Psammaplin A對人結(jié)腸腸癌LS174-T細(xì)胞增殖和凋亡影響的分析_論文網(wǎng)

1、Psammaplin A對人結(jié)腸腸癌LS174-T細(xì)胞增殖和凋亡影響的分析_論文網(wǎng)    論文網(wǎng)：                            作者：孟慶凱 張菁茹 吳佳陽  【摘要】  目的  探討

2、作用人結(jié)腸癌LS174-T細(xì)胞后，PTEN與p-Akt信號通路中，VEGF、MMP-9表達(dá)差異并探討其相互關(guān)系。方法  應(yīng)用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，采用MTT實驗測定Psammaplin A對LS174-T細(xì)胞增殖的影響；用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期；通過免疫印記法檢測Psammaplin A對LS174-T細(xì)胞中凋亡相關(guān)基因PTEN和p-Akt的影響；采用ELISA法檢測Psammaplin A干預(yù)前后LS174-T細(xì)胞的VEGF、MMP-9蛋白分泌水平的變化。結(jié)論  Psammaplin A能夠抑制大腸癌LS174-T細(xì)

3、胞的增殖，并且促進(jìn)其凋亡，其機制可能與上調(diào)PTEN的表達(dá)和抑制Akt的磷酸化有關(guān)，并通過調(diào)控VEGF、MMP-9的分泌實現(xiàn)LS174-T的增殖抑制及凋亡。 【關(guān)鍵詞】  Psammaplin A  LS174-T細(xì)胞  增殖和凋亡  PTEN  p-Akt         Psammaplin A是從海洋海綿體生物中發(fā)現(xiàn)和得到的一類酚類化合物，對多種腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用，是

4、一種嶄新的有望突破的抗腫瘤治療藥物(         2.3 Psammaplin A干預(yù)下LS174-T細(xì)胞中PTEN和p-Akt表達(dá)情況  結(jié)果顯示，10、50、200mol/L的Psammaplin A干預(yù)LS174-T細(xì)胞PTEN的表達(dá)量隨Psammaplin A干預(yù)濃度增加而增加，而p-Akt的表達(dá)量隨Psammaplin A干預(yù)濃度增加而明顯下降。PTEN的表達(dá)量與p-Akt的表達(dá)量呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。   &#

5、160;     2.4 Psammaplin A對細(xì)胞上清中VEGF、MMP-9的分泌量影響  結(jié)果分析可知，在Psammaplin A干預(yù)LS174-T細(xì)胞的上清液中，VEGF、MMP-9的分泌量隨著Psammaplin A的干預(yù)濃度增大而降低。且與對照組相比P<0.05，有顯著差異。         3  討論    

6、0;    Psammaplins化合物是一類從海洋海綿體生物中分離出來的酚類化合物，對多種腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用。對Psammaplin A的最新研究結(jié)果表明其作為一種低毒的天然藥物，可有效抑制皮膚癌、結(jié)腸癌、肺癌、肝癌等癌癥疾病，是一種潛在的腫瘤化學(xué)預(yù)防劑。然而Psammaplin A抗腫瘤效應(yīng)的分子基礎(chǔ)未完全闡明，因此探討Psammaplin A在抗腫瘤中的作用機制，對Psammaplin A在臨床上應(yīng)用于惡性腫瘤的防治有重要的意義。      &

7、#160;  大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，在我國發(fā)病率呈逐年遞增趨勢，國內(nèi)外經(jīng)過數(shù)十年的研究，對大腸癌發(fā)生、發(fā)展、生長、調(diào)控、侵襲和轉(zhuǎn)移等問題有了進(jìn)一步的認(rèn)識，其發(fā)生發(fā)展是涉及多因素、多步驟、多基因參與的病理過程，不僅有原癌基因的表達(dá)激活，而且與抑癌基因的調(diào)控有著密切的關(guān)系。抑癌基因PTEN具有雙特異性磷酸酶(DSP)活性，在酪氨酸磷酸酶和絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中具有重要的作用，可以通過磷酸化與去磷酸化的動態(tài)變化調(diào)節(jié)細(xì)胞的正常生長。Akt的持續(xù)活化與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，已被定義為癌基因?；罨腁kt通過磷酸化MDM2,P21,cyclinD2，F(xiàn)XHR

8、，TSC2,Foxo，bcl-2家族等多種作用底物，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長、增殖，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，促進(jìn)血管生成，抵抗化療和放療中細(xì)胞的凋亡。有文獻(xiàn)報道PTEN過度表達(dá)的細(xì)胞表現(xiàn)為Akt的磷酸化水平的顯著降低，PTEN可通過拮抗Akt通路促進(jìn)BAD和forkhead的活性及抑制NF-B的活性，最終誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。另外PTEN可能通過下調(diào)MMP-9的表達(dá)進(jìn)而抑制腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移，通過抑制VEGF表達(dá)來抑制細(xì)胞的細(xì)胞增殖。         本文研究發(fā)現(xiàn)，Psammaplin A可有效降低

9、人結(jié)腸癌LS174-T的存活率，并呈劑量依賴型。進(jìn)一步證明了Psammaplin A的抑癌作用。流式檢測結(jié)果表明Psammaplin A干預(yù)后S期的DNA合成明顯受到抑制，LS174-T細(xì)胞被阻抑在G0/G1。Western Blot檢測PTEN和p-Akt的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，PTEN和p-Akt的表達(dá)隨著Psammaplin A干預(yù)濃度的變化，存在一定的相關(guān)性。推測PTEN基因的表達(dá)可影響Akt的磷酸化?；罨蟮腁kt能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長、增殖，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，促進(jìn)血管生成，抵抗化療和放療中細(xì)胞的凋亡。ELISA實驗同時檢測到VEGF、

10、MMP-9隨著Psammaplin A的干預(yù)濃度增大而降低。VEGF的表達(dá)與腫瘤的分期和增殖關(guān)系密切，而VEGF 的表達(dá)與p-AKt有明顯的相關(guān)性。推測Psammaplin A干預(yù)LS174-T后，p-Akt 量增多抑制VEGF 的表達(dá)，推測可以約束VEGF 誘導(dǎo)的癌細(xì)胞遷移。p-AKT蛋白表達(dá)增加，可能激活MMP-9，使細(xì)胞發(fā)生癌變，并促進(jìn)癌變細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移。因此Psammaplin A抑癌的分子機制可能是由于Psammaplin A上調(diào)表達(dá)了PTEN，進(jìn)而影響胃癌細(xì)胞中p-AKt的量降低，進(jìn)一步抑制了AKt引

11、起胃癌細(xì)胞的增殖、運動、侵襲和轉(zhuǎn)移。         細(xì)胞增殖及凋亡的調(diào)控是細(xì)胞因子間相互作用、相互影響而形成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)，Psammaplin A抑制人胃癌細(xì)胞增殖及促進(jìn)其凋亡的作用，還可能通過多種因子多種途徑來實現(xiàn)。隨著研究的的不斷深入，相信Psammaplin A的多種抑瘤作用的分子機制將逐漸被闡明。 參 考 文 獻(xiàn)  1J emal A, Siegel R, Ward E, et al. Cancer statistics 2007. CA Cancer J Clin, 2007, 57:43266. 2Goswami A,Ranganathan P,Rangnekar VM.Th