2020-2021學(xué)年高中生物人教版選修3配套學(xué)案：專題一第一節(jié)　DNA重組技術(shù)的基本工具 Word版含解析

1、專題一基因工程趣 味 導(dǎo) 學(xué)當(dāng)人們的許多奇思妙想成為現(xiàn)實(shí)后，又有人想出了天方夜譚式的神話，能否讓水稻植株也能夠固定空氣中的氮？能否讓細(xì)菌也能夠吐出蠶絲？能否讓微生物也能夠生產(chǎn)出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物？想創(chuàng)造這些生物新品種，你認(rèn)為能實(shí)現(xiàn)嗎？專 題 概 述本專題包括了“dna重組技術(shù)的基本工具”“基因工程的基本操作程序”“基因工程的應(yīng)用”及“蛋白質(zhì)工程的崛起”，另外還在專題開始回顧了基因工程的誕生和發(fā)展歷程。教材首先講述了基因工程的概念、基本工具，在此基礎(chǔ)上又講述了基因工程的基本操作程序，讓我們對基因工程有了一個較完整的認(rèn)識?；蚬こ痰膽?yīng)用則主要從植物基因工程、動物基因工程和基因治療等幾個

2、方面進(jìn)行了闡述。這樣不僅可以使我們充分了解基因工程的最新進(jìn)展，更重要的是以此激發(fā)我們學(xué)習(xí)生物學(xué)的興趣，培養(yǎng)科學(xué)探索精神和奉獻(xiàn)精神。在本專題內(nèi)容中，dna重組技術(shù)的基本工具、基因工程的基本操作程序是近年高考中經(jīng)常涉及的重點(diǎn)內(nèi)容，也是難點(diǎn)。在這些知識中，往往考察用遺傳學(xué)的基本知識分析生物技術(shù)的原理的能力，并對一些社會焦點(diǎn)和熱點(diǎn)問題理解和分析能力，認(rèn)識科學(xué)技術(shù)的發(fā)展所帶來的雙重影響。學(xué) 法 指 導(dǎo)本專題內(nèi)容較為抽象，在學(xué)習(xí)時應(yīng)注意：1應(yīng)聯(lián)系前面已經(jīng)學(xué)過的dna的結(jié)構(gòu)和功能、半保留復(fù)制、中心法則、遺傳密碼等知識，有助于理解dna重組技術(shù)的基本工具、操作步驟及應(yīng)用。2需要認(rèn)真閱讀教材中的每個圖解，充分發(fā)

3、揮想象力，將抽象內(nèi)容具體化。專 題 重 點(diǎn)基因工程所需的三種基本工具；基因工程的基本操作程序四個步驟；基因工程在農(nóng)業(yè)和醫(yī)療等方面的應(yīng)用；蛋白質(zhì)工程的原理。專 題 難 點(diǎn)基因工程載體需要具備的條件；從基因文庫中獲取目的基因；利用pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因；基因治療；蛋白質(zhì)工程的原理。第一節(jié)dna重組技術(shù)的基本工具學(xué) 習(xí) 目 標(biāo)課 程 標(biāo) 準(zhǔn)1認(rèn)同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新。2簡述dna重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。(重、難點(diǎn))3簡述基因工程中載體需要具備的條件。(重點(diǎn))簡述基因工程的誕生?；A(chǔ)知識·雙基夯實(shí)一、基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計，并

4、通過_體外dna重組_和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在_dna分子_水平上進(jìn)行設(shè)計和施工的，因此又叫做_dna重組技術(shù)_。二、dna重組技術(shù)的基本工具1工具簡介(1)“分子手術(shù)刀”_限制性核酸內(nèi)切酶_(2)“分子縫合針”_dna連接酶_(3)“分子運(yùn)輸車”_基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體_2限制性核酸內(nèi)切酶(1)來源：主要是從_原核生物_中分離純化出來的。(2)功能：能夠識別雙鏈dna分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的_磷酸二酯鍵_斷開，因此具有_專一_性。大多數(shù)限制酶的識別序列由_6_個核苷

5、酸組成。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的dna片段末端通常有兩種形式：_黏性末端_和_平末端_。前者是限制酶在它識別序列的_中軸線兩側(cè)_將dna的兩條鏈切開產(chǎn)生的，后者是限制酶在它識別序列的_中軸線處_切開產(chǎn)生的。3dna連接酶(1)分類：根據(jù)酶的來源不同，可分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為_e·colidna連接酶_；另一類是從_t4噬菌體_中分離出來的，稱為t4dna連接酶。(2)兩種dna連接酶的比較：相同點(diǎn)：都縫合_磷酸二酯_鍵。區(qū)別：e·colidna連接酶只能將雙鏈dna片段互補(bǔ)的_黏性末端_之間連接起來，而不能將雙鏈dna片段_平末端_之間進(jìn)行連接；而t4dna

6、連接酶既可以“縫合”雙鏈dna片段互補(bǔ)的_黏性末端_，又可以“縫合”雙鏈dna片段的_平末端_。但連接平末端之間的效率_比較低_。4基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體(1)載體具備的條件：a._有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)_；b在宿主細(xì)胞中能保存下來并能大量復(fù)制；c._有特殊的標(biāo)記基因_。(2)基因工程中使用的載體有：_質(zhì)粒_、噬菌體的衍生物和_動植物病毒_等。其中最常用的是質(zhì)粒。它是一種裸露的、_結(jié)構(gòu)簡單_、_獨(dú)立于細(xì)菌擬核dna之外_，并具有_自我復(fù)制_能力的雙鏈環(huán)狀dna。思考1不同的限制酶具有不同的識別序列，說明限制酶具有什么特點(diǎn)？提示：專一性2作為運(yùn)載工具的載體，要求必須對受體細(xì)胞無害，為什么？提

7、示：載體如果對受體細(xì)胞有害，其一旦被導(dǎo)入受體細(xì)胞，就會影響受體細(xì)胞的生命活動，甚至破壞受體的生命活動?；顚W(xué)巧練_判斷題1基因工程的原理是基因重組，不過在這里這種變異是定向的。()2dna重組技術(shù)所需要的工具酶有限制酶、dna連接酶和載體。(×)分析：注意是“工具酶”，載體不是酶。3dna聚合酶也可以用作dna重組技術(shù)的工具。(×)分析：dna聚合酶的作用是將單個的脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上，即一個一個地往上“聚”，而dna連接酶連接的是dna片段，即一片一片地“連”。4限制酶在原來的原核細(xì)胞內(nèi)對細(xì)胞自身有害。(×)分析：限制酶切割外源dna，而使之失效，達(dá)到保

8、護(hù)自身細(xì)胞的目的。5dna連接酶可以連接目的基因與載體間的氫鍵，形成重組dna。(×)分析：dna連接酶連接的是磷酸二酯鍵，而不是氫鍵。6所有的dna連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。(×)分析：e·colidna連接酶只能連接黏性末端，而t4dna連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。7載體的種類有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒等，其中動植物病毒必須是dna病毒。 ()8dna連接酶能連接所有相同或互補(bǔ)的黏性末端，故該酶沒有專一性。(×)分析：任何酶都具有專一性。酶的專一性是指一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)，黏性末端相連接屬于一類合成反應(yīng)。

9、課內(nèi)探究·名師點(diǎn)津知識點(diǎn) 基因工程的概念重難拓展_1對基因工程的理解基因工程的別名基因拼接技術(shù)或dna重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對象基因操作水平dna分子水平基本過程剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物2基因工程得以實(shí)現(xiàn)的理論基礎(chǔ)所有生物的dna都是以4種脫氧核苷酸為基本單位，構(gòu)成獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)，這為不同種生物dna拼接成功提供物質(zhì)基礎(chǔ)。所有生物共用一套遺傳密碼子，為某生物的基因能夠在其他生物細(xì)胞內(nèi)正常指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成提供可能。知識貼士基因工程操作導(dǎo)致的基因重組與有性生殖中的基因重組的主要區(qū)別是：(1)有性生殖中的基因重組是隨機(jī)的，并且只能在同一物種間進(jìn)行；(2)基因工程可以在

10、不同物種間進(jìn)行重組，并且方向性強(qiáng)，可以定向地改變生物的性狀。典例評析_典例1下列對基因工程的理解，正確的是(c)它是一種按照人們的意愿，定向改造生物遺傳特性的工程對基因進(jìn)行人為刪減或增添某些堿基是體外進(jìn)行的人為的基因重組在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，利用相關(guān)的酶和原料合成dna主要技術(shù)為體外dna重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)在dna分子水平上進(jìn)行操作一旦成功，便可遺傳abcd解析：基因工程是對現(xiàn)有基因的剪切和重組，并沒有對基因進(jìn)行改造，也不是要合成新的dna。變式訓(xùn)練_1下列有關(guān)基因工程誕生的說法，不正確的是(d)a基因工程是在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和微生物學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的b工具酶和載體的發(fā)現(xiàn)使基因工程的實(shí)施成

11、為可能c遺傳密碼的破譯為基因的分離和合成提供了理論依據(jù)d基因工程必須在同物種間進(jìn)行解析：基因工程可在不同物種間進(jìn)行，它可打破生殖隔離的界限，定向改造生物的遺傳性狀。知識點(diǎn)基因工程的工具酶重難拓展_1限制性核酸內(nèi)切酶(1)來源：這類酶主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)種類：迄今已從近300種不同的微生物中分離出了約4 000種限制酶。(3)特點(diǎn)：主要切割外源dna，而對自身的dna不起作用，達(dá)到保護(hù)自身的目的；只能識別雙鏈dna分子中特定的核苷酸序列；只能在特定的部位進(jìn)行切割。(4)結(jié)果：形成黏性末端或平末端。(5)實(shí)質(zhì)：使特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。知識貼士若限制酶切割后形

12、成的是黏性末端，則形成的兩個黏性末端是反向重復(fù)序列。大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成，例如ecori、smai限制酶識別序列由6個核苷酸組成，也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成。2dna連接酶(1)分類(2)實(shí)質(zhì)：恢復(fù)被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。典例評析_典例2以下是幾種不同限制酶切割dna分子后形成的部分片段，下列有關(guān)敘述錯誤的是(a)a以上dna片段一定是由5種限制酶切割后產(chǎn)生的b若要把相應(yīng)片段連接起來，應(yīng)選用dna連接酶c上述兩個片段能進(jìn)行連接，其連接后形成的dna分子是d限制酶和dna連接酶作用的部位都是磷酸二酯鍵解析：和的黏性末端相同，可能是由同一

13、種限制酶切割產(chǎn)生的，也可能是由兩種限制酶切割產(chǎn)生的，a錯誤；dna連接酶可連接切割出來的dna片段，b正確；和片段可連接為，c正確；限制酶和dna連接酶作用的部位都是磷酸二酯鍵，d正確。變式訓(xùn)練_2已知某種限制酶在一線性dna分子上有3個酶切位點(diǎn)，如右圖中箭頭所指。如果該線性dna分子在3個酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的dna片段。現(xiàn)有多個上述線性dna分子，若在每個dna分子上至少有1個酶切位點(diǎn)被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性dna分子最多能產(chǎn)生長度不同的dna片段種類數(shù)是(c)a3b4c9d12解析：每一種限制酶切割dna后會留下特異性的黏性末

14、端或平末端，同時一次切割后，會把dna分割成兩個片段，且不同的限制酶切后的片段不一樣，如果將題圖中的三個切割位點(diǎn)自左至右依次標(biāo)為甲、乙、丙，只在甲處切，可產(chǎn)生兩個片段，即a和右邊的bcd段，如果只在乙處切，就有ab和cd段，如果只在丙處切，就有abc和d段，在甲、乙兩處同時切，就有a、b和cd段，在乙、丙處同時切，就有ab和c、d段，在甲、丙兩處同時切，就有a、bc、d段三種片段，在甲、乙、丙三處同時切，就有a、b、c、d四種片段。所以本題應(yīng)該選c。知識點(diǎn) “分子運(yùn)輸車”載體重難拓展_(1)作用：一是用它作為運(yùn)載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中去；二是利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量的復(fù)制

15、(稱為克隆)。(2)作為載體必須具備的條件：具有一個或多個限制酶切割位點(diǎn)，該切割位點(diǎn)必須位于載體本身必須的基因序列之外。能夠自我復(fù)制或整合到染色體dna上后隨染色體dna復(fù)制。帶有標(biāo)記基因，便于篩選。本身是安全的，不能對受體細(xì)胞產(chǎn)生危害。大小適中，便于操作。但實(shí)際上，天然載體一般不會同時具備上述條件，所以在基因工程中需要對載體進(jìn)行人工改造?，F(xiàn)在所用的質(zhì)粒幾乎都是人工改造的。典例評析_典例3質(zhì)粒是基因工程最常用的載體，它的主要特點(diǎn)是(c)能自主復(fù)制不能自主復(fù)制結(jié)構(gòu)很小是蛋白質(zhì)是環(huán)狀rna是環(huán)狀dna能“友好”地“借居”abcd解析：質(zhì)粒存在于細(xì)菌和酵母菌等生物中，是一種很小的環(huán)狀dna，上面有標(biāo)

16、記基因，便于在受體細(xì)胞中檢測。質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能隨受體細(xì)胞dna的復(fù)制而復(fù)制，能進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增和表達(dá)。變式訓(xùn)練_3質(zhì)粒是基因工程最常用的載體，下列關(guān)于質(zhì)粒的說法正確的是(c)a質(zhì)粒在宿主細(xì)胞內(nèi)都要整合到染色體dna上b質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌擬核dna之外的小型細(xì)胞器c基因工程操作中的質(zhì)粒一般都是經(jīng)過人工改造的d質(zhì)粒上堿基之間數(shù)量存在aguc解析：基因工程使用的載體需有一個至多個酶切位點(diǎn)，具有自我復(fù)制的能力，存在標(biāo)記基因，對受體細(xì)胞安全，且分子大小適合。而自然存在的質(zhì)粒dna分子并不完全具備上述條件，都要進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作。而質(zhì)粒進(jìn)入宿主細(xì)胞后不一定都要整合到染色體dna上，如宿主

17、細(xì)胞是細(xì)菌細(xì)胞則不需整合。質(zhì)粒是小型環(huán)狀雙鏈dna分子而不是細(xì)胞器，也不會有堿基u。指點(diǎn)迷津·撥云見日與遺傳有關(guān)的各種酶的比較名稱作用參與的生理過程與應(yīng)用作用位點(diǎn)(如下圖)dna連接酶連接兩個dna片段基因工程a限制性核酸內(nèi)切酶能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開adna聚合酶在脫氧核苷酸鏈上添加單個脫氧核苷酸dna的復(fù)制arna聚合酶在核糖核苷酸鏈上添加單個核糖核苷酸轉(zhuǎn)錄a解旋酶使堿基對間氫鍵斷裂形成脫氧核苷酸單鏈dna復(fù)制轉(zhuǎn)錄過程中的rna聚合酶已具有解旋酶活性，所以轉(zhuǎn)錄過程中不再使用解旋酶b逆轉(zhuǎn)錄酶以rna為模板合

18、成dna逆轉(zhuǎn)錄、基因工程a知識貼士dna連接酶和dna聚合酶的作用都是催化形成磷酸二酯鍵，而不是氫鍵，氫鍵是分子間的靜電吸引力，不需要通過酶的催化形成。dna連接酶只能在兩個dna片段間形成磷酸二酯鍵，而dna聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有dna片段上，且需要以一條dna鏈為模板。目前發(fā)現(xiàn)的dna連接酶不具有連接單鏈dna的能力。典例4如圖為dna分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制酶、dna聚合酶、dna連接酶、解旋酶作用的正確順序是(c)abcd解析：限制酶能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端，

19、因此符合；dna聚合酶用于dna分子的復(fù)制，能在單鏈上將一個個脫氧核苷酸連接起來，因此符合；dna連接酶能在具有相同堿基末端的兩個dna片段之間形成磷酸二酯鍵，因此符合；解旋酶能夠?qū)na分子的雙螺旋解開，因此符合。核心素養(yǎng)·技能培優(yōu)案 例目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pbr322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如下圖所示。(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于_篩選(鑒別)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞_。(2)pbr322分子中有單個ecor i限制酶作用位點(diǎn)，ecor i只能識別序列g(shù)aattc，并只能在g與a之間切割。若在某

20、目的基因的兩側(cè)各有1個ecor i的切點(diǎn)，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶ecor i切割后所形成的黏性末端：_(3)pbr322分子中另有單個的bamh i限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)bamh i處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶bgl處理得到的目的基因，通過dna連接酶作用恢復(fù)_磷酸二酯_鍵，成功獲得了重組質(zhì)粒，說明_兩種限制酶(bamh i和bgl)切割得到的黏性末端相同_。(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampr和tetr的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表

21、示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素_，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是_pbr322質(zhì)粒_。解析：(1)質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體的條件之一是要有抗性基因，以便于篩選(鑒別)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)同一限制酶切割dna分子產(chǎn)生的黏性末端相同，根據(jù)題意可知：該目的基因兩側(cè)被限制酶ecor切割后所形成的黏性末端為：目的基因gaattcgaattccttaagcttaag(3)dna連接酶催化兩個dna片段形成磷酸二酯鍵；而通過dna連接酶作用能將兩個dna分子片段連接，表明經(jīng)兩種限制酶(bamh i和bgl)切割得到的dna片段，

22、其黏性末端相同。(4)由題意知：由于與圖三空圈相對應(yīng)的大腸桿菌能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長，而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，故可推知與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素。由圖二、圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，而經(jīng)限制酶bamh i作用后，標(biāo)記基因tetr被破壞，而不能抗四環(huán)素，故多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是pbr322質(zhì)粒。探規(guī)尋律黏性末端或平末端是否由一種限制酶切割形成的判斷方法：判斷黏性末端或平末端是否由同一種限制酶切割形成的方法是：將黏性末端或平末端之一旋轉(zhuǎn)180°后，看它們是否是完全相同的結(jié)構(gòu)。是，則為相同限制酶切割形成；否，則為不同限制酶切割

23、形成。問題釋疑·探究升華p7思考與探究1限制酶在dna的任何部位都能將dna切開嗎？以下是四種不同限制酶切割形成的dna片段：你是否能用dna連接酶將它們連接起來？提示：_2_和_7_能連接形成acgt tgca；_4_和_8_能連接形成gaattc cttaag；_3_和_6_能連接形成gcgc cgcg；_1_和_5_能連接形成ctgcag gacgtc；2聯(lián)系你已有的知識，想一想，為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的dna?提示：迄今為止，基因工程中使用的限制酶絕大部分都是從細(xì)菌或霉菌中提取出來的，它們各自可以識別和切斷dna上特定的堿基序列。細(xì)菌中限制酶之所以不切斷自身dna，

24、是因?yàn)槲⑸镌陂L期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制，可以將外源入侵的dna降解掉。生物在長期演化過程中，含有某種限制酶的細(xì)胞，其dna分子中或者不具備這種限制酶的識別切割序列，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶，也不會使自身的dna被切斷，并且可以防止外源dna的入侵。3天然的dna分子可以直接用做基因工程載體嗎？為什么？提示：基因工程中作為載體使用的dna分子很多都是質(zhì)粒(plasmid)，即獨(dú)立于細(xì)菌擬核dna之外的一種可以自我復(fù)制、雙鏈閉環(huán)的裸露dna分子。是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程載體使用呢？其實(shí)不然，作為基因工

25、程使用的載體必須滿足以下條件。(1)載體dna必須有一個或多個限制酶的切割位點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上去。這些供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)，還必須是在質(zhì)粒本身需要的基因片段之外，這樣才不至于因目的基因的插入而失活。(2)載體dna必須具備自我復(fù)制的能力，或整合到受體染色體dna上隨染色體dna的復(fù)制而同步復(fù)制。(3)載體dna必須帶有標(biāo)記基因，以便重組后進(jìn)行重組質(zhì)粒的篩選。(4)載體dna必須是安全的，不會對受體細(xì)胞有害，或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去。(5)載體dna分子大小應(yīng)適合，以便提取和在體外進(jìn)行操作，太大就不便操作。實(shí)際上自然存在的質(zhì)粒dna分子并不完全具備上述條件，都要進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作。4網(wǎng)上查詢：dna連接酶有連接單鏈dna的本領(lǐng)嗎？提示：迄今為止，所發(fā)現(xiàn)的dna連接酶都不具有連接單鏈dna的能力，至于原因，現(xiàn)在還不清楚，也許將來會發(fā)現(xiàn)可以連接單鏈dna的酶。p4尋根問底1根據(jù)你所掌握的知識，你能推測出限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？提示：原核生物容易受到自然界外源dna的入侵，但是，生物在長期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制，以防止外來病原體的侵害。限制