利用CAPS標記轉(zhuǎn)育野生番茄的高產(chǎn)基因

1、中國農(nóng)業(yè)科學 2007,40(8):1738-1745 Scientia Agricultura Sinica利用CAPS標記轉(zhuǎn)育野生番茄的高產(chǎn)基因李 紅1,2，杜永臣，王孝宣，宋 明，高建昌，國艷梅，朱德蔚，戴善書 1121111（1西南大學園藝園林學院，重慶 400716； 2中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所，北京 100081）摘要：【目的】將野生多毛番茄中的高產(chǎn)基因滲入到普通番茄骨干親本以創(chuàng)造高產(chǎn)番茄育種材料?！痉椒ā縏A1229是野生多毛番茄（Lycopersicon hirsutum acc.）LA1777的一個近等基因系，帶有來源于LA1777的高產(chǎn)基因（QTL）。通過雜交、回交和分

2、子標記輔助選擇方法對TA1229×9706的BC1群體進行遺傳分析?！窘Y(jié)果】獲得23個比TA1229含有的外源染色體片段更短的漸滲系，其中16個漸滲系為高產(chǎn)番茄材料，并檢測到了一個影響番茄成熟果實平均重量的QTL，將其定位于標記TG53和TG158之間?！窘Y(jié)論】16份漸參系可用作為高產(chǎn)番茄新種質(zhì)。關(guān)鍵詞:CAPS; QTL;分子標記輔助選擇; 高產(chǎn); 番茄Introgression of High Yield Genes from Lycopersicon.hirsutumacc.LA1777 Using CAPS MarkerLI Hong1,2, DU Yong-chen 1,

3、WANG Xiao-xuan 1, SONG Ming2, GAO Jian-chang1, GUO Yan-mei1,ZHU De-wei1, DAI Shan-shu1( 1Horticulture and Landscape College, Southwest University, Chongqing 400716; 2Institute of Vegetables and Flowers, ChineseAcademy of Agricultural Sciences, Beijing 100081)Abstract: 【Objective】Using high yield gen

4、es from wild tomato can enrich tomato breeding resources and accelerate tomato breeding programs.【Method】In this study, the near-isogenic line TA1229, containing a 24-cM introgression at the bottom of chromosome 1 from Lycopersicon hirsutum acc.LA1777, affected several high yield traits. The TA1229&

5、#215;9706 BC1 population was analyzed by marker-assisted selection and the traits of the population were evaluated.【Result】Twenty-three recombinant individuals carrying a shorter segment than TA1229 were obtained. Among them,16 lines with the chromosome 1 recombinant segment increased tomato yield.

6、QTL affecting yield was found between TG53 and TG158.【Conclusion】Sixteen recombinant lines are useful for improvement of tomato varieties.Key words: CAPS; QTL; Marker assisted selection; High yield; Tomato(Lycopersicon esculentem Mill)0 引言【研究意義】番茄（Lycopersicon esculentem Mill）的豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)是其育種研究及生產(chǎn)實踐中的重要目標之

7、一1,2。近20年來，傳統(tǒng)的產(chǎn)量育種已取得了長足的進展，育成的番茄品種比對照增產(chǎn)20%30%1。但是，長期以來利用較高的選擇壓，導致目前番茄育種利用常規(guī)育種技術(shù)和現(xiàn)有依賴于很窄的遺傳背景3,4，的資源很難育成超過當前最好栽培品種產(chǎn)量10%的新品種。【前人研究進展】有研究表明58，在多毛番茄（L.hirsutum）、潘那利番茄（L.pennellii）、醋栗番茄（L.pimpinellifolium）、小花番茄（L.parviflorum）、奇美留斯基番茄（L.chmielewskii）等果實小、產(chǎn)量低的野生和未馴化的番茄中存在增加產(chǎn)量的QTL（quantitative trait loci）。

8、國內(nèi)外為了利用這些QTL進行了系統(tǒng)研究，共鑒定了40多個與番茄產(chǎn)量有關(guān)的QTL，建立了其近等基因系（QTL-NILs）913，并克隆了一個具有負作用的QTL：fw2.214,15，這些QTL分布于番茄的12條染色體上，主要集中在染色體1、2、3、4、8上?！颈狙芯壳腥朦c】目前存在的問題是收稿日期：2006-03-06；接受日期：2006-10-24基金項目：北京市自然科學基金資助項目（6042023），農(nóng)業(yè)部蔬菜遺傳與生理重點開放實驗室資助項目作者簡介：李 紅（1981-）女，山西大同人，碩士研究生，研究方向為番茄分子育種。通訊作者杜永臣（1955-），男，河北昌黎人，教授，博士，研究方向為蔬

9、菜遺傳育種。TelE-mail：yongchen.du8期 李 紅等：利用CAPS標記轉(zhuǎn)育野生番茄的高產(chǎn)基因 1739QTL近等基因系中含有的野生番茄的染色體片段長度較長，QTLs與小果實等不良基因間連鎖累贅的影響比較大，在育種中直接利用難度較大3,5。因此，打破連鎖累贅，將野生資源中的高產(chǎn)QTL導入到優(yōu)良的栽培骨干親本中，實現(xiàn)高產(chǎn)基因的聚合，將極大地推動產(chǎn)量育種?！緮M解決的關(guān)鍵問題】本課題組通過國際合作獲得了一系列近等基因系材料，其中TA1229是多毛番茄的1個近等基因系5，含有來自多毛番茄第1染色體底端的長24 cM的DNA片段。已經(jīng)證明，該片段含有增加產(chǎn)量的Q

10、TL，能增加植株重量和果實重量，在植株生長的晚期階段仍能維持其生長率，維持營養(yǎng)生長與生殖生長之間的轉(zhuǎn)化5。本研究旨在結(jié)合常規(guī)育種技術(shù)和分子標記輔助選擇手段，將TA1229中的高產(chǎn)QTL滲入到本課題組優(yōu)良骨干親本9706中，以期獲得高產(chǎn)番茄育種種質(zhì)。TA1229、9706及其F1代于2004年1月種植于日光溫室中，2005年春季將BC1代種植于露地，平均每0.7 m2種植1株，共160株。分單株對各個指標進行調(diào)查。產(chǎn)量從第1穗果實轉(zhuǎn)色期開始調(diào)查，每隔510 d調(diào)查1次，共調(diào)查5次。其中第14次只調(diào)查各單株的成熟果實數(shù)量和重量，第5次將每株上的所有果實摘下，分別調(diào)查成熟果實和綠果的數(shù)量和重量。在第

11、2次和第3次調(diào)查時，取每株上能代表該植株果實大小的3個果實，分別測量其橫徑、縱徑和心室數(shù)。在植株拉秧時，分別測定各株的葉重、莖重。最后統(tǒng)計各個單株的成熟果實平均重、青果平均重、果實平均重、坐果率（果實總個數(shù)÷總花數(shù)）以及果型指數(shù)（果實平均直徑÷果實平均縱徑）等。 1.2 CAPS分析待幼苗長到八葉期，采用CTAB法提取嫩葉DNA。對Cornell大學網(wǎng)址（www. sgn. cornell. edu /maps /tomato-arabidopsis）公布的潘那利番茄第1染色體末端的8個RFLP標記TG17、TG27、TG53、TG158、TG269、TG476、TG580

12、和TG617標記進行酶切擴增多態(tài)性序列（cleaved amplified polymorphic secquence，CAPS）標記的轉(zhuǎn)化。引物由Primer3 程序（/cgi-bin/primer/ primer3.cgi）設(shè)計，標記名稱仍用原來RFLP標記的名稱，引物由上海生工生物技術(shù)服務(wù)有限公司合成（表1）。1 材料與方法1.1 材料及性狀調(diào)查（1）TA1229，來源于美國番茄遺傳資源中心（tomato genetics resource center，TGRC），是野生多毛番茄（L. hirsutum）LA1777的一個亞近等基因

13、系，含有來源于LA1777長約24 cM的染色體片段；栽培番茄骨干材料9706，來自中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所鮮食番茄組，果實粉紅色，無限生長類型，產(chǎn)量高，抗病毒病、葉霉病和枯萎病；（2）216，TA1229與9706的F1代；（3）261，用9706為輪回親本的BC1代。表1 根據(jù)RFLP標記序列設(shè)計的CAPS引物Table 1 The designed primers of CAPS from RFLP markers標記Primer左側(cè)引物 Left primer右側(cè)引物 Right primer5´-AAATCAATTGAACCGGCTGT-3´5´-C

14、TTTTTAAACGCCCAACTGC-3´ 5´-CAGAGGGTTGATCACAAACAA-3´ 5´-TGGTCCGTTTCACAATGTCT-3´ 5´-GTTCCCAATTTTGCTTGCAC-3´ 5´-AGGCGAAGGGACCAAGTTAT-3´ 5´-AGACTTTCTGGCAGCTGGAC-3´ 5´-AGCATCCGTCTGCGTATTAAA-3´TG17 5´-CGGCTGTGTACGTATCTGGA-3´ TG27 5&

15、#180;-ACCAATTTTGTCGGTGTCAA-3´ TG53 5´-TTCCCTGCTAGGAGGGATGA-3´TG158 5´-TGTTTTTCTTTTAGAATGAAGTAACCT-3´ TG269 5´-CGAAGCCAAATTCTTCCTCA-3´ TG476 5´-AAATCTGATGCTCGGCTGAT-3´ TG580 5´-ATCGTGGGGCTGATGTATTT-3´ TG617 5´-GTTGGTCCAAAAGGATTTGC-3´在對R

16、FLP引物進行轉(zhuǎn)化分析時，主要對CAPS-PCR反應(yīng)體系中的模板DNA濃度、Mg2+濃度和PCR循環(huán)體系中的退火溫度進行優(yōu)化。優(yōu)化的PCR擴增體系包括：50 ng模板DNA、2.5µl 10×PCR buffer、250 µmol·L-1 dNTPs（Promage）、1.25U Taq DNA聚合酶（Promage）、Mg2+濃度1.52.0 mmol·L-1（最終濃度）、每個 引物的濃度為0.2 µmol·L-1（最終濃度），最終體積為25 µl，覆蓋20 µl1740 中 國 農(nóng) 業(yè) 科 學 40卷

17、環(huán)體系為：先92 3 min，然后40個擴增循環(huán)：92 1 min，62 1.5 min，72 2 min，最后一個加尾步驟72 8 min。不同引物的退火溫度在5761之間。利用1%瓊脂糖凝膠（0.5×TBE緩沖液）電泳PCR產(chǎn)物，每個樣品加5 µl PCR產(chǎn)物，3 µl上樣緩沖液，溴化乙錠染色，利用凝膠成像系統(tǒng)檢測多態(tài)性。在PCR擴增產(chǎn)物與預期結(jié)果一致的情況下，對PCR產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶消化。限制性內(nèi)切酶反應(yīng)體系為：1.5 µl限制性內(nèi)切酶緩沖液，0.2 µl限制性內(nèi)切酶（10 U·µl-1，TaKaRa），3.3 &#

18、181;l超純水。其中TaqI消化反應(yīng)溫度為65，HinfI消化發(fā)應(yīng)溫度為37，水浴中反應(yīng)36 h。利用2%瓊脂糖凝膠電泳酶切產(chǎn)物，每個樣品加15 µl酶切產(chǎn)物，3 µl上樣緩沖液，溴化乙錠染色。在凝膠成像系統(tǒng)下檢測酶切產(chǎn)物的多態(tài)性。mmol·L-1的條件，經(jīng)PCR擴增后獲得1條分子量為2.4 kb的譜帶，在各種基因型之間沒有多態(tài)性。PCR產(chǎn)物經(jīng)過限制性內(nèi)切酶TaqI消化后，在9706和TA1229之間出現(xiàn)多態(tài)性。TA1229消化后得到2條譜帶，其特征譜帶的分子量為1 400 bp和1 000 bp；9706沒有酶切位點不能被消化；雜交后代中具有兩親本的所有特征譜

19、帶（圖1）。TG53在退火溫度58、Mg2+濃度為1.5 mmol·L-1的條件下，經(jīng)PCR擴增后獲得1條分子量為500 bp的譜帶，在各種基因型之間沒有多態(tài)性。PCR產(chǎn)物經(jīng)過限制性內(nèi)切酶TaqI消化后，在9706和TA1229之間出現(xiàn)多態(tài)性。TA1229消化后得到2條譜帶，其特征譜帶的分子量為210 bp、180 bp；9706消化后得到2條譜帶，其特征分子量為300 bp、110 bp；雜交后代中具有兩親本的所有特征譜帶（圖1）。TG158、TG476和TG580也得到了類似的結(jié)果，其電泳圖譜和特征分子量如圖1和表2所示。利用新建立的5個CAPS標記對TA1229與9706的BC

20、1群體的160個單株進行分析（圖2為部分單株的結(jié)果）。TG17的分析結(jié)果表明，含有TA1229特征基因型的陽性雜和單株有89株，不含的有69株，缺失2株，符合BC1群體11的性狀分離規(guī)律；TG158的分析結(jié)果表明，含有TA1229特征基因型的陽性雜合單株有82株，不含的有73株，缺失5株，符合BC1群體11性狀分離規(guī)律；TG53、TG476和TG580標記的結(jié)果也均符合BC1代11的分離規(guī)律。在利用2 結(jié)果與分析2.1 CAPS分析CAPS分析結(jié)果表明，標記TG27無論改變退火溫度，還是改變Mg2+濃度，都得不到理想的PCR產(chǎn)物，而標記TG269和TG617得到了預期的PCR產(chǎn)物，但經(jīng)限制性內(nèi)

21、切酶消化后多態(tài)性和預期結(jié)果不一致，這兩個標記需要利用更多的限制性內(nèi)切酶進行消化分析。標記TG17在退火溫度60、Mg2+濃度為2.0M：Marker; 211：TA1229; 212： 9706; 216：TA1229與9706的雜交一代 M:Marker; 211:TA1229; 212: 9706; 216: F1 generation of TA1229 and 9706圖1 標記TG17、TG53、TG158、TG476和TG580的CAPS分析結(jié)果Fig. 1 The results of analysis by using CAPS primers TG17, TG53, TG15

22、8, TG476 and TG5808期 李 紅等：利用CAPS標記轉(zhuǎn)育野生番茄的高產(chǎn)基因1741M：Marker；211：TA1229；212：9706；216：TA1229與9706的雜交一代；114, 1629：212和216的回交一代M: Marker; 211: TA1229; 212: 9706; 216: F1 generation of TA1229 and 9706; 1-14, 16-29: BC1 generation of 212 and 216圖2 利用標記TG17、TG53、TG158、TG476、TG580對BC1代的分析結(jié)果Fig. 2 The CAPS ana

23、lysis on BC1 by using marks TG17, TG53, TG158, TG476, TG5801742 中 國 農(nóng) 業(yè) 科 學 40卷表2 5個RFLP轉(zhuǎn)化為CAPS標記后的多態(tài)性Table 2 The polymorphism of 5 RFLP marks after converting to CAPS標記 退火溫度 Mg2+濃度 PCR產(chǎn)物分子量限制性內(nèi)切酶Markers Annealing temperarure Mg2+ MW of PCR Enzyme-1() (mmol·L) (bp) TG17 60TG53 58 TG158 57 TG476

24、 58 TG580 612.0 1.5 1.5 1.5 1.52400 400 2350 1400 1450TaqI TaqI HinfI TaqI TaqI消化后的分子量 MW after digestion (bp) 9706 TA1229 F1 2400 300+110750+290+280+220+180450+310+200 880+5401400+1000 2400+1400+1000 210+180 300+210+180+110 650+290+220+180 750+650+290+220+180550+330+210+200 550+450+330+210+20014001

25、400+880+540上述標記對BC1群體進行分析后，得到標記間發(fā)生交換的單株23株，分別為2617、13、14、15、52、54、65、79、80、82、85、86、132、133、134、135、139、142、143、144、145、149、150。 2.2 QTL分析和高產(chǎn)番茄材料的獲得2.2.1 QTL分析 采用軟件MAPQTL4.0對5個CAPS標記進行連鎖分析并對影響番茄產(chǎn)量的各個分量進行QTL分析。通過連鎖分析將5個標記定位于第1染色體上，其在染色體上的順序為：TG53、TG158、TG476、TG850和TG17，其遺傳距離分別為7.5、1.8、0.6和1.3 cM，共覆蓋長

26、為11.3 cM的染色體片段。（圖3）。通過對影響番茄產(chǎn)量的各個分量進行QTL分析，在Permutation Test命令下，成熟果實平均重量所得到的LOD閾值為12.5，對此性狀進行多模型QTL作圖（multiple QTL model）得圖3。由圖3可知，圖中的2個峰值（1和2）所對應(yīng)的LOD值分別為15.5和14.5，均大于LOD閾值12.5，因此可將控制成熟果實平均重的QTL粗略定位在TG53和TG158之間約7.5 cM的位置。2.2.2 高產(chǎn)番茄材料的獲得 從BC1代的160株番茄材料中篩選出了16個在TG53和TG158之間發(fā)生單交換的單株。其中2617、13、14、15、79、

27、85、86、132、133、134、142、144、145、150的基因型為（0，1）型；26154，65的基因型為（1，0）型。其成熟果平均單果重位于前3位的有8株（圖4），分別為261144（0.14 kg）、261133（0.12 kg）、261150（0.12 kg）、26154（0.11 kg）、26165、261132（0.11 kg）、（0.11 kg）、26179（0.11 kg）261142（0.11kg）。以基因型為（0，0）和基因型為（1，1）的材料為對照，經(jīng)方差分析結(jié)果表明，這16份材料的成熟果實平均重量顯著高于對照，因此初步判定控制成熟果實平均重量的QTL對產(chǎn)量的影響

28、為正效應(yīng)，而這16份材料可作為高產(chǎn)番茄的新種質(zhì)。橫軸為TG17、TG53、TG158、TG476、TG580在染色體上的位置?？v軸為LOD值，峰值為QTL在染色體上的位點，水平的虛線代表QTL閾值The abscissas correspond to the positions of TG17, TG53, TG158, TG476, TG580 in chromosome 1, the y-axis corresponds to LOD and the peak value corresponds to the QTL site on the chromosome, the site of

29、dashed line is the threshoud value of QTL圖3 成熟果平均重多模型QTL圖Fig. 3 The multiple QTL model of the average weight ofripeness fruit3 討論3.1 本試驗獲得的5個標記在染色體上的位置TG53、TG158、TG476、TG580和TG17和康奈爾大學網(wǎng)址（/maps/tomato_ arabidopsis/chr1c.pl）公布的潘那利番茄圖譜上的標記順序（TG17、TG53、TG158、TG476和TG580）有差異。本研究中

30、針對多毛番茄長為24 cM的染色體片段利用160個單株構(gòu)成的BC1群體進行了遺傳分析，相當于用1萬多個單株構(gòu)成的群體對整個基因組進行的分析。利用5個標記對23個重組單株進行多次重復分析的結(jié)果均一致。因此，本研究中得到的5個CAPS標記在染色體上的順序結(jié)果是可靠的。發(fā)生在該染色體片段上的標記順序的差別可能是引起多毛番茄和潘那利番茄形態(tài)特征差異的重要的遺傳原因之一，因此，8期 李 紅等：利用CAPS標記轉(zhuǎn)育野生番茄的高產(chǎn)基因 1743圖4 番茄第1染色體末端長11.3 cM片段的分子遺傳圖譜Fig. 4 The molecular genetic map of the 11.3 cM fragme

31、nt from the bottom of chromosome1進一步對潘那利番茄和多毛番茄該染色體片段進行序列分析和遺傳研究，可探索番茄的進化過程。 3.2 關(guān)于控制果重的基因，前人的研究結(jié)果表明平均單果重以特殊配合力為主，占60.1%，而一般配合力占39.9%，果重的狹義遺傳力較小，受環(huán)境的影響較大，分別為17.65%24.9%和46.67%18。1999年Grandillo6和Tanksley12總結(jié)了自1982到1998對番茄果重QTL研究結(jié)果，根據(jù)分子圖譜上標出的果重QTL位置來看，已遍及番茄的全部12條染色體，其中通過至少兩個以上相互獨立的研究所確定的同一果重QTL已有28個，在

32、第1染色體上有3個。2000年在多毛番茄第1染色體末端長40 cM的染色體片段上CT70A和TG375之間也檢測到一個控制番茄平均果重的QTL5。在第1染色體末端的果重基因都存在一個普遍的特點，就是和可溶性固形物、果實顏色等重要的農(nóng)藝性狀緊密連鎖。例如余誕年根據(jù)對皮色、封頂性和橙色果肉與果重的關(guān)系的分析，指出果重基因分別與Y、y基因，Sp、sp基因和T、t基因連鎖18。已有的研究結(jié)果表明5，在多毛番茄第1染色體末端長24 cM的染色體片段上，在TG158和TG27之間存在影響單株總產(chǎn)量的QTL。但在本試驗中未檢測出該QTL，其原因有：（1）未利用在該染色體片段上飽和的分子標記；但本試驗只利用了

33、5個CAPS標記，這對該染色體片段上控制產(chǎn)量的QTL進行精細定位是不夠的；（2）由于產(chǎn)量性狀受環(huán)境影響較大，而現(xiàn)有的BC1世代較低，受外因影響更大，若能將其延續(xù)到BC2，BC3代，將會增加QTL定位的精確度。 3.3 試驗得到的16份高產(chǎn)QTL材料，除產(chǎn)量較高外，其長勢、葉重、莖重等指標都顯著高于對照，可應(yīng)用于番茄育種和分布于該染色體片段上的基因或QTL的克隆中。特別是近等基因系26154和26165的外源染色體片段比較短，這兩份材料對減少連鎖累贅，建立完全以普通材料作為遺傳背景的亞近等基因系，控制番茄產(chǎn)量平均重QTL進行更進一步的定位將有更為重要的作用。3.4 下一步的工作將建立該染色體片段

34、更為飽和的擴增片段長度多態(tài)性（amplified fragment length polymorphism，AFLP）、隨機擴增多態(tài)性DNA（random1744 中 國 農(nóng) 業(yè) 科 學 40卷amplified polymorphic DNA，RAPD）等分子標記。對16份材料建立高代回交QTL分析（advanced backcross-QTL analysis，AB-QTL）分析策略6,12，在對果重QTL進行分析的同時，減少連鎖累贅，得到超高產(chǎn)量的番茄新種質(zhì)，更好地指導番茄育種實踐。Lopez J, Beck-Bunn T. Advanced backcross QTL analysis

35、 in cross between an elite processing line of tomato and its wild relative L. pimpinellifolium. Theoretical Genetics, 1996, 92: 213-224.7 Fulton T M, Grandillo S, beck-Bunn T, Fridman E, Frampton A,Lopez J, Petiard V, Uhlig J, Zamir D, Tanksley S D. Advanced backcross QTL analysis of a Lycopersicon

36、esculentem ×Lycopersicon parviflorum cross. Theoretical and Appllied Genetics, 2000, 100: 1025-1042.8 Chen F Q, Foolad M R, Hyman J, St. Clair D A, Beelman R B.Mapping of QTLs for lycopene and other fruit traits in a Lycopersicon esculentum× L. pimpinellifolium cross and comparison of QTLs

37、 across tomato species. Molecular Breeding, 1999, 5: 283-299. 9 余誕年. 番茄基因的分子標記與遺傳作圖. 園藝學報, 1998, 25(4),361-366.Yu D N. The molecular markers and genetic mapping in tomato. Acta Horticulturae Sinica, 1998, 25(4): 361-366. (in Chinese)10 王 雷, 王 鳴, 石 英, 田淑萍, 余慶輝. 加工番茄主要數(shù)量性狀遺傳相關(guān)的研究. 西北農(nóng)業(yè)學報, 1998, 7(1):

38、32-37.Wang L, Wang M, Shi Y, Tian S P, Yu Q H. Genetic and correlation studues on quantitative characters in processing tomato. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 1998, 7(1): 32-37. (in Chinese)11 Monforte A J, Friedman E, Zamir D, Tanksley S D. Comparison of aset allelic QTL-NILs for ch

39、romosome 4 of tomato: Deductions about natural variation and implications for germplasm utilization. Theoretical and Appllied Genetics, 2001, 102: 572-590.12 Tanksley S D, Nelson J C. Advanced backcross QTL analysis:amethod for the simultaneous discovery and transfer of valuable QTLs from unadapted

40、germplasm into elite breeding lines. Theoretical and Applied Genetics, 1996, 92: 191-203.13 Grandillo S, Tanksley S D. QTL analysis of horticultural traitsdifferentiating the cultivated tomato from the closely related species Lycopersicon pimepinefollium. Theoretical and Appllied Genetics, 1996, 92:

41、 935-951.14 余誕年. 番茄果重QTL-fw2.2研究進展及其遺傳學和育種學意義.見: 中國蔬菜遺傳育種學術(shù)討論會論文集, 2002: 158-163.Yu D N. The development of the QTL- fw2.2 affecting fruit weight. In: Dissertation for the Conference of the Vegetable Breeding in China, 2002: 158-163. (in Chinese)15 Anne Frary, Clitent Nesbitt T, Amy Frary, Silvana G

42、randillo, Knapp E,Cong B, Liu J, Muller J, Elber R, Alpert K B, Tanksley S D. fw-2.2. A quantitative trait locus key to the evolution of tomato fruit size. Science, 2000, 289: 85-88.4 結(jié)論將潘那利番茄第1染色體末端的5個RFLP標記TG17、TG53、TG158、TG476和TG580轉(zhuǎn)化為CAPS標記。該結(jié)果對于提高番茄遺傳圖譜中的分子標記利用率，提高分子標記輔助選擇效率和降低分析成本有重要意義。檢測到了控制番

43、茄成熟果實重量的QTL，并定位于TG53和TG158之間，QTL的效應(yīng)為正效應(yīng)。研究還獲得了16株含高產(chǎn)番茄新種質(zhì)，拓寬了番茄產(chǎn)量育種的資源。References1 陳世儒主編. 蔬菜育種學(第二版). 重慶: 西南農(nóng)業(yè)大學出版社,1993.Che S R. Vegetable Breeding. Chongqing: Southwest Agriculture University Press. 1993. (in Chinese)2 梅德圣, 李云昌, 王漢中. 作物產(chǎn)量性狀QTL定位的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景. 中國農(nóng)學通報, 2003, 19(5): 83-88.Mei D S, Li Y

44、C, Wang H Z . The present situation and prospects of mapping QTL controlling yield traits in crops. Chinese Agriculture Science Bulletin, 2003, 19(5): 83-88. (in Chinese)3 王孝宣. 增強番茄果實顏色基因的精細定位及相關(guān)基因的差異表達. 中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所博士論文, 2004.Wang X X. The fine mapping of genes increasing fruit color and differential expression of genes related to fruit color in tomato. Dissertation for Ph.D of Ch