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文檔簡介
1、實驗九實驗九 利用不同的方法篩選利用不同的方法篩選和鑒定轉(zhuǎn)化子和鑒定轉(zhuǎn)化子綜合性、設計性實驗綜合性、設計性實驗1、指導思想、指導思想 學生經(jīng)過前期的實驗已經(jīng)基本掌握了本學生經(jīng)過前期的實驗已經(jīng)基本掌握了本門實驗課程的基本理論和基本技術(shù)。所以門實驗課程的基本理論和基本技術(shù)。所以設置一個綜合性的實驗,以培養(yǎng)學生的綜設置一個綜合性的實驗,以培養(yǎng)學生的綜合能力和創(chuàng)新能力。本實驗的內(nèi)容包括了合能力和創(chuàng)新能力。本實驗的內(nèi)容包括了以前所有實驗的的基本原理和基本技術(shù),以前所有實驗的的基本原理和基本技術(shù),學生可以根據(jù)實驗要求,運用學過的知識學生可以根據(jù)實驗要求,運用學過的知識和技能,自己設計實驗方案,篩選出轉(zhuǎn)基和
2、技能,自己設計實驗方案,篩選出轉(zhuǎn)基因菌株即目的重組子。因菌株即目的重組子。2、實驗目的、實驗目的 通過不同方法,篩選獲得轉(zhuǎn)基因菌株。通過不同方法,篩選獲得轉(zhuǎn)基因菌株。3、實驗要求、實驗要求根據(jù)實驗要求,運用學過的知識和技能以及查根據(jù)實驗要求,運用學過的知識和技能以及查閱閱 相關(guān)資料,先設計實驗方案,提交老師相關(guān)資料,先設計實驗方案,提交老師批閱認可;批閱認可;再獨立進行實驗準備和實驗,篩選出轉(zhuǎn)化子;再獨立進行實驗準備和實驗,篩選出轉(zhuǎn)化子;實驗結(jié)束,撰寫綜合性實驗報告,即小論文實驗結(jié)束,撰寫綜合性實驗報告,即小論文1篇。小論文要求:字數(shù)不少于篇。小論文要求:字數(shù)不少于3000,包括,包括論文題目
3、、作者、摘要、關(guān)鍵詞、引言、論文題目、作者、摘要、關(guān)鍵詞、引言、材料與方法、結(jié)果與分析、結(jié)論或討論、材料與方法、結(jié)果與分析、結(jié)論或討論、參考文獻。參考文獻。4、涉及的內(nèi)容或知識點、涉及的內(nèi)容或知識點 抗性篩選抗性篩選轉(zhuǎn)化子;轉(zhuǎn)化子; 菌落直接菌落直接PCR的分子鑒定的分子鑒定轉(zhuǎn)基因大腸桿轉(zhuǎn)基因大腸桿菌;菌; 質(zhì)粒提取及大小鑒定質(zhì)粒提取及大小鑒定轉(zhuǎn)基因大腸桿菌;轉(zhuǎn)基因大腸桿菌; 質(zhì)粒酶切鑒定質(zhì)粒酶切鑒定轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。正向引物正向引物P1) EcoRI 5-CGCGAATTCATGGCAGATCAGCTCACCGATGATC-3反向引物反向引物P2):): Not I 5-AGA
4、GCGGCCGCCTTTGCCATCATAACTTTGACAAA-3ATGGCAGATCAGCTCACCGATGATCAGATCTCTGAGTTCAAGGAAGCTTTTAGCATGGCAGATCAGCTCACCGATGATCAGATCTCTGAGTTCAAGGAAGCTTTTAGCCTTTTCGACAAAGACGGAGATGGTTGCATCACAACGAAAGAGCTAGGAACAGTGCTTTTCGACAAAGACGGAGATGGTTGCATCACAACGAAAGAGCTAGGAACAGTGATGAGATCATTAGGTCAAAATCCAACAGAAGCAGAGTTACAAGATATGAT
5、AAACATGAGATCATTAGGTCAAAATCCAACAGAAGCAGAGTTACAAGATATGATAAACGAAGTAGATGCTGATGGTAACGGAACCATAGACTTCCCTGAGTTTCTGAACCTAGAAGTAGATGCTGATGGTAACGGAACCATAGACTTCCCTGAGTTTCTGAACCTAATGGCTAGGAAGATGAAGGACACTGACTCTGAAGAAGAGCTCAAAGAAGCTTTCATGGCTAGGAAGATGAAGGACACTGACTCTGAAGAAGAGCTCAAAGAAGCTTTCAGGGTTTTCGATAAGGACCAGAACGGTTTCATCTCGGCAGCTGAGTTAAGACATAGGGTTTTCGATAAGGACCAGAACGGTTTCATCTCGGCAGCTGAGTTAAGACATGTAATGACAAATCTTGGTGAGAAGTTAACTGATGAAGAAGTTGATGAGATGATCGTAATGACAAATCTTGGTGAGAAGTTAACTGATGAAGAAGTTGATGAGATGATCAAAGAAGCTGATGTTGATGGAGATGGTCAGATCAATTATGAAGAGTT
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