魚腥草揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量日變化的研究

1、魚腥草揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量日變化的研究                           作者：陳黎 吳衛(wèi) 楊玉霞 黃春燕 鄭有良 【摘要】  目的研究魚腥草揮發(fā)油中主要化學(xué)成分在一天中日照時間段的含量變化情況，確定適宜的采收時間。方法對生產(chǎn)中魚腥草主栽品系的鮮草地上部分揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行GC/MS分析。結(jié)果方差分

2、析結(jié)果表明，魚腥草新品系W01-100和W01-94的揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量在日照時間內(nèi)無顯著變化。其中，W01-94揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量更穩(wěn)定。魚腥草地上部分鮮草揮發(fā)油的部分主要成分間含量變化相關(guān)顯著，但不同材料間相同兩種成分間的相關(guān)性可能不同。結(jié)論W01-100和W01-94在整個白天內(nèi)均可采收。 【關(guān)鍵詞】  魚腥草 揮發(fā)油 日照時間 含量變化Abstract：Objective：To study the content change of the main components of the essential oil from Houttuynia cordata Thu

3、nb. during daytime, and to ascertain the optimal harvesting time. MethodsThe essential oil constituents of the fresh aerial parts of two lines were analyzed by Gas Chromatography / Mass Spectrograph (GC/MS). ResultsThe results of variance analysis showed that the essential oil of the two new lines W

4、01-100 and W01-94 did not change significantly during daytime. The contents of the main components of the essential oil of W01-94 were more stable. There were significant correlations between the content changes of some main components of the essential oil from the fresh aerial parts of Houttuynia.,

5、 but the correlations between the two same components might be different in different materials. ConclusionW01-100 and W01-94 can be harvested during the whole daytime.Key words：Houttuynia;   Essential oil;   Daytime;   Content change魚腥草為三白草科蕺菜屬蕺菜Houttuynia cordata Thun

6、b.之全草，其莖葉搓碎后有魚腥味，故名魚腥草。性味辛、寒，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋之功效。藥理研究表明其有效成分具有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、利尿平喘等作用。揮發(fā)油成分為其主要有效成分，包括癸酰乙醛（即魚腥草素）、甲基正壬酮、月桂烯、蒎烯、癸酸、癸醛等，其中甲基正壬酮為現(xiàn)行的質(zhì)量控制成分1。目前生產(chǎn)中，通常采收花期魚腥草植株入藥，但魚腥草在一天中的采收時間并沒有嚴(yán)格限制，整個白天均在采收。研究表明，某些植物體內(nèi)有效成分的含量具有日變化的特點24。本研究通過分析不同日照時間段魚腥草主栽品系揮發(fā)油主要化學(xué)成分組成及含量的變化規(guī)律，為魚腥草的科學(xué)采收提供一定依據(jù)。1  器材Z

7、DHW型調(diào)溫電熱套(河北省中興儀器有限公司)；Agilent 6890?5973N型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent公司）；試劑均為分析純。W01?100和W01?94均為在雅安三九藥業(yè)有限公司魚腥草GAP基地篩選出的新品系5，其中W01?100是基地目前主栽品系。實驗材料栽培于四川省雅安市四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)科研農(nóng)場，田間管理同大田生產(chǎn)基本一致。2  方法2.1  供試樣品的制備2003?06魚腥草花期，連續(xù)3日每日分別于800，1030，1300，1530，1800取W01?100和W01?94地上部分，洗凈，擦干后剪碎作為樣品。稱取樣品50 g置圓底燒瓶中，加入蒸餾水5

8、00 ml，接揮發(fā)油提取器，收集管內(nèi)加入醋酸乙酯1 ml，微沸提取4 h，取醋酸乙酯層，用醋酸乙酯清洗收集管，合并醋酸乙酯，定容至10 ml作為供試樣品。2.2  色譜條件GC色譜柱：HP-5MS (30 m × 0.25 mm×0.25 m)；載氣：He；流速1 ml/min；程序升溫：以5/min從70到150， 保持2 min, 然后以10/min從150到220，保持5 min；氣化溫度250；進(jìn)樣量1 l；分流比150。MS電離能量70 ev；離子源溫度230；四極桿溫度：150；燈絲電壓1 000 v。2.3  數(shù)據(jù)處理總離子流色譜圖中各峰的

9、鑒定主要通過NIST2.0質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索以及人工鑒定，采用峰面積歸一法計算各峰的百分比含量。3  結(jié)果3.1  揮發(fā)油共有化學(xué)成分的百分比含量將3日不同時間所取樣品的各揮發(fā)油共有化學(xué)成分百分比含量分別取平均值列于表1。從表1可以看出，兩個品系揮發(fā)油中共有成分為24種，包括癸酰乙醛、甲基正壬酮、月桂烯等已知的有效成分。共有化學(xué)成分中，W01-100含量最多的成分為癸醛，其次是-水芹烯和月桂烯，它們占揮發(fā)油含量的30%左右；W01-94含量最多的成分也是癸醛，其次是十二烷醛和月桂烯，它們占揮發(fā)油含量的50%左右。24種共有化學(xué)成分總含量在W01-100和W01-94分別達(dá)到了各

10、自揮發(fā)油總量的95%左右。百事通3.2   揮發(fā)油主要化學(xué)成分的日變化情況W01-100為當(dāng)前主栽品系，將其揮發(fā)油中百分比含量大于5%的成分，包括-水芹烯、月桂烯、E-羅勒烯、4-松油醇、癸醛、甲基正壬酮、十二烷醛、乙基癸酸酯等8種化學(xué)成分以及主要有效成分癸酰乙醛共9種化學(xué)成分作為主要化學(xué)成分。從表1可以看出，在W01-100和 W01-94中，這9種成分合計均占各自揮發(fā)油總量的70%以上。對這9種主要化學(xué)成分連續(xù)3日在日照時間內(nèi)不同時間的取樣結(jié)果分別進(jìn)行方差分析。結(jié)果表明，3日內(nèi)同一時間所取的W01-100和 W01-94植株地上部分揮發(fā)油中9種主要化學(xué)成分含量差異均不顯

11、著，不同時間所采收樣品間揮發(fā)油主要化學(xué)成分的含量差異也都不顯著，也就是說，這兩個魚腥草品系揮發(fā)油主要化學(xué)成分含量在一天中日照時間內(nèi)無顯著變化。    盡管9種主要化學(xué)成分不同時間的含量差異不顯著，但將W01-100和 W01-94揮發(fā)油中各主要成分在不同時間含量變化趨勢列于圖1。從圖1中仍可以看出，揮發(fā)油中不同化學(xué)成分在日照時間內(nèi)變化趨勢不盡相同。-水芹烯和月桂烯含量在W01-100和 W01-94中變化趨勢相同，800時最低，然后升高，在1300達(dá)到一個峰值后下降，1530后又升高。4-松油醇和癸酰乙醛在兩個品系中的變化趨勢基本一致，前者表現(xiàn)為升高-下降-升高，

12、后者表現(xiàn)為下降-升高-下降，不過變化的時間在兩個品系中各有不同。而其它主要成分在兩個品系中的變化趨勢則不一致。如乙基癸酸酯在W01-100中的變化趨勢為下降-升高-下降，在W01-94中則是下降-升高。    從圖1中還可以看出，W01-94的主要化學(xué)成分日變化幅度明顯小于W01-100的主要化學(xué)成分日變化幅度，即W01-94的主要化學(xué)成分含量穩(wěn)定性優(yōu)于W01-100。3.3  揮發(fā)油各主要成分日變化的相關(guān)分析W01-100和 W01-94揮發(fā)油各主要成分在不同時間含量變化的相關(guān)系數(shù)列于表2。從表2可以看出，魚腥草鮮草地上部分揮發(fā)油部分主要成分間存在顯著

13、或極顯著相關(guān)。在W01-100中，-水芹烯與月桂烯、-水芹烯與十二烷醛、月桂烯與十二烷醛、癸醛與十二烷醛、甲基正壬酮與癸酰乙醛以及甲基正壬酮與乙基癸酸酯間存在顯著正相關(guān)，癸酰乙醛與乙基癸酸酯間存在極顯著正相關(guān)，而-水芹烯與甲基正壬酮、月桂烯與甲基正壬酮、癸醛與甲基正壬酮、十二烷醛與癸酰乙醛以及十二烷醛與乙基癸酸酯間存在顯著負(fù)相關(guān)，十二烷醛與甲基正壬酮、-蒎烯與癸酰乙醛以及月桂烯與乙基癸酸酯間存在極顯著負(fù)相關(guān)；在W01-94中-水芹烯與月桂烯存在顯著正相關(guān)，E-羅勒烯與十二烷醛、癸醛與乙基癸酸酯間則為顯著負(fù)相關(guān)。其余成分無論在W01-100中還是在W01-94中，其相關(guān)性均未達(dá)顯著水平。以上結(jié)果

14、表明，雖然魚腥草地上部分鮮草的揮發(fā)油的部分主要成分間的含量變化存在顯著或極顯著相關(guān)，但不同材料間相同兩種成分間的相關(guān)性是可能不同的。表1  兩個品系揮發(fā)油中共有化學(xué)成分不同采樣時間的百分比含量（略）4  討論    -水芹烯、月桂烯、癸醛、甲基正壬酮和癸酰乙醛等9種主要成分的總含量在W01-100和W01-94均達(dá)到了各自揮發(fā)油總量的70%以上。我們認(rèn)為這9種成分的含量變化可以較好地反映魚腥草揮發(fā)油化學(xué)成分的含量變化。    有實驗表明，某些植物體內(nèi)有效成分的含量具有日變化的特點。如青蒿在早上青蒿素含量為0. 41

15、5% , 中午12 時和下午16時采收的樣品中青蒿素含量分別為0. 577%，0. 543%2。唐古特莨菪在早上采收樣品的山莨菪堿含量為1. 24%，中午，晚上采收的含量分別為0.104%，0. 114%。此外，唐古特東莨菪葉中黃酮體含量和生物堿含量晝夜間變化也很大，開花盛期其黃酮體含量在12 時最高, 此后降低, 20 時最低, 至24 時后又開始升高；主要生物堿莨菪堿和東莨菪堿含量在12時最高, 在24 時最低； 另一種未鑒定的生物堿在16 時含量最高, 隨后逐漸降低, 至24 時完全消失3。晴天時，薄荷葉中揮發(fā)油含量以1016時為最高4。本實驗表明，W01-100和 W1-94揮發(fā)油中9

16、種主要化學(xué)成分含量在白天不同時間差異不顯著。據(jù)此認(rèn)為，W01-100和 W1-94花期在白天任何時刻均可采收。由于W01-94的揮發(fā)油成分含量穩(wěn)定性好于W01-100，因此W01-94采收時間可以比W01-100更靈活。至于不同材料間的主要成分日變化幅度不盡相同的原因可能與W01-100和 W01-94的遺傳背景不同有關(guān)。我們的前期研究已表明，W01-100和 W01-94在同工酶、DNA分子水平以及解剖結(jié)構(gòu)上存在較大的差異612。表2  兩個品系9種主要成分在不同時間含量變化的相關(guān)系數(shù)（略）本實驗結(jié)果還表明，部分主要成分日變化相關(guān)顯著，這為在對一種成分進(jìn)行含量測定的時候，對與其顯著

17、相關(guān)的成分含量的預(yù)測提供了可能。但究竟是什么原因產(chǎn)生的這種相關(guān)性？是因為這些成分在合成代謝途徑上存在相關(guān)，又或是在體內(nèi)運(yùn)輸方向上存在相關(guān)。如果是這樣，那么，為什么部分成分在兩份材料間相關(guān)關(guān)系又孑然不同？如在W01-100中，-蒎烯與十二烷醛間存在顯著正相關(guān)，但在W01-94中，它們間卻是負(fù)相關(guān)。對此，尚需做進(jìn)一步的研究。【參考文獻(xiàn)】  1吳 衛(wèi)魚腥草的研究進(jìn)展J.中草藥，2001，32(4)：367.2鐘鳳林， 陳和榮， 陳 敏青蒿最佳采收時期、采收部位和干燥方式的實驗研究J.中國中藥雜志，1997，22(7)：405.3岳鳳先中藥的現(xiàn)代研究M.北京：中醫(yī)古籍出版社，1988：32.

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