大多數(shù)有一段長短不一的多聚腺苷酸結(jié)構(gòu),通常稱為多聚A尾。一般由數(shù)十個至一百幾十個腺苷酸連接而成。因為在基因內(nèi)沒有找到它相應(yīng)的結(jié)構(gòu),因此認為它是在RNA生成后才加進去的。隨著mRNA存在的時間延續(xù),這段聚A尾巴慢慢變短。因此,目前認為這種3-末端結(jié)構(gòu)可能與mRNA從核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位及mRNA的穩(wěn)定性有關(guān)。第三章1.簡述Km和Vmax的意義。答:Km:(1)Km值等于酶促反應(yīng)速度為最大速度一半時的底物濃度;(2)當(dāng)ES解離成E和S的速度大大超過分解成E和P的速度時,
7、Km值近似于ES的解離常數(shù)Ks。在這種情況下,Km值可用來表示酶對底物的親和力。此時,Km值愈大,酶與底物的親和力愈?。籏m值愈小,酶與底物的親和力愈大。Ks值和Km值的涵義不同,不能互相代替使用;(3)Km值是酶的特征性常數(shù)之一,只與酶的結(jié)構(gòu)、酶所催化的底物和外界環(huán)境(如溫度、pH、離子強度)有關(guān),與酶的濃度無關(guān)。各種酶的Km值范圍很廣,大致在10-610-2mol/L之間。 Vmax(最大速度):是酶完全被底物飽和時的反應(yīng)速度。如果酶的總濃度已知,便可從Vmax計算酶的轉(zhuǎn)換數(shù)。酶的轉(zhuǎn)換數(shù)定義是:當(dāng)酶的底物被充分飽和時,單位時間內(nèi)每個酶分子(或活性中心)催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的分子數(shù)。對于生理性
8、底物,大多數(shù)酶的轉(zhuǎn)換數(shù)在1104/秒之間。2.舉例說明競爭性抑制的特點和實際意義。答:競爭性抑制的特點:競爭性抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)類似:抑制劑結(jié)合在酶的活性中心;增大底物濃度可以降低抑制劑的抑制程度;Km增大,Vmax不變。 如磺胺藥與PABA的結(jié)構(gòu)類似,PABA是某些細菌合成二氫葉酸(DHF)的原料,DHF可轉(zhuǎn)變成四氫葉酸(THF)。THF是一碳單位代謝的輔酶,而一碳單位是合成核苷酸不可缺少的原料。由于磺胺藥能與PABA競爭性結(jié)合二氫葉酸合成酶的活性中心。DHF合成受抑制,THF也隨之減少,使核酸合成障礙,導(dǎo)致細菌死亡。 3.比較三種可逆性抑制作用的特點。(1)競爭性抑制:抑制劑的結(jié)構(gòu)與底物結(jié)
9、構(gòu)相似,共同競爭酶的活性中心。抑制作用大小與抑制劑和底物的濃度以及酶對它們的親和力有關(guān)。Km升高,Vmax不變。(2)非競爭性抑制:抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)不相似或完全不同,只與酶活性中心以外的必需基團結(jié)合。不影響酶在結(jié)合抑制劑后與底物的結(jié)合。抑制作用的強弱只與抑制劑的濃度有關(guān)。Km不變,Vmax下降。(3)反競爭性抑制:僅與酶和底物形成的中間產(chǎn)物(ES)結(jié)合,使中間產(chǎn)物ES的量下降。這樣,既減少從中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的量,也同時減少從中間產(chǎn)物解離出酶和底物的量。Km減小,Vmax下降。第四章1.簡述糖酵解的生理意義。答:(1)在缺氧情況下供能;(2)有些組織即使不缺氧時也由糖酵解提供全部或部分能量,
10、如:成熟紅細胞、神經(jīng)細胞、白細胞等;(3)肌肉收縮情況下迅速供能。2.簡述三羧酸循環(huán)的特點及生理意義。答:特點:(1)細胞內(nèi)定位:線粒體;(2)限速酶:檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶、-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體;(3)需氧參與;(4)每循環(huán)一周:4次脫氫(3次NAD+、1次FAD),2次脫羧生成2分子CO2(碳來自草酰乙酸),1次底物水平磷酸化,共生成10分子ATP;(5)草酰乙酸的主要回補反應(yīng)由丙酮酸直接羧化生成。意義:(1)是三大營養(yǎng)素徹底氧化的最終通路。(2)是三大營養(yǎng)素代謝聯(lián)系的樞紐。(3)為其他合成代謝提供小分子前體。(4)為氧化磷酸化提供還原能量。3.簡述糖異生的生理意義。答:(1)空腹
11、或饑餓時,利用非糖化合物異生成葡萄糖,以維持血糖水平;(2)是肝臟補充或恢復(fù)糖原儲備的重要途徑;(3)調(diào)節(jié)酸堿平衡。4.試比較糖酵解和糖的有氧氧化的區(qū)別。答:糖酵解有氧氧化反應(yīng)條件缺氧有氧胞內(nèi)定位胞漿胞漿、線粒體關(guān)鍵酶己糖激酶(葡萄糖激酶)、6-磷酸果糖激酶-1丙酮酸激酶己糖激酶(葡萄糖激酶)、6-磷酸果糖激酶-1丙酮酸激酶、丙酮酸脫氫酶復(fù)合體、檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶、-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體終產(chǎn)物乳酸二氧化碳、水能量生成2分子ATP,底物水平磷酸化30分子ATP,氧化磷酸化為主生理意義在缺氧情況下供能,特殊組織供能,肌肉收縮情況下迅速供能機體組織細胞供能的主要方式第六章1計算1分子甘油徹底
12、氧化生成多少個ATP?答:甘油ATPADP -磷酸甘油NAD+NADH+H+ 磷酸二羥丙酮 3-磷酸甘油醛 NAD+ NADH+H+ 1,3-二磷酸甘油酸ADP ATP 3-磷酸甘油酸磷酸烯醇式丙酮酸ADPATP丙酮酸在丙酮酸進入線粒體之前,消耗一個ATP,底物水平磷酸化產(chǎn)生2個ATP,2(NADP+ H+)經(jīng)-磷酸甘油穿梭或蘋果酸-天冬氨酸穿梭進入線粒體徹底氧化產(chǎn)生3或5個ATP,丙酮酸進入線粒體后徹底氧化產(chǎn)生12.5個ATP,共計16.5或18.5個ATP.2.試說明物質(zhì)在體內(nèi)氧化和體外氧化有哪些主要異同點?答:例如糖和脂肪在體內(nèi)外氧化。相同點:終產(chǎn)物都是CO2和H2O;總能量不變;耗氧量
13、相同。不同于之處在于:體內(nèi)條件溫和,在體溫情況下進行、pH近中性、有水參加、逐步釋放能量;體外則是以光和熱的是形式釋放。在體內(nèi)以有機酸脫羧的方式產(chǎn)生CO2,體外則碳與氧直接氧化合成CO2。體內(nèi)以呼吸鏈氧化為主使氧與氫結(jié)合成水,體外使氫和氧直接結(jié)合成水。3.敘述影響氧化磷酸化作用的因素及其原理。答:(1)ADP的調(diào)節(jié):正常生理情況下,氧化磷酸化的速率主要受ADP水平調(diào)節(jié)。當(dāng)機體利用ATP增多時,ADP濃度增高,轉(zhuǎn)運到線粒體加速氧化磷酸化的進行,如ADP不足,則氧化磷酸化速度減慢,這種調(diào)節(jié)作用可使機體能量的產(chǎn)生適應(yīng)生理的需要。(2)抑制劑:A呼吸鏈抑制劑:阻斷呼吸鏈某部位電子傳遞的物質(zhì);B解偶聯(lián)劑
14、:使物質(zhì)氧化與ADP磷酸化偶聯(lián)過程脫離;C氧化磷酸化其他抑制劑:如寡霉素可與寡霉素敏感蛋白結(jié)合,阻止H+經(jīng)質(zhì)子通道回流,抑制ATP生成。(3)甲狀腺激素:其誘導(dǎo)細胞膜上Na+-ATP酶合成,加速ATP分解為ADP+Pi,促進氧化磷酸化進行。4.線粒體內(nèi)膜上的電子傳遞鏈是如何排列的,并說明氧化磷酸的偶聯(lián)部位。答:(1)NADH氧化呼吸鏈:DNAH FMN CoQ Cyt b Cytc1 Cytc Cytaa3 02(2)琥珀酸氧化呼吸鏈:琥珀酸 FAD CoQ Cyt b Cytc1 Cytc Cytaa3 02(3)三個偶聯(lián)部位:NADHCoQ;CoQ Cytc; Cytaa3 02第七章 1
15、.丙氨酸-葡萄糖循環(huán)意義如何?答:通過此循環(huán),使肌中的氨以無毒的丙氨酸形式運輸?shù)礁危瑫r,肝又為肌提供了生成丙酮酸的葡萄糖。2.血氨有哪些來源和去路?答:來源:(1)體內(nèi)氨基酸脫氨基作用生成氨,是體內(nèi)血氨的主要來源;(2)腸道內(nèi)產(chǎn)生的氨被吸收入血,它包括:a未被消化的蛋白質(zhì)和未被吸收的氨基酸經(jīng)細菌的腐敗作用產(chǎn)生;b血中尿素滲入腸道被細菌體內(nèi)的脲酶分解產(chǎn)生;(3)腎臟的腎小管上皮細胞內(nèi)的谷氨酰胺酶水解谷氨酰胺產(chǎn)生氨。 去路:(1)在肝臟通過鳥氨酸循環(huán)生成尿素,經(jīng)腎臟排出,是血氨的主要去路;(2)在肝臟、肌肉、腦等組織經(jīng)谷氨酰胺合成酶作用生成無毒的谷氨酰胺;(3)在腎臟生成銨鹽隨尿排出;(4)通過
16、脫氨基作用的逆反應(yīng),再合成非必需氨基酸;(5)參與嘌呤堿和嘧啶堿等化合物的合成。3.論述腦組織中Glu徹底氧化分解的主要途徑及生成多少個ATP?Glu L-谷氨酸脫氫酶 -酮戊二酸 -酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體 琥珀酰CoA NAD+ NH3+NADH HSCoA,NAD+ NADH琥珀酰CoA合成酶 琥珀酸 琥珀酸脫氫酶 延胡索酸 +H2OPi+GDP GTP FAD FADH2蘋果酸粒體 蘋果酸脫氫酶 草酰乙酸草酰乙酸 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶磷酸烯醇丙酮酸 丙酮酸激酶 丙酮酸 入線粒體GTP GDP+ CO2 ADP ATP 丙酮酸脫氫酶復(fù)合體 TAC 丙酮酸 乙酰CoA CO2+H2O能量:凈
17、生成22.5分子ATP4.葉酸、維生素B12缺乏產(chǎn)生巨幼紅細胞貧血的生化機理。答:在體內(nèi)以四氫葉酸形式參與一碳單位的轉(zhuǎn)運,若缺乏葉酸必然導(dǎo)致嘌呤或脫氧胸腺嘧啶核苷酸的合成障礙,繼而影響核酸與蛋白質(zhì)的合成以及細胞的增殖。維生素B12是蛋氨酸合成酶的輔基,若體內(nèi)缺乏維生素B12會導(dǎo)致N5 CH3-FH4上的甲基不能轉(zhuǎn)移,減少FH4的再生,也影響細胞分裂,故產(chǎn)生巨幼紅細胞性貧血。第八章1.說明氨基甲酰磷酸合成酶、有何區(qū)別?答:氨基甲酰磷酸合成酶氨基甲酰磷酸合成酶分布線粒體(肝臟)胞液(所有細胞)氮源氨谷氨酰胺變構(gòu)激活酶N-乙酰谷氨酸無變構(gòu)抑制劑無UMP(哺乳動物)功能參與尿素的合成參與嘧啶核苷酸的合
18、成2.補救合成途徑的生理意義。答:(1)可以節(jié)省從頭合成時的能量和氨基酸的消耗;(2)體內(nèi)某些組織器官如腦、骨髓等缺乏嘌呤醇與次黃嘌呤核苷酸的酶體系,只能依靠補救合成嘌呤核苷酸。3.體內(nèi)脫氧核糖核苷酸是如何生成的?答:體內(nèi)脫氧核糖核苷酸所含的脫氧核糖是通過相應(yīng)的核糖核苷酸的直接還原作用,以氫取代核糖分子中C2上的羥基而生成的,此還原作用是在二磷酸核苷(NDP)水平上進行的(這里N代表A;G;U;C等堿基),由核糖核苷酸還原酶催化,由NADPH+H+作為供氫體。脫氧胸腺嘧啶核苷酸(Dtmp)是由脫氧尿嘧啶核苷酸(dUMP)經(jīng)甲基化生成的,反應(yīng)由N5 ,N10-甲烯四氫葉酸提供甲基,由胸苷酸合成酶
19、催化進行。4.試討論各類核苷酸抗代謝物的作用原理及其臨床應(yīng)用。答:抗代謝物原理臨床應(yīng)用嘌呤類似物與A、G、I競爭性抑制核酸的合成腫瘤治療嘧啶類似物抑制胸腺苷合成酶腫瘤治療氨基酸類似物抑制嘌呤核苷酸的合成腫瘤治療葉酸類似物抑制二氫葉酸還原酶腫瘤治療第九章1簡述酶的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)的特點。答:(1)酶蛋白的共價修飾是可逆的酶促反應(yīng),在不同酶的作用下,酶蛋白的活性狀態(tài)可互相轉(zhuǎn)變。催化互變反應(yīng)的酶在體內(nèi)可受調(diào)節(jié)因素如激素的調(diào)控;(2)與變構(gòu)調(diào)節(jié)不同,酶的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)是通過酶蛋白分子共價鍵的改變而實現(xiàn),有放大效應(yīng);(3)磷酸化與脫磷酸化是最常見的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)。2.根據(jù)受體存在的部位,激素分為哪幾類。答:根據(jù)
20、受體存在的部位,激素分為兩類:(1)作用于細胞膜受體的激素;均為親水激素。(2)作用于細胞內(nèi)受體的激素,均為親脂性激素。第十章1.何謂DNA的半保留復(fù)制?簡述復(fù)制的主要過程。答:DNA在復(fù)制時,親代DNA兩條鏈均可做模板,生成兩個完全相同的子代DNA,每個子代DNA的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈是新合成的,稱為半保留復(fù)制。復(fù)制的主要過程是:(1)拓撲異構(gòu)酶松弛超螺旋;(2)解螺旋酶將兩股螺旋打開;(3)單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合在每條單鏈上,以維持兩條單鏈處于分離的狀態(tài);(4)引物酶催化合成RNA引物;(5)DNA聚合酶催化合成新的DNA的領(lǐng)頭鏈及岡崎片段;(6)RNA酶水解引物,DNA聚合酶催
21、化填補空隙;(7)DNA連接酶將岡崎片段連接起來以完成隨從鏈的合成。2.簡述原核生物DNA聚合酶的種類和功能。答:大腸桿菌有三種DNA聚合酶,分別為DNA聚合酶、。DNA聚合酶的功能是填補空隙、切除引物、修復(fù);DNA聚合酶的功能不清;DNA聚合酶是復(fù)制時的主要復(fù)制酶。3.簡述DNA損傷的修復(fù)類型。答:修復(fù)是指針對已經(jīng)發(fā)生的缺陷而實施的補救機制,主要有光修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù)。光修復(fù):通過光修復(fù)酶催化完成的,需300600nm波長照射即可活化,可使嘧啶二聚體分解為原來的非聚合狀態(tài),DNA完全恢復(fù)正常。切除修復(fù):細胞內(nèi)的主要修復(fù)機制,主要有核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶及連接酶完成修復(fù)。重
22、組修復(fù):先復(fù)制再修復(fù)。損傷部位因無模板指引,復(fù)制出來的新子鏈會出現(xiàn)缺口,通過核酸酶將另一股健康的母鏈與缺口部分進行交換。SOS修復(fù):SOS是國際海難信號,SOS修復(fù)是一類應(yīng)急性的修復(fù)方式。是由于DNA損傷廣泛以至于難以繼續(xù)復(fù)制由此而誘發(fā)出一系列復(fù)雜的反應(yīng)。4.論述參與原核生物DNA復(fù)制過程所需的物質(zhì)及其作用。答:(1)dNTP:作為復(fù)制的原料。 (2)雙鏈DNA:解開成單鏈的兩條鏈都可作為模板指導(dǎo)DNA的合成。 (3)引物:一小段RNA,提供游離的3-OH。 (4)DNA聚合酶:即依賴于DNA的DNA聚合酶,合成子鏈。原核生物中,DNA聚合酶是真正的復(fù)制酶,DNA聚合酶的作用是切除引物、填補空
23、隙和修復(fù)。(5)其他的一些酶和蛋白因子:解鏈酶,解開DNA雙鏈;DNA拓撲異構(gòu)酶松弛DNA超螺旋,理順打結(jié)的DNA雙鏈;引物酶,合成RNA引物;單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB),結(jié)合并穩(wěn)定解開的單鏈;DNA連接酶,連接隨從鏈中兩個相鄰的DNA片段。第十一章1一條DNA單鏈3ACATTGGCTAAG5 試寫出:(1)復(fù)制后生成的DNA單鏈堿基順序;(2)轉(zhuǎn)錄后生成的mRNA鏈的堿基序列。答:(1)復(fù)制后生成的DNA鏈為:5-TGTAACCGATTC-3轉(zhuǎn)錄后生成的mRNA鏈為:5-UGUAACCGAUUC-32.簡述真核生物tRNA轉(zhuǎn)錄后加工過程。答:(1)在細胞核內(nèi),由RNA聚合酸催化合成tRNA
24、的初級產(chǎn)物,初級產(chǎn)物中有些中間插入堿基在加工過程中經(jīng)剪接而除去;(2)生成各種稀有堿基。包括甲基化反應(yīng)、還原反應(yīng)、轉(zhuǎn)位反應(yīng)以及脫氨反應(yīng)等;(3)3末端加上CCA-OH.3.試述原核生物轉(zhuǎn)錄過程。答:分起始、延長、終止三個階段。(1)起始:在原核生物中,當(dāng)RNA聚合酶的亞基發(fā)現(xiàn)其識別位點時,全酶就與啟動子的一35區(qū)序列結(jié)合形成一個封閉的啟動子復(fù)合物。由于全酶分子較大,其另一端可到-10區(qū)的序列,在某種作用下,整個酶分子向-10序列轉(zhuǎn)移并與之牢固結(jié)合,在此處發(fā)生局部DNA12-17bp的解鏈,形成全酶和啟動子的開放性復(fù)合物。在開放性啟動子復(fù)合物中,起始位點和延長位點被相應(yīng)的核苷酸前體充滿,在RNA
25、聚合酶亞基催化下形成RNA的第一個磷酸二酯鍵。RNA合成的第一個核苷酸總是GTP或ATP,以GTP常見前面9個核苷酸的合成不需要RNA聚合酶移動。亞基從全酶解離下來,靠核心酶在DNA鏈上向下游滑動,而脫落的亞基與另一個核心酶結(jié)合成全酶反復(fù)利用。(2)延長:當(dāng)核心酶沿模板3 5。(3)終止:當(dāng)核心酶沿模板3 5滑至終止信號區(qū)域,轉(zhuǎn)錄終止。DNA模板上的轉(zhuǎn)錄終止信號有兩類:一類是不依賴蛋白質(zhì)因子而實現(xiàn)的終止作用;另一類是依賴蛋白質(zhì)輔因子才能實現(xiàn)終止作用,這種蛋白質(zhì)輔因子稱為釋放因子,通常又稱因子。4.試述真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后加工過程。答:(1)hnRNA的剪接:hnRNA是RNA的前體,通過多種
26、核酸酶的作用將hnRNA中由DNA內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的部分切去,將基因的外顯子轉(zhuǎn)錄的部分拼接起來;(2)在mRNA3端加上聚腺苷酸尾巴(polyA)。這一過程在細胞核內(nèi)完成,在加入polyA之前,先由核酸外切酶切去3末端一些過剩的核苷酸,然后在多聚苷酸聚合酶催化下,在3末端加上polyA。(3)5末端形成帽子結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物第一個核苷酸常是5-三磷酸鳥苷pppG。mRNA在成熟過程中,先由磷酸酶把5-pppG水解成5-PG,然后5起始部位與另一個三磷酸鳥苷pppG反應(yīng),生成三磷酸雙鳥苷。在甲基化酶作用下,第二個鳥嘌呤堿基發(fā)生甲基化反應(yīng),形成帽子結(jié)構(gòu)(GpppmG)。第十二章 1. 試述復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯的
27、方向性。答:(1)復(fù)制的方向性:DNA復(fù)制的起始部位稱復(fù)制子。每個復(fù)制子可形成兩個復(fù)制叉,如模板單鏈DNA3 5的方向與復(fù)制叉方向相同,則是連續(xù)復(fù)制;如果模板方向和復(fù)制叉方向相反,則DNA合成為不連續(xù)合成。(2)轉(zhuǎn)錄的方向性:DNA模板方向是 3 5轉(zhuǎn)錄為RNA的方向是5 3。(3)翻譯的方向性:核蛋白體沿mRNA從5 3方向進行翻譯,所合成的多肽鏈方向是由N端指向C端進行。2. 簡述蛋白質(zhì)生物合成的主要過程。答:蛋白質(zhì)生物合成的主要過程分為以下三步:(起始階段:起始復(fù)合物的形成;(2)延伸階段:通過進位、成肽、轉(zhuǎn)位三步反應(yīng),多肽按N端 C端延伸;(3)終止階段:當(dāng)終止密碼子出現(xiàn)在A位時。肽鏈
28、合成終止并從核蛋白體上釋放下來,大、小亞基分離。3. 為什么說翻譯后氨基酸的化學(xué)修飾與蛋白質(zhì)總體構(gòu)象的形成有關(guān)?答:蛋白質(zhì)總體構(gòu)象取決于不同氨基酸之間氫鍵和疏水鍵形成的能力,以及側(cè)鏈和其他基團對空間結(jié)構(gòu)的影響,這些因素都與翻譯后的加工有關(guān)。4. 真核生物與原核生物蛋白質(zhì)合成過程中的不同點是什么?答:真核生物原核生物mRNA翻譯與轉(zhuǎn)錄不偶聯(lián),mRNA需加工修飾;有“帽”及聚A“尾”,無S-D序列,為單順反子;較穩(wěn)定,易分離。翻譯與轉(zhuǎn)錄偶聯(lián);無“帽”與多聚A“尾”,但5-末端起始密碼上游有S-D序列,為多順反子;半壽期短,不穩(wěn)定,不易分離。核蛋白體(1) 沉降系數(shù)80S;(2) 小亞基40S,含1
29、8S rRNA及33種蛋白(3) 大亞基60S,含5S、8S、28S三種rRNA及49種蛋白質(zhì);(4) 小亞基上的18SrRNA與無mRNA相結(jié)合的區(qū)域(1)70S;(2)30S,含16SrRNA及21種蛋白質(zhì);(3)50S,含5S、23S兩種rRNA及31種蛋白質(zhì);(4)16SrRNA3末端有與mRNA5末端的S-D序列相互補的堿基序列。tRAN起始tRNA是非甲酰化的Met-tRNA imet甲?;腗et-tRNAmet(fMet-tRNAfmet)合成過程起始延長終止(1) 起始因子(eIF)10余種;(2) 小亞基先于非甲酰化Met-tRNA imet結(jié)合,再與mRNA結(jié)合;協(xié)助氨基
30、酰-tRNA進入A位的eEF1,移位的因子稱eEF2只有一種釋放因子(RF),識別三種終止密碼。(1) IF有三種;(2) 小亞基先于mRNA,再結(jié)合fMet-tRNAfmet;進位是EFT(由Tu和Ts兩個亞基組成),移位需EFG;有三種RF,RF1識別UAA、UAG;RF2識別UAA、UGA;RF3協(xié)助二者起作用第十三章 1. 簡述原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點。答:原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的主要環(huán)節(jié)在轉(zhuǎn)錄起始,其特點為:(1)因子決定RNA聚合酶識別特異性;(2)操縱子模型的普遍性;(3)阻遏蛋白與阻遏機制的普遍性。第十五章1. 按存在的部位,受體分哪些種類?答:按受體存在的部位,受體分為膜受體和胞內(nèi)受體
31、。細胞膜受體接收水溶性化學(xué)信號分子,如肽類激素、細胞因子、粘附分子等、更具細胞膜受體的結(jié)構(gòu)、接收信號的種類、轉(zhuǎn)換信號的方式等,可分為環(huán)狀受體(配體依賴性離子通道)、G蛋白偶聯(lián)受體、單個跨膜螺旋受體和具有鳥苷酸環(huán)化酶活性的受體。細胞內(nèi)受體接收脂溶性化學(xué)信號分子,如類固醇激素、甲狀腺素、維甲酸等。2. 簡述細胞內(nèi)第二信使調(diào)控的蛋白激酶有哪些?答:受細胞內(nèi)第二信使調(diào)控的蛋白激酶有:(1)蛋白激酶A(受cAMP調(diào)控);(2)蛋白激酶C(受Ca2+和DAG調(diào)控)(3)Ca2+-CaM激酶(受Ca2+調(diào)控);(4)蛋白激酶G(受cGMP調(diào)控)。3. 受體與配體結(jié)合有哪些特點?答:受體與配體結(jié)合的特點有:高
32、度專一性、高度親和力、可飽和性、可逆性、特定的作用模式。4. 試述腎上腺素調(diào)節(jié)糖原代謝的級聯(lián)反應(yīng)過程。答:腎上腺素調(diào)節(jié)糖原代謝的級聯(lián)反應(yīng)過程:見圖腎上腺素+受體 腎上腺素-受體復(fù)合物 無活性的G蛋白 活性G蛋白 無活性AC活性AC ATPcAMP活性糖原合酶a無活性PKA活性PKA無活性糖原合酶b無活性磷酸化酶b激酶有活性磷酸化酶b激酶無活性磷酸化酶b有活性磷酸化酶b 糖原G5. 概述BGF受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑答:EGF受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑:EGF與受體結(jié)合使受體二聚體化, 并自身磷酸化 接頭蛋白Grb2 調(diào)控分子SOS與Grb2結(jié)合并活化 活化Ras蛋白 活化Raf(MAPKKK) MA
33、PK 轉(zhuǎn)位至細胞核使轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子磷酸化 調(diào)控基因表達。第十六章1. 血紅素合成的特點有哪些?答:(1)主要部位:骨髓和肝;(2)原料:甘氨酸、琥珀酰CoA及Fe2+;(3)起始和最終過程在線粒體中進行,其他中間步驟在胞液中進行。2. 試述成熟紅細胞糖代謝特點及生理意義。答:(1)成熟紅細胞糖代謝特點:糖酵解:1次糖酵解提供2個ATP;2,3-BPG旁路:占糖酵解的15%50%;2,3-BPG磷酸酶活性較低,2,3-BPG的生成大于分解,故紅細胞內(nèi)2,3-BPG升高,調(diào)節(jié)血紅蛋白的供氧功能;磷酸戊糖途徑:與其他細胞相同,產(chǎn)生NADPH+H+。(2)紅細胞內(nèi)糖代謝的生理意義:ATP的功能:維持紅細
34、胞膜上鈉泵、鈣泵的正常運行;維持紅細胞膜上脂質(zhì)與血漿脂蛋白中的脂質(zhì)進行交換;少量ATP用于GSH、NAD+的生物合成;用于葡萄糖的活化,啟動糖酵解過程;2,3-BPG的功能:可與血紅蛋白結(jié)合使血紅蛋白分子的T構(gòu)象更穩(wěn)定,降低血紅蛋白與O2的親和力;當(dāng)PO2較低時2,3-BPG的存在可使O2釋放顯著增加;NADH和NADPH的功能:具有抗氧化作用,保護細胞膜蛋白、血紅蛋白、酶蛋白的巰基不被氧化。第十七章1. 簡述膽汁酸的分類及生理功能。答:(1)分類: 按其來源分為:初級膽汁酸和次級膽汁酸。初級膽汁酸包括膽酸、鵝脫氧膽酸;次級膽汁酸包括脫氧膽酸、石膽酸。 按存在形式分為:游離型膽汁酸和結(jié)合型膽汁
35、酸。游離型膽汁酸包括膽酸、鵝脫氧膽酸、石膽酸、脫氧膽酸;結(jié)合型膽汁酸包括以上游離膽汁酸分別與甘氨酸和?;撬峤Y(jié)合形成的各種結(jié)合型膽汁酸。(2)功能:促進脂類的消化和吸收;抑制膽汁中膽固醇的析出2. 簡述膽紅素的來源和去路。答:來源:(1)80%來源于血紅蛋白;(2)其他來自鐵卟啉類去路:(1膽紅素入血后與血清蛋白結(jié)合成血膽紅素(又稱游離膽紅素)而被運輸;(2)被肝細胞攝取的膽紅素與Y蛋白或Z蛋白結(jié)合后被運輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)在葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶催化下生成膽紅素-葡萄糖酸酯,稱為肝膽紅素(又稱結(jié)合膽紅素);(3)肝膽紅素隨膽汁進入腸道,在腸道細菌作用下生成無色膽素原,大部分膽素原隨糞便排出,小部分膽素原經(jīng)門靜
36、脈重吸收入肝,大部分又被肝細胞再分泌入場,構(gòu)成膽素原的肝腸循環(huán);(4)重吸收的膽素原少部分進入體循環(huán),經(jīng)腎由尿排出。3. 肝在膽紅素代謝中有何作用?答:(1肝細胞特異性膜載體從血漿中攝取未結(jié)合膽紅素;(2)膽紅素進入肝細胞與Y蛋白、Z蛋白結(jié)合。,運到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與葡萄糖醛酸結(jié)合轉(zhuǎn)化為結(jié)合膽紅素;(3)結(jié)合膽紅素從肝細胞毛細膽管排泄入膽汁中,通過肝臟對膽紅素的攝取、結(jié)合、轉(zhuǎn)化與排泄,使血漿的膽紅素能不斷經(jīng)肝細胞處理而被清除。4. 結(jié)合膽紅素與未結(jié)合膽紅素有什么區(qū)別,對臨床診斷有何用途?答:區(qū)別:(1)未結(jié)合膽紅素是指血清中的膽紅素與清蛋白形成的復(fù)合物。它的分子量大,不能隨尿排出;未與血清蛋白結(jié)合的膽紅
37、素是脂溶性,易透過生物膜進入腦產(chǎn)生毒害作用,所以血中當(dāng)其濃度增加時可導(dǎo)致膽紅素腦病。(2)合膽紅素主要指葡萄醛酸膽紅素,它的分子量小,水溶性好,可隨尿排出。臨床診斷用途:(1)血漿未結(jié)合膽紅素增高主要見于膽紅素來源過多,如溶血性黃疸;其次見于未結(jié)合膽紅素處理受阻,如肝細胞性黃疸。(2)血漿結(jié)合膽紅素增高主要見于阻塞性黃疸,其次見于肝細胞性黃疸。(3)血漿未結(jié)合膽紅素和結(jié)合膽紅素均輕度升高見于肝細胞性黃疸。第十八章1. 缺乏葉酸和維生素B12時,為什么會患巨幼紅細胞性貧血?答:巨幼紅細胞性貧血的特點是骨髓呈巨幼紅細胞增生。該病的發(fā)生與葉酸和維生素B12缺乏有密切關(guān)系。其發(fā)病機制是由于合成核苷酸的原料一碳單位缺乏,DNA合成受阻,骨髓幼紅細胞DNA合成減少,細胞分裂速度降低,體積增大,而數(shù)目減少所致。一碳單位是某些氨基酸分解代謝所生成的含一個碳原子的有機基團,一碳單位是合成嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的原料,后兩者又是合成DNA和RNA的原料。葉酸的活性形式是FH4,它既是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶,由分子N5 ,N10兩個氮原子攜帶一碳單位參與體內(nèi)多種物質(zhì)的合成。FH4它又是攜帶和轉(zhuǎn)移一碳單位的載體,故一碳
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