乙型肝炎病毒血清前S1抗原的檢測(cè)及其臨床意義 (1)

1、乙型肝炎病毒血清前S1抗原的檢測(cè)及其臨床意義 (1)    【摘要】 目的 探討乙型肝炎病毒與前S1抗原的相關(guān)性。方法 采用ELISA檢測(cè)296例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原。結(jié)果 在55例HBeAg陽(yáng)性標(biāo)本中前S1抗原陽(yáng)性的47例,陽(yáng)性率85.4%;178例HBeAg陰性而抗HBeAb陽(yáng)性的標(biāo)本中前S1抗原陽(yáng)性的115例,陽(yáng)性率64.6.0%;63例HBeAg和抗HBe均陰性的血清中前S1抗原陽(yáng)性僅39例,陽(yáng)性率61.9%;前S1抗原在血清學(xué)表達(dá)上與HBeAg的陽(yáng)性符合率高達(dá)85.4%。結(jié)論 乙型肝炎病毒前S1抗原與HBeAg陽(yáng)性高度相關(guān),血清

2、前S1抗原是乙肝病毒在體內(nèi)復(fù)制的可靠標(biāo)志。 【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒;前S1抗原;ELISA Determination and Clinical Significance of PreS1Ag of Hepatitis B Virus YU Mei-hua. Maternity and clild care hospital of zibo,Shandong 255029,China 【Abstract】 Objective To discuss the recationship between PreS1 and hepatitis B virus.Methods The adoption

3、 ELISA determines the PreS1 296 cases of the patients of hepatitis B virus in fected in serum.Results 47 cases of PreS1 antigen positive were found in 55 cases,its preS1 positive rate was 84.4%,115 cases of 178 were positive.Its PreS1 positive rate was64.6，only 39 cases were found in serum of the pa

4、tiens that HBeAg and Antr HBe both were negative，The prescontigen match the rate with HBeAg on the serum learn to express high amount to 85.4.Conclusion PreSl Ag of HBV is highly recated to HBeAg.PreS1 is the recicabce marker of hepatitis B virus. 【Key words】 Hepatitis B Virtus；PreSl antigen；ELISA 據(jù)

5、估計(jì),全世界現(xiàn)有乙肝病毒攜帶者3.5億,其中我國(guó)有1.2億。乙型肝炎的流行不僅影響整個(gè)民族的健康素質(zhì),也給社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),已成為我國(guó)目前最為突出的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。目前診斷乙型肝炎最常用的指標(biāo)是檢測(cè)乙肝病毒(HBV)血清學(xué)標(biāo)志物(廣泛用于臨床的為兩對(duì)半)。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELIS)法檢測(cè)血清學(xué)標(biāo)志物只能反映人體對(duì)HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài),不能直接反映HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制情況,也不能作為判斷患者是否具有傳染性的直接證據(jù),而HBV-DNA含量是判斷病毒復(fù)制活躍和具有傳染性的直接和考證據(jù)但其對(duì)其試驗(yàn)室條件操作人員等的要求高,作為常規(guī)檢驗(yàn)有一定困難。乙型肝炎病毒前S1抗原、前S2抗原和HBs

6、Ag三者共同構(gòu)成乙型肝炎病毒外殼大蛋白。乙型肝炎病毒前S1抗原是乙型病毒肝炎的表面抗原(HbsAg)組成成分之一。有研究表明,前S1抗原的存在反映病毒活動(dòng)性復(fù)制和肝損害。前S1抗原抗體系統(tǒng)影響病情的發(fā)展和HBV感染的預(yù)后,與HBV復(fù)制關(guān)系密切。HBV血清免疫學(xué)標(biāo)志檢查是目前臨床分析乙肝患者病程和傳染性的重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)之一。本文采用ELIS法對(duì)HBV感染者血清進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)一步證實(shí)血清前S1抗原與乙型肝炎血清標(biāo)志物的存在關(guān)系。前S1抗原除具有增進(jìn)HbsAg免疫性的作用外,也有助于HBV吸附到肝細(xì)胞的作用。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELIS)具有快速、準(zhǔn)確、敏感性強(qiáng)的檢測(cè)手段,應(yīng)用此法對(duì)296例HBV血清五項(xiàng)

7、指標(biāo)(簡(jiǎn)稱乙肝五項(xiàng))陽(yáng)性者進(jìn)行前S1抗原檢測(cè),并分析比較,探討前S抗原與HBV五項(xiàng)標(biāo)志物之間的關(guān)系及檢測(cè)前S1抗原的意義。 1 材料與方法 1.1 標(biāo)本來(lái)源 隨機(jī)收集HbsAg陽(yáng)性三種模式:HBsAg(+)HBeAg(+)HBeAb(-),HBsAg(+)HBeAb(-)HBeAb(+);HBsAg(+)HbeAg(-)HBeAb(-)血清296例,男176,女120,年齡480歲,平均42歲。HBsAg陰性136例,來(lái)自醫(yī)院健康體檢者。 1.2 試劑 乙型肝炎血清標(biāo)志物、HBVPreS1抗原的檢測(cè)采用ELIS,試劑廈門(mén)新創(chuàng)技術(shù)有限公司。儀器為北京生產(chǎn)的96GS酶標(biāo)儀 1.3 方法 用ELIS

8、A法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)和前S1抗原,試驗(yàn)按相關(guān)試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作。 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)資料的2檢驗(yàn)進(jìn)行分析。 2 結(jié)果 2.1 HbsAg陽(yáng)性血清前S1抗原的陽(yáng)性率 296例HBsAg陽(yáng)性血清前S1抗原陽(yáng)性201,總陽(yáng)性率為67%。29 6例HBsAg陽(yáng)性三種模式為:HBsAg(+)HBeAg(+)HBeAb(-);HBsAg(+)HBeAg(-)HBeAb(+);HBsAg(+)HBeAg(-)HBeAb(-)。其前S1抗原陽(yáng)性率分別為85.3%(47/55),64.6%(115/178),61.9%(39/63),經(jīng)2檢驗(yàn),P>0.05,三種模式之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.

9、2 HBsAg陽(yáng)性血清 HBeAg和前S1抗原的陽(yáng)性率,HbsAg陽(yáng)性血清HbeAg陽(yáng)性55例,陽(yáng)性率11.2%;前S1抗原的陽(yáng)性率167例,陽(yáng)性率66.2%。經(jīng)2檢驗(yàn),P<0.01,有非常顯著性差異,即前S1抗原的陽(yáng)性率明顯高于HbeAg陽(yáng)性率。 3 討論 3.1 前S1抗原與HbeAg的關(guān)系 HBV是一種嗜肝DNA病毒科的正嗜肝細(xì)胞病毒1。HBeAg是HBV核心內(nèi)部成分,傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為:HbeAg轉(zhuǎn)為陰性,其傳染性即變?nèi)趸驘o(wú)。而近幾年的研究發(fā)現(xiàn),HBV基因C區(qū)點(diǎn)突變廣泛存在,吳瀟研究發(fā)現(xiàn)前C區(qū)和C區(qū)內(nèi)的基因突變可能使HbeAg不能表達(dá),HBV為了逃避宿方的免疫反應(yīng)發(fā)生了基因突變或基因整

10、合,使作為病毒復(fù)制標(biāo)志的HbeAg檢測(cè)不能如實(shí)反映病毒的存在和復(fù)制。此時(shí)即使HbeAg陰性,但病毒復(fù)制仍然存在。在本文63例HBeAg陰性血清中,與HBeAg陽(yáng)性一樣,PreS1蛋白在HBVDNA檢測(cè)陽(yáng)性的標(biāo)本中仍具有較高的檢出率,故作PreS1能避免HBeAg變異而產(chǎn)生的陰性誤導(dǎo)。有研究報(bào)道2,PreS1蛋白作為HBV外殼蛋白的主要部分,還有干細(xì)胞膜受體,具有高度的免疫原性,在HBV感染肝細(xì)胞和機(jī)體免疫應(yīng)答方面其重要作用。研究發(fā)現(xiàn)前S蛋白出現(xiàn)在感染的最早期,甚至在HBVDNA出現(xiàn)之前,常在HbsAg消失之前消失,是病毒消失的最早跡象3。若患者血清中HBVPreS1-Ag持續(xù)陽(yáng)性,則提示病情向

11、慢性發(fā)展且可能有肝功能損害。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了296例HbsAg陽(yáng)性血清的HBeAg和前S1抗原。結(jié)果HBeAg的陽(yáng)性率明顯低于前S1抗原的陽(yáng)性率,差異有非常顯著性意義。本次實(shí)驗(yàn)HBeAg的陽(yáng)性率很低,也證實(shí)了由于病毒變異科導(dǎo)致HBeAg陽(yáng)性率低,與資料報(bào)道相符,因此認(rèn)為前S1抗原作為新的HBV標(biāo)志物,比HBeAg更能反映了HBV的復(fù)制情況。 3.2 HBeAg三種模式前S1抗原的陽(yáng)性率雖略有差異,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HBeAg陰性的兩種模式,前S1抗原的陽(yáng)性率同樣高達(dá)64.6和61.9,說(shuō)明在HBeAg陰性感染者中,有相當(dāng)部分具有更高的HBV-DNA復(fù)制活力。本次實(shí)驗(yàn)也再次證實(shí)了由于病毒變異導(dǎo)致HBe

12、Ag合成障礙,出現(xiàn)血清學(xué)檢測(cè)陰性,而病毒仍在復(fù)制,原因可能是因?yàn)镠BV基因組最重要的介導(dǎo)部位是前S1蛋白的氨基酸(AA)2147片段,變異的病毒只要這一區(qū)段完好就有傳染性。提示機(jī)體內(nèi)含有HBV就有前S1抗原。還有,因HBV病毒變異導(dǎo)致逃逸機(jī)體對(duì)HBV的免疫應(yīng)答,是病毒在體內(nèi)長(zhǎng)期存在,而造成肝細(xì)胞持續(xù)破壞和突變,成為肝癌發(fā)生的啟動(dòng)因子。因此,我們認(rèn)為將前S1抗原作為HBV血清標(biāo)志物常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目之一,可避免這種因病毒變異而產(chǎn)生的HBeAg陰性的誤導(dǎo),以利于流行病學(xué)調(diào)查和臨床觀察病情發(fā)展的情況,同時(shí),在條件允許時(shí)進(jìn)行HBV-DNA定量檢測(cè),并將前S1抗原檢測(cè)結(jié)果與HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果對(duì)照4。 3.

13、3 前S1抗原與HBeAg的關(guān)系 本次實(shí)驗(yàn)對(duì)204例HBeAg陽(yáng)性和121例HBeAg陰性血清檢測(cè)了前S1抗原,結(jié)果只在HBeAg陽(yáng)性血清中檢測(cè)出前S1抗原陽(yáng)性,而HBeAg陰性的血清標(biāo)志物,無(wú)論組成模式如何變化,前S1抗原全部為陰性5。表明前S1抗原只存在于HBeAg陽(yáng)性血清中,與文獻(xiàn)的結(jié)果相一致。但是,前S1抗原與HBeAg的陽(yáng)性率并不是完全一致,原因可能與HBV表面蛋白結(jié)構(gòu)中HBeAg和前S1抗原的數(shù)量有關(guān)系,也與在人體血液內(nèi)存在大量的主要由HBeAg組成的HBV小球型顆粒有關(guān)。也有文獻(xiàn)報(bào)道,因前S區(qū)具有復(fù)雜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),導(dǎo)致前S1多肽為免疫源的單抗檢出率較低,而使用包被針對(duì)構(gòu)象前S區(qū)的單抗實(shí)際檢測(cè)HBV表面大蛋白能更好地反映HBV復(fù)制情況,這一方面還有待于進(jìn)一步探討和研究?？傊?目前檢測(cè)前S1抗原在流行病毒學(xué)調(diào)查和臨床上具有重要的意義。 參 考 文 獻(xiàn) 1 胡亞萍,陳明洪,陳秉宇.血清乙型肝炎病毒前S1抗原檢測(cè)及其他肝病慢性化的關(guān)系.浙江實(shí)用醫(yī)學(xué),2006,6(1):16. 2 趙受英,孫永祥.203份HBV無(wú)癥狀攜帶者血清