實時熒光定量PCR儀大型儀器設(shè)備購置論證報告

1、弋姬影ZHEJIANG NORMAL UNIVERSITY大型儀器設(shè)備購置論證報告儀器設(shè)備名稱實時熒光定量 PCR儀目名稱生態(tài)環(huán)境科技平臺目負責人陳建榮表日期2017年4月12日實驗室管理處制填表說明1單價 10 萬元及以上儀器設(shè)備的申購均需填寫此表， 并與申購計劃一起上報有關(guān)部門。2所在學院（部門）組織 37 人單數(shù)技術(shù)專家進行論證，并通知項目經(jīng)費管理、設(shè)備管理等部門參加論證。 申請單一來源采購的需 3 人以上單數(shù)非本校專家參加論證； 未列入全省統(tǒng)一論證進口 產(chǎn)品范圍的進口產(chǎn)品需 5 人以上單數(shù)非本校專家參加論證。3論證會由專家組組長主持，主要程序為：申購人報告、現(xiàn)場考察、專家質(zhì)詢與討論、專

2、家組形成論證意見并簽名。4專家論證同意，經(jīng)學院（部門） 、項目經(jīng)費管理部門簽字并蓋章后，報本科教學部（實驗室管理處）網(wǎng)上公示一周無異議 后實施。5此表一式 1 份（如設(shè)備為進口設(shè)備，請?zhí)峤?2份）。設(shè)備名稱中文實時熒光定量PCR儀英文Real-Time PCR System規(guī)格型號LightCycler96（ 96 通量）申購數(shù)量1套現(xiàn)行單價人民幣37萬美元萬購置經(jīng)費 來源省重點高校建設(shè)運 行經(jīng)費運行經(jīng)費來源省重點高校建設(shè)運行經(jīng)費主要技術(shù)指 標與功能，是通過或熒光標記的特異性的探針，結(jié)合了核算擴增、雜交、和 實時檢測技術(shù)，對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程， 結(jié)合相應的軟件可以對基

3、因表達進行分析研究，對目的基因進行定 量的分析，進行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備咼效率、反應迅速、重復性好、靈敏度咼、特異 性強、結(jié)果清晰的特點。隨著和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價。它還可以被應用于分 子生物學、植物學、動物學和醫(yī)學等眾多學科。用房情況地點面積輔助設(shè)施配備是否 需改建落實 情況8 幢 30326 m2否已落實管理和使 用技術(shù)人 員配備姓名職稱專管 或兼管是否 使用過熟練 程度是否 需培訓孫洪杰講師專管是熟練否洪華嫦副教授監(jiān)管是熟練否，是通

4、過或熒光標記的特異性的探針，結(jié)合了核算擴增、雜交、和 實時檢測技術(shù)，對PCF產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程, 結(jié)合相應的軟件可以對基因表達進行分析研究，對目的基因進行定主要用途和適用學科范圍量的分析，進行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備高效率、反應迅速、重復性好、靈敏度高、特異 性強、結(jié)果清晰的特點。隨著和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價。它還可以被應用于分 子生物學、植物學、動物學和醫(yī)學等眾多學科。實時熒光定量PCR是分子生物學的常規(guī)檢測手段，對于環(huán)境

5、科 學與工程專業(yè)而言，通過熒光定量 PCR基本實驗技術(shù)教學能夠使學生了解如何檢測環(huán)境污染物的毒性效應，如何對環(huán)境工程治污效果 進行健康風險安全評估，能夠讓學生更好的了解環(huán)境科學與工程專 業(yè)的重要性，而且通過此實驗能夠激發(fā)學生對實驗的學習興趣，讓 學生既體會到環(huán)境健康風險評估的重要性，又能使學生認識到熒光購置必要性定量PCR基本實驗技術(shù)的重要性和實用性，使學生在獲得知識的同 時得到實驗技能的全面訓練，提升學生的專業(yè)知識技能。總之，熒光定量PCR作為一個新興檢測手段可以幫助我們從基 因水平上了解環(huán)境污染物的毒性效應，并準確建立環(huán)境污染物與其 引起的毒性效應之間的劑量效應關(guān)系，闡明環(huán)境污染物的致毒機

6、制。此外實時熒光定量PCR技術(shù)還可以廣泛應用于環(huán)境中細菌、病毒、 環(huán)境激素等污染物的檢測。除此之外，本儀器設(shè)備可用于醫(yī)學、農(nóng) 牧、生物相關(guān)。本校是否有 同類設(shè)備、數(shù)量及不能 共享的理由安裝場地滿 足條件（水、 電、氣等是 否齊全）、安 全保護措施 落實情況、 是否涉及放 射源物品和 劇毒品等危 險性材料經(jīng)前期調(diào)研，目前生化學院擁有 4臺該儀器，但該院的省重點實驗室和省重中之重學科等眾多科研團隊，對該儀器的依賴性強, 使用率高，現(xiàn)有的4臺儀器并不能滿足現(xiàn)有的預約使用。而且熒光 定量PCR在環(huán)境監(jiān)測、環(huán)境評估中的使用頻率越來越高，因此熒光 定量PCR對于環(huán)境科學與工程專業(yè)非常重要，而且了解熒光定量

7、PCR在環(huán)境中的應用對于環(huán)境科學與工程專業(yè)的本科生十分重要,為了更好的開展環(huán)境科學與工程學科的教學與科研，因此申請本學 院采購該設(shè)備。安裝場地滿足用電的安全需求，不涉及用水和用氣。不涉及放射源 物品和劇毒品等危險性材料。曰.量國內(nèi)外同類 設(shè)備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術(shù)指標、 特色、附件、 價格、售后 服務、應用 支持等的比 較實時熒光定量PCR具有準確性高、靈敏度高、操作簡單、檢測速 度快等優(yōu)點。目前，實時熒光定量 PCR在國內(nèi)已有生產(chǎn)，主要廠商 如的TL988型實時熒光定量PCR儀、杭州博日的FQD-48A等。但 是設(shè)備熒光讀取率低，靈敏度較差，測量過程和數(shù)據(jù)后處理過程相 對復雜。相比而言

8、，進口的定量 PCR，具有靈敏度高、加熱速度快、 檢測過程無需Rox熒光染料校正，無需定期校正光路等優(yōu)點。由于目前國產(chǎn)設(shè)備的靈敏性差，測量過程和數(shù)據(jù)后處理過程相對 復雜，因此申請采購進口設(shè)備?，F(xiàn)在主流的國外進口熒光定量PCR儀主要有ABI公司的7500,美國伯樂公司Bio-Rad CFX96 touch，羅 氏公司的Roche LightCycler96等三種不同品牌。通過前期調(diào)研發(fā)現(xiàn)， ABI7500的加熱模塊具有邊緣效應，只有中央的孔位效果溫度具有 一致性，96孔板中僅中間的48個孔位能夠保證溫度的一致性。此外， 此儀器在硬件設(shè)計上存在缺陷，需要額外的 ROX染料進行校正，并 且占用了一個

9、檢測通道，國內(nèi)的試劑廠商都不加ROX染料，所以其檢測的準確性和重復性還是很難保證的，尤其是在較低的模板進行 檢測時效果不佳，偏差會更大。伯樂的CFX96 touch儀器在硬件設(shè)計上也存在問題，致使同樣的 反應體系在該儀器進行實驗時，陽性樣本的擴增曲線熒光增量比較 低，檢測效果不好。該儀器在國內(nèi)的使用率較低，而且伯樂的熒光 定量PCR在國際上仍屬于低端產(chǎn)品，返修率太高。而羅氏熒光定量PCR Roche-LightCycler 96基于其獨特的專利技術(shù)， 具有獨特的Therma-BasM技術(shù)提升導熱效率，能夠提高孔位溫度均 一性，而且其散熱塊為銀質(zhì)材料，能夠快速降溫。此外產(chǎn)品檢測靈 敏、反應速度迅

10、速、檢測結(jié)果準確可靠等特點，與其他國際品牌相 比，具有其他品牌無可比擬的優(yōu)勢，因此申請單一來源采購。國內(nèi)外同類 設(shè)備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術(shù)指標、 特色、附件、 價格、售后 服務、應用 支持等的比 較儀器名稱Roche-LightCycler 96ABI 7500fastBio-Rad CFX96 touch反應時間（40個循環(huán)）標準模式：40分鐘96孔常規(guī)檢測約120分鐘；使用Fast模塊的20卩1反應體積約35分 鐘90分鐘，快速模式 30分 鐘激發(fā)光源高強度白色固態(tài)光源（白光 LED）鹵鎢燈6個單色LED光源壽命10000? 小時以上2000?小時10000?小時以上光源預熱無需半小

11、時無需光路設(shè)計？固定光路，192根獨立光 纖導光，所有樣本同時檢 測，避免邊緣效應固定光路，但由于 鹵鎢燈為不穩(wěn)定光 源，需要定期校正 熒光背景移動光路，逐孔移動式采 光，正面開蓋設(shè)計，需時常 校正定期校正 光路無需需要，半年一次需要，一年一次ROX校正無需需要無需溫控模塊材質(zhì)銀質(zhì)模塊銅鋁合金銅鋁合金溫度均一性？士。C士°C, STD < C士。C熔解曲線溫度分辨率°C°C無此參數(shù)梯度PCR功能有不支持有HRM支持不支持宣稱支持（但發(fā)售4年文獻 不到30篇）使用效益預 測及風險分 析開放共享實 施方案和是 否同意納入 學校共享平 臺本熒光定量PCR可以實施開放共享，收費標準為：元/孔/次。該熒光定量PCR除可供環(huán)境科學與工程系的老師、研究生及本 科生使用外，還可以給其他學院及其他單位的研究人員提供檢測服 務，創(chuàng)造部分經(jīng)濟效益。項目負責人簽字：陳建榮熒光定量PCR作為一個新興檢測手段可以幫助我們從基因水平上了 解環(huán)境污染物的毒性效應，并準確建立環(huán)境污染物與其引起的毒性 效應之間的劑量效應關(guān)系，闡明環(huán)境污染物的致毒機制。此外實時 熒光定量PCR技術(shù)還可以廣泛應用于環(huán)境中細菌、病毒、環(huán)境激素 等污染物的檢測。除此之外，本儀器設(shè)備可用于醫(yī)學、農(nóng)牧、生物 相關(guān)分子生物學定量研究。證.、八丿意、見組長簽字：鐘依均2017年7月2