檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器及其應(yīng)用

1、說 明 書 檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及環(huán)境激素檢測技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說是一種檢測痕量環(huán)境激素的分子印跡探測器，本發(fā)明還涉及所述的分子印跡探測器在檢測環(huán)境激素中的應(yīng)用。背景技術(shù)環(huán)境激素(Environmental hormone)是指人類在生產(chǎn)、生活過程中釋放到環(huán)境中的某些有毒化學(xué)物質(zhì)，它們與動物體內(nèi)的激素具有類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，發(fā)揮著類似激素的作用，它們進(jìn)入體內(nèi)，擾亂了激素的正常分泌,使動物的生理程序發(fā)生紊亂，導(dǎo)致生殖、免疫等功能發(fā)生障礙。目前環(huán)境激素已經(jīng)成為全球性的環(huán)境污染問題。目前已知的環(huán)境激素約有70種，廣泛存在于大氣、水、土壤等環(huán)境介質(zhì)中。在日常生活中

2、，含有環(huán)境激素的化合物比比皆是，如垃圾焚燒排出大量劇毒物質(zhì)二惡英、農(nóng)藥、林木保護劑、洗滌劑、化妝品、稀釋劑、塑料制品和食品中的某些添加劑、電磁波污染、汽車尾氣以及含有激素的保健藥品等等。如果環(huán)境激素不能得到及時、準(zhǔn)確地檢測，它們就可能進(jìn)入機體，并在體內(nèi)直接或間接影響正常的激素代謝，給人類健康帶來嚴(yán)重的危害。建立一種高靈敏度和特異性的快速篩檢環(huán)境激素的方法，便成為當(dāng)前該研究領(lǐng)域亟需解決的問題之一。目前已有的環(huán)境激素檢測或篩檢方法主要包括體內(nèi)試驗、體外試驗、生物標(biāo)志物檢測及儀器檢測方法等，但是這些檢測或篩檢方法存在不足：1.體內(nèi)試驗常采用子宮增重試驗和子宮鈣結(jié)合蛋白CaBP-9k mRNA表達(dá)檢測

3、和蛋白分析，該方法反應(yīng)敏感具有專一性，但是其成本高，靈敏度低，不適于大規(guī)模的快速篩檢；2.體外試驗主要有E-Screen法、受體競爭試驗等，試驗本身的特異性較差，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果；3.借助于HPLC或LC-MS聯(lián)用技術(shù)等大型精密儀器建立起來的環(huán)境激素儀器檢測方法，對環(huán)境激素的檢測雖說具有很高的靈敏度，但是該方法不能一次就鑒定出分析物的結(jié)構(gòu)，往往還需要用GC-MS確認(rèn)結(jié)構(gòu)，技術(shù)成本較高，傳統(tǒng)方法所需的時間一般都較長，有的甚至長達(dá)幾個小時，操作復(fù)雜，不能用于現(xiàn)場的快速檢測。4. 以上幾種方法對于環(huán)境激素的檢測和分析，一般都存在檢測靈敏度低、成本高、結(jié)果假陽性、檢測過程復(fù)雜、檢測單一、試劑用量大、

4、不適于現(xiàn)場快速檢測等缺點，因此不能滿足實際檢測的需要。申請?zhí)枮榈纳暾埼募剂艘环N分子印跡膜基片，用于痕量環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，使用了納米金、碳納米管或納米鉑，成本較高。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供了一種試劑用量少、檢測速度快、靈敏度高，并且能夠高通量檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器。本發(fā)明還提供了檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器在檢測環(huán)境激素中的應(yīng)用。本發(fā)明是通過以下方式實現(xiàn)的。一種檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征在于采用以下步驟制成：（1）選擇功能單體，所述功能單體能與環(huán)境激素合成分子印跡聚合物；（2）選用環(huán)境激素分子作為模板分子，按一定摩爾比將模板分子、功能

5、單體、交聯(lián)劑、致孔劑、引發(fā)劑和有機溶劑混合均勻制成分子印跡聚合物；（3）將介孔碳制備成介孔碳溶液；（4）利用層層修飾技術(shù)，將介孔碳溶液和分子印跡聚合物修飾到玻璃片表面；（5）將介孔碳和分子印跡聚合物修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存數(shù)小時后，得到檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：所述功能單體為丙烯酸、甲基丙烯酸或4-乙烯基吡啶；所述交聯(lián)劑為三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N、N-亞甲基二丙烯酰胺、3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯或季戊四醇三丙烯酸酯；所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈；所述致孔劑采用二氯甲烷、氯

6、仿、乙腈、甲醇、異丙醇、四氯化碳、雜環(huán)化合物酰胺或砜類（N，N-二甲基酰胺或二甲基亞砜）；所述有機溶劑為二氯甲烷或四氯化碳。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：所述模板分子、功能單體、交聯(lián)劑、致孔劑、引發(fā)劑和有機溶劑的摩爾比為0.2210.4535600.100.203.030。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：所述將介孔碳溶液和分子印跡聚合物修飾到玻璃片表面，包括以下步驟：（a）將所用玻璃片用 NaOH溶液清洗，然后用二次蒸水清洗，干燥；（b）向步驟（a）中處理過的玻璃片上滴加介孔碳溶液并晾干；（c）向步驟（b）中晾干的玻璃片上滴加分子印跡聚合物

7、，干燥，用洗脫劑洗脫，將此層中的模板分子洗掉，干燥；（d）重復(fù)步驟（b）至步驟（c）過程3-6次，制得所述介孔碳和分子印跡聚合物修飾的玻璃片。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：所述洗脫劑為甲醇和乙酸混合物。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：所述介孔碳為CMK-3介孔碳或CMK-5介孔碳。所述檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征還在于：將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時。一種上述任一項所述的檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器在檢測環(huán)境激素中的應(yīng)用，其特征在于采用以下步驟：將按上述任意一種方法制得的檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳

8、分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品中的環(huán)境激素進(jìn)行檢測。被測樣品中的環(huán)境激素被特異性吸附到分子印跡聚合物上，與化學(xué)發(fā)光試劑反應(yīng)，產(chǎn)生能量，發(fā)光試劑吸收產(chǎn)生的能量躍遷到激發(fā)態(tài)。從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時，能量以化學(xué)發(fā)光的形式釋放出來，被微孔板多功能分析儀檢測到并記錄。本發(fā)明的有益效果：1. 環(huán)境激素介孔碳分子印跡探測器，將介孔碳材料增效作用引入到探測器的制備當(dāng)中，使得所制備的環(huán)境激素分子印跡探測器具有更高的選擇性和靈敏度。2. 將表面層層修飾技術(shù)應(yīng)用到分子印跡探測器的制備當(dāng)中，使得介孔碳增效的環(huán)境激素分子印跡探測器的制備具有可

9、控性，提高了探測器的靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性。3. 本發(fā)明所得到的介孔碳分子印跡探測器，可以實現(xiàn)樣本中環(huán)境激素的高特異性、高靈敏度、高通量快速檢測。4. 本發(fā)明的介孔碳分子印跡探測器的特異性強，樣品中其它非特異性分子對檢測結(jié)果無影響；靈敏度高，可以達(dá)到納克級；檢測速度快，完成一個基本檢測過程僅需1-2分鐘的時間，可在短時間內(nèi)實現(xiàn)大量樣本的高通量篩選，試劑用量少，檢測一個樣品只需要幾十微升試劑。5. 微孔板可重復(fù)使用。當(dāng)探測器達(dá)到使用壽命，只需更換置于探測器微孔板中的介孔碳和分子印跡聚合物修飾的玻璃片，便可構(gòu)成新的分子印跡探測器。方法簡單，大大節(jié)省了檢測成本，減少了聚四氟乙烯的污染，使得檢測綠色化

10、。具體實施方式 實施例1（二惡英類，如二惡英、TCDD）一種檢測痕量二惡英的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與二惡英合成分子印跡聚合物的功能單體丙烯酸；（2）向介孔碳 CMK-3中加入5mL四氫呋喃，超聲處理20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子二惡英，功能單體丙烯酸，交聯(lián)劑三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯，致孔劑二氯甲烷，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比0.2：1：0.4：35：0.1：3混合均勻，得到二惡英分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片，將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向

11、玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加二惡英分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子二惡英分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加二惡英分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子二惡英分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功二惡英介孔碳分子印跡探測器。將制得的二惡英

12、介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的二惡英進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表1。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通二惡英分子印跡微孔板，對樣品中的二惡英分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表1。表1本發(fā)明二惡英介孔碳分子印跡探測器與普通二惡英分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)二惡英是0.510-121.510-110.410-12否4.710-113.810-101.510-11從表1中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的二惡

13、英分子印跡探測器比普通二惡英分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。一種檢測痕量TCDD的介孔碳分子印跡探測器，制備方法同上述二惡英的介孔碳分子印跡探測器制備方法，將制得的TCDD介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的TCDD進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表2。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通TCDD分子印跡微孔板，對樣品中的TCDD分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表2表2本發(fā)明TCDD介孔碳分子印跡探測器與普通TCDD分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是

14、否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)TCDD是0.210-122.310-110.110-12否0.410-103.810-101.510-11從表2中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的TCDD分子印跡探測器比普通TCDD分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。實施例2（殺蟲劑類，如敵百蟲，溴氰菊酯，DDT）一種檢測痕量敵百蟲的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與敵百蟲合成分子印跡聚合物的功能單體甲基丙烯酸（MAA）；（2）向介孔碳CMK-3中加入5mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子

15、敵百蟲，功能單體甲基丙烯酸（MAA），交聯(lián)劑N、N-亞甲基二丙烯酰胺，致孔劑氯仿，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑四氯化碳按摩爾比1402混合均勻，得到敵百蟲分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加敵百蟲分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子敵百蟲分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上

16、滴加敵百蟲分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子敵百蟲分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功敵百蟲介孔碳分子印跡探測器。將制得的敵百蟲介孔碳分子印跡化學(xué)發(fā)光探測器連接到微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的敵百蟲進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表3。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通敵百蟲分子印跡微孔板，對樣品中的敵百蟲分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果

17、見表3。表3 本發(fā)明敵百蟲介孔碳分子印跡探測器與普通敵百蟲分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)敵百蟲是0.110-113.010-110.410-12否0.510-102.310-100.210-10本發(fā)明的探測器制備方法與其它方法相比，具有更好的選擇性，更高的靈敏度，并且檢測速度大大提高，且可以高通量檢測。從表3中結(jié)果可以看出：介孔碳材料修飾的敵百蟲分子印跡探測器比普通敵百蟲分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。一種檢測痕量溴氰菊酯的介孔碳分子印跡探測器，制備方法同上述敵百蟲的介孔碳分子印跡探測

18、器制備方法，將制得的溴氰菊酯介孔碳分子印跡化學(xué)發(fā)光探測器連接到微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的溴氰菊酯進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表4。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通溴氰菊酯分子印跡微孔板，對樣品中的溴氰菊酯分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表4。表4 本發(fā)明溴氰菊酯介孔碳分子印跡探測器與普通溴氰菊酯分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)溴氰菊酯是0.110-122.310-110.110-12否0.410-103.810-101

19、.510-11從表4中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的溴氰菊酯分子印跡探測器比普通溴氰菊酯分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。一種檢測痕量DDT的介孔碳分子印跡化學(xué)發(fā)光探測器，制備方法同上述的敵百蟲介孔碳分子印跡探測器制備方法，將制得的DDT分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的DDT進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表5。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通DDT分子印跡微孔板，對樣品中的DDT分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表5。表5 本發(fā)明DDT介孔碳分子印跡探測器

20、與普通DDT分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)DDT是0.110-122.310-110.110-12否0.410-101.810-101.510-11從表5中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的DDT分子印跡探測器比普通DDT分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。實施例3（除草劑類，如阿特拉津、多氯聯(lián)苯、2, 4-D）一種檢測痕量阿特拉津的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與阿特拉津合成分子印跡聚合物的功能單體4-乙烯基吡啶；（2）向介孔碳CMK-5中加入5mL四氫呋喃，超聲20

21、min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子阿特拉津，功能單體4-乙烯基吡啶（4-VP），交聯(lián)劑3, 5-二（丙烯酰胺）苯甲酸，致孔劑異丙醇，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比215600.230混合均勻，得到阿特拉津分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加阿特拉津分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子阿特拉津分子完全洗掉，在室溫下干燥10

22、min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加阿特拉分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子阿特拉津分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功阿特拉津介孔碳分子印跡探測器。將制得的阿特拉津介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的阿特拉津進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表6。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔

23、碳溶液，制備普通阿特拉津分子印跡微孔板，對樣品中的阿特拉津分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表6。表6 本發(fā)明阿特拉津介孔碳分子印跡探測器與普通阿特拉津分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)阿特拉津是0.210-113.710-111.810-12否0.710-105.010-100.2510-10本發(fā)明探測器制備方法與其它方法相比，具有更好的選擇性，更高的靈敏度，并且檢測速度大大提高，且可以高通量檢測。從表6中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的阿特拉津分子印跡探測器比普通阿特拉津分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢

24、測限。一種檢測痕量多氯聯(lián)苯的介孔碳分子印跡探測器，制備方法同上述阿特拉津的介孔碳分子印跡探測器制備方法，致孔劑選用二甲基亞砜代替異丙醇，將制得的多氯聯(lián)苯分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的多氯聯(lián)苯進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表7。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通多氯聯(lián)苯分子印跡微孔板，對樣品中的多氯聯(lián)苯分子進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表7。表7本發(fā)明多氯聯(lián)苯介孔碳分子印跡探測器與普通多氯聯(lián)苯分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mo

25、l/l)多氯聯(lián)苯是0.210-122.610-110.110-12否0.310-103.510-101.410-11從表7中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的多氯聯(lián)苯分子印跡探測器比普通多氯聯(lián)苯分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。一種檢測痕量2, 4-D的介孔碳分子印跡探測器，制備方法同上述阿特拉津的介孔碳分子印跡探測器制備方法，將制得的2, 4-D分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的2, 4-D進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表8。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備

26、普通2, 4-D分子印跡微孔板，對樣品中的2, 4-D分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表8。表8本發(fā)明2, 4-D介孔碳分子印跡探測器與普通2, 4-D分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)2, 4-D是0.210-122.610-110.110-12否0.310-103.510-101.410-11從表8中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的2, 4-D分子印跡探測器比普通2, 4-D分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。實施例4（林木保護劑，如成分五氯酚）一種檢測痕量五氯酚的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括

27、以下步驟：（1）選擇能與五氯酚合成分子印跡聚合物的功能單體甲基丙烯酸（MAA）；（2）向介孔碳CMK-5中加入5mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子五氯酚，功能單體甲基丙烯酸（MAA），交聯(lián)劑二乙烯基苯（DVB），致孔劑甲醇，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比1.5：1：4.5：50：0.15：25混合均勻，得到五氯酚分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加五氯酚分子印跡聚合物

28、，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子五氯酚分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加五氯酚分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子五氯酚分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功五氯酚介孔碳分子印跡探測器。將制得的五氯酚介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMn

29、O4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的五氯酚進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表9。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通五氯酚分子印跡微孔板，對樣品中的五氯酚分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表9。表9 本發(fā)明五氯酚介孔碳分子印跡探測器與普通五氯酚分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)五氯酚是0.410-114.210-112.310-12否0.510-104.610-100.3510-10從表9中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的五氯酚分子印跡探測器比普通五氯酚分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢

30、測限。實施例5（洗滌劑，如成分壬基苯酚） 一種檢測痕量壬基苯酚的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與壬基苯酚分子合成分子印跡聚合物的功能單體4-乙烯基吡啶（4-VP）；（2）向介孔碳CMK-5中加入5mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子壬基苯酚，功能單體4-乙烯基吡啶（4-VP），交聯(lián)劑季戊四醇三丙烯酸酯（PETRA），致孔劑四氯化碳，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑四氯化碳按摩爾比13250.120混合均勻，得到壬基苯酚分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗

31、數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加壬基苯酚分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子壬基苯酚分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加壬基苯酚分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子壬基苯酚分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功壬基苯酚介孔

32、碳分子印跡探測器。將制得的壬基苯酚介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的壬基苯酚進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表10。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通壬基苯酚分子印跡微孔板，對樣品中的壬基苯酚分子進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表10。表10 本發(fā)明壬基苯酚介孔碳分子印跡探測器與普通壬基苯酚分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)壬基苯酚是0.410-114.210-112.310-12否0.510-104.610-100.

33、3510-10從表10中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的壬基苯酚分子印跡探測器比普通壬基苯酚分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。實施例6（塑料制品，如成分雙酚A）一種檢測痕量雙酚A的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與雙酚A分子合成分子印跡聚合物的功能單體甲基丙烯酸（MAA）；（2）向 g介孔碳CMK-5中加入5mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子雙酚A，功能單體甲基丙烯酸（MAA），交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA），致孔劑N，N-二甲基酰胺，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比0.91450.1

34、10混合均勻，得到雙酚A分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加雙酚A分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子雙酚A分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加雙酚A分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子雙酚A分子完全

35、洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功雙酚A介孔碳分子印跡探測器。將制得的雙酚A介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的雙酚A進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表11。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通雙酚A分子印跡微孔板，對樣品中的雙酚A分子進(jìn)行實際檢測，檢測結(jié)果見表11。表11 本發(fā)明雙酚A介孔碳分子印跡探測器與普通雙酚A分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol

36、/l)最低檢測限(mol/l)雙酚A是0.210-115.210-111.310-12否0.410-103.610-100.3110-10從表11中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的雙酚A分子印跡探測器比普通雙酚A分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。實施例7（金屬類，如四乙基鉛、三丁基錫）一種檢測痕量四乙基鉛的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與四乙基鉛分子合成分子印跡聚合物的功能單體甲基丙烯酸（MAA）；（2）向介孔碳CMK-5中加入5mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子四乙基鉛，功能單體甲基丙烯酸（MAA），交

37、聯(lián)劑3, 5-二（丙烯酰胺）苯甲酸，致孔劑乙腈，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比0.910.8420.15混合均勻，得到四乙基鉛分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加四乙基鉛分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子四乙基鉛分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加四乙基

38、鉛分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子四乙基鉛分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功四乙基鉛介孔碳分子印跡探測器。將制得的四乙基鉛介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的四乙基鉛進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表12。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通四乙基鉛分子印跡微孔板，對樣品中的四乙基鉛分子進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表12

39、。表12 本發(fā)明四乙基鉛介孔碳分子印跡探測器與普通四乙基鉛分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)四乙基鉛是10-1210-118.310-12否0.410-1010-100.3110-10從表12中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的四乙基鉛介孔碳分子印跡探測器比普通四乙基鉛分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。一種檢測痕量三丁基錫的介孔碳分子印跡探測器，制備方法同上述四乙基鉛的介孔碳分子印跡探測器制備方法，將制得的三丁基錫介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、

40、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的三丁基錫進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表13。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通三丁基錫分子印跡微孔板，對樣品中的三丁基錫分子進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表13。表13 本發(fā)明三丁基錫介孔碳分子印跡探測器與普通四乙基鉛分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)三丁基錫是10-1110-1010-12否10-1010-100.3110-10從表13中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的三丁基錫分子印跡探測器比普通三丁基錫分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限

41、。實施例8（化妝品激素類，如孕激素）一種檢測痕量孕激素的介孔碳分子印跡探測器，制備方法包括以下步驟：（1）選擇能與孕激素分子合成分子印跡聚合物的功能單體4-乙烯基吡啶（4-VP）；（2）向 g介孔碳CMK-5中加入5 mL四氫呋喃，超聲20 min，得到均勻分散的介孔碳溶液；（3）模板分子孕激素，功能單體4-乙烯基吡啶（4-VP），交聯(lián)劑N、N-亞甲基二丙烯酰胺，致孔劑異丙醇，引發(fā)劑偶氮二異丁腈，有機溶劑二氯甲烷按摩爾比1500.18混合均勻，得到孕激素分子印跡聚合物；（4）裁剪與微孔板底面大小相似的玻璃片。將玻璃片用 1 mol/L NaOH清洗，然后用二次蒸水徹底清洗數(shù)次，吹干；（5）向玻

42、璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min；再向玻璃片上滴加孕激素分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模板分子孕激素分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。再向玻璃片上滴加10 L介孔碳溶液，在室溫下干燥10 min，再向玻璃片上滴加孕激素分子印跡聚合物，室溫下干燥10分鐘。然后用甲醇和乙酸混合液洗脫玻璃片表面25分鐘，直至把這一層中的模版分子孕激素分子完全洗掉，在室溫下干燥10 min。如此循環(huán)，重復(fù)上述過程6次。（6）將修飾的玻璃片置于微孔板內(nèi)，用保鮮膜封存12小時，制備成功孕激素介孔碳分子印跡探測器。將制得的孕激素

43、介孔碳分子印跡探測器用于微孔板多功能分析儀，向探測器中加入化學(xué)發(fā)光試劑溶液HCl溶液、KMnO4溶液和聚山梨酯-80溶液，對環(huán)境樣品提取液中的孕激素進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表14。利用上述同樣方法，但玻璃片表面未修飾介孔碳溶液，制備普通孕激素分子印跡微孔板，對樣品中的孕激素分子進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表14。表14本發(fā)明孕激素介孔碳分子印跡探測器與普通孕激素分子印跡微孔板檢測效果對比模板分子是否介孔碳增效實際樣品檢測線性范圍(mol/l)最低檢測限(mol/l)孕激素是5.810-1210-103.910-12否1.110-1010-1010-10從表15中結(jié)果可以看出：介孔碳修飾的孕激素分子印跡探測器比普通孕激素分子印跡微孔板（未加介孔碳修飾）具有更寬的線性范圍和更低的檢測限。權(quán) 利 要 求 書1、一種檢測痕量環(huán)境激素的介孔碳分子印跡探測器，其特征在于采用以下步驟制成：（1）選擇功能單體，所述功能單體能與環(huán)境激素合成分子印跡聚合物；（2）選用環(huán)境激素分