實時熒光定量PCR儀大型儀器設備購置論證報告

1、弋姬影ZHEJIANG NORMAL UNIVERSITY大型儀器設備購置論證報告儀器設備名稱實時熒光定量 PCR儀目名稱生態(tài)環(huán)境科技平臺目負責人陳建榮表日期2017年4月12日實驗室管理處制填表說明1單價 10 萬元及以上儀器設備的申購均需填寫此表， 并與申購計劃一起上報有關部門。2所在學院（部門）組織 37 人單數技術專家進行論證，并通知項目經費管理、設備管理等部門參加論證。 申請單一來源采購的需 3 人以上單數非本校專家參加論證； 未列入全省統一論證進口 產品范圍的進口產品需 5 人以上單數非本校專家參加論證。3論證會由專家組組長主持，主要程序為：申購人報告、現場考察、專家質詢與討論、專

2、家組形成論證意見并簽名。4專家論證同意，經學院（部門） 、項目經費管理部門簽字并蓋章后，報本科教學部（實驗室管理處）網上公示一周無異議 后實施。5此表一式 1 份（如設備為進口設備，請?zhí)峤?2份）。設備名稱中文實時熒光定量PCR儀英文Real-Time PCR System規(guī)格型號LightCycler96（ 96 通量）申購數量1套現行單價人民幣37萬美元萬購置經費 來源省重點高校建設運 行經費運行經費來源省重點高校建設運行經費主要技術指 標與功能，是通過或熒光標記的特異性的探針，結合了核算擴增、雜交、和 實時檢測技術，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程， 結合相應的軟件可以對基

3、因表達進行分析研究，對目的基因進行定 量的分析，進行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備咼效率、反應迅速、重復性好、靈敏度咼、特異 性強、結果清晰的特點。隨著和熒光探針定量技術的結合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價。它還可以被應用于分 子生物學、植物學、動物學和醫(yī)學等眾多學科。用房情況地點面積輔助設施配備是否 需改建落實 情況8 幢 30326 m2否已落實管理和使 用技術人 員配備姓名職稱專管 或兼管是否 使用過熟練 程度是否 需培訓孫洪杰講師專管是熟練否洪華嫦副教授監(jiān)管是熟練否，是通

4、過或熒光標記的特異性的探針，結合了核算擴增、雜交、和 實時檢測技術，對PCF產物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程, 結合相應的軟件可以對基因表達進行分析研究，對目的基因進行定主要用途和適用學科范圍量的分析，進行SNP單核苷酸多態(tài)性和突變位點的分析檢測。熒光 定量PCR極大地簡化了定量檢測的過程，而且做到了真正的絕對定 量分析。并且具備高效率、反應迅速、重復性好、靈敏度高、特異 性強、結果清晰的特點。隨著和熒光探針定量技術的結合，熒光定 量PCR被廣泛用于環(huán)境監(jiān)測及環(huán)境健康評價。它還可以被應用于分 子生物學、植物學、動物學和醫(yī)學等眾多學科。實時熒光定量PCR是分子生物學的常規(guī)檢測手段，對于環(huán)境

5、科 學與工程專業(yè)而言，通過熒光定量 PCR基本實驗技術教學能夠使學生了解如何檢測環(huán)境污染物的毒性效應，如何對環(huán)境工程治污效果 進行健康風險安全評估，能夠讓學生更好的了解環(huán)境科學與工程專 業(yè)的重要性，而且通過此實驗能夠激發(fā)學生對實驗的學習興趣，讓 學生既體會到環(huán)境健康風險評估的重要性，又能使學生認識到熒光購置必要性定量PCR基本實驗技術的重要性和實用性，使學生在獲得知識的同 時得到實驗技能的全面訓練，提升學生的專業(yè)知識技能。總之，熒光定量PCR作為一個新興檢測手段可以幫助我們從基 因水平上了解環(huán)境污染物的毒性效應，并準確建立環(huán)境污染物與其 引起的毒性效應之間的劑量效應關系，闡明環(huán)境污染物的致毒機

6、制。此外實時熒光定量PCR技術還可以廣泛應用于環(huán)境中細菌、病毒、 環(huán)境激素等污染物的檢測。除此之外，本儀器設備可用于醫(yī)學、農 牧、生物相關。本校是否有 同類設備、數量及不能 共享的理由安裝場地滿 足條件（水、 電、氣等是 否齊全）、安 全保護措施 落實情況、 是否涉及放 射源物品和 劇毒品等危 險性材料經前期調研，目前生化學院擁有 4臺該儀器，但該院的省重點實驗室和省重中之重學科等眾多科研團隊，對該儀器的依賴性強, 使用率高，現有的4臺儀器并不能滿足現有的預約使用。而且熒光 定量PCR在環(huán)境監(jiān)測、環(huán)境評估中的使用頻率越來越高，因此熒光 定量PCR對于環(huán)境科學與工程專業(yè)非常重要，而且了解熒光定量

7、PCR在環(huán)境中的應用對于環(huán)境科學與工程專業(yè)的本科生十分重要,為了更好的開展環(huán)境科學與工程學科的教學與科研，因此申請本學 院采購該設備。安裝場地滿足用電的安全需求，不涉及用水和用氣。不涉及放射源 物品和劇毒品等危險性材料。曰.量國內外同類 設備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術指標、 特色、附件、 價格、售后 服務、應用 支持等的比 較實時熒光定量PCR具有準確性高、靈敏度高、操作簡單、檢測速 度快等優(yōu)點。目前，實時熒光定量 PCR在國內已有生產，主要廠商 如的TL988型實時熒光定量PCR儀、杭州博日的FQD-48A等。但 是設備熒光讀取率低，靈敏度較差，測量過程和數據后處理過程相 對復雜。相比而言

8、，進口的定量 PCR，具有靈敏度高、加熱速度快、 檢測過程無需Rox熒光染料校正，無需定期校正光路等優(yōu)點。由于目前國產設備的靈敏性差，測量過程和數據后處理過程相對 復雜，因此申請采購進口設備?，F在主流的國外進口熒光定量PCR儀主要有ABI公司的7500,美國伯樂公司Bio-Rad CFX96 touch，羅 氏公司的Roche LightCycler96等三種不同品牌。通過前期調研發(fā)現， ABI7500的加熱模塊具有邊緣效應，只有中央的孔位效果溫度具有 一致性，96孔板中僅中間的48個孔位能夠保證溫度的一致性。此外， 此儀器在硬件設計上存在缺陷，需要額外的 ROX染料進行校正，并 且占用了一個

9、檢測通道，國內的試劑廠商都不加ROX染料，所以其檢測的準確性和重復性還是很難保證的，尤其是在較低的模板進行 檢測時效果不佳，偏差會更大。伯樂的CFX96 touch儀器在硬件設計上也存在問題，致使同樣的 反應體系在該儀器進行實驗時，陽性樣本的擴增曲線熒光增量比較 低，檢測效果不好。該儀器在國內的使用率較低，而且伯樂的熒光 定量PCR在國際上仍屬于低端產品，返修率太高。而羅氏熒光定量PCR Roche-LightCycler 96基于其獨特的專利技術， 具有獨特的Therma-BasM技術提升導熱效率，能夠提高孔位溫度均 一性，而且其散熱塊為銀質材料，能夠快速降溫。此外產品檢測靈 敏、反應速度迅

10、速、檢測結果準確可靠等特點，與其他國際品牌相 比，具有其他品牌無可比擬的優(yōu)勢，因此申請單一來源采購。國內外同類 設備、品牌、 規(guī)格、性能、 技術指標、 特色、附件、 價格、售后 服務、應用 支持等的比 較儀器名稱Roche-LightCycler 96ABI 7500fastBio-Rad CFX96 touch反應時間（40個循環(huán)）標準模式：40分鐘96孔常規(guī)檢測約120分鐘；使用Fast模塊的20卩1反應體積約35分 鐘90分鐘，快速模式 30分 鐘激發(fā)光源高強度白色固態(tài)光源（白光 LED）鹵鎢燈6個單色LED光源壽命10000? 小時以上2000?小時10000?小時以上光源預熱無需半小

11、時無需光路設計？固定光路，192根獨立光 纖導光，所有樣本同時檢 測，避免邊緣效應固定光路，但由于 鹵鎢燈為不穩(wěn)定光 源，需要定期校正 熒光背景移動光路，逐孔移動式采 光，正面開蓋設計，需時常 校正定期校正 光路無需需要，半年一次需要，一年一次ROX校正無需需要無需溫控模塊材質銀質模塊銅鋁合金銅鋁合金溫度均一性？士。C士°C, STD < C士。C熔解曲線溫度分辨率°C°C無此參數梯度PCR功能有不支持有HRM支持不支持宣稱支持（但發(fā)售4年文獻 不到30篇）使用效益預 測及風險分 析開放共享實 施方案和是 否同意納入 學校共享平 臺本熒光定量PCR可以實施開放共享，收費標準為：元/孔/次。該熒光定量PCR除可供環(huán)境科學與工程系的老師、研究生及本 科生使用外，還可以給其他學院及其他單位的研究人員提供檢測服 務，創(chuàng)造部分經濟效益。項目負責人簽字：陳建榮熒光定量PCR作為一個新興檢測手段可以幫助我們從基因水平上了 解環(huán)境污染物的毒性效應，并準確建立環(huán)境污染物與其引起的毒性 效應之間的劑量效應關系，闡明環(huán)境污染物的致毒機制。此外實時 熒光定量PCR技術還可以廣泛應用于環(huán)境中細菌、病毒、環(huán)境激素 等污染物的檢測。除此之外，本儀器設備可用于醫(yī)學、農牧、生物 相關分子生物學定量研究。證.、八丿意、見組長簽字：鐘依均2017年7月2