血清蛋白質(zhì)聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳_第1頁
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文檔簡介

1、 3. 加樣 取血清12L ,7號試劑12L混勻,品均加入4管,每管6L.(加樣槍 不可插入過深,以免刺破凝膠,同時要緩慢、均勻,以免攪動緩沖液引 起樣品擴散。) 4. 電泳 接通電源,上負下正,先調(diào)節(jié)電流1mA/管,待示蹤染料進入分離膠后調(diào) 節(jié)為23 mA/管,待示蹤染料離管下口0.5cm時切斷電源。 5. 剝膠 注入蒸餾水做潤滑劑,針頭螺旋式前進,緩緩剝離。 6. 固定、染色及漂洗 將凝膠柱浸入8號劑中泡10min,進行固定,用9號劑染色10min,用清水沖 洗,放入10號劑中漂洗脫色。 結(jié)果示意圖 2 1 注意事項: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 丙烯酰胺和甲叉雙

2、丙烯酰胺是神經(jīng)毒性試劑,對皮膚有刺激作用, 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺是神經(jīng)毒性試劑,對皮膚有刺激作用, 注意避免直接接觸 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺溶液應裝在棕色瓶中,用前檢測pH值 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺溶液應裝在棕色瓶中,用前檢測 值 是否失效。失效液不能聚合。 是否失效。失效液不能聚合。 加速劑( 加速劑(TEMED)要密封保存,過硫酸溶液現(xiàn)配現(xiàn)用,防止氧化 )要密封保存,過硫酸溶液現(xiàn)配現(xiàn)用, 失效。 失效。 配好膠后應盡快灌膠(不要形成氣泡) 配好膠后應盡快灌膠(不要形成氣泡) 切記裝柱后應用蒸餾水密封 灌膠和電泳時要注意排氣泡 加樣時不能損傷凝膠表面 電泳時凝膠管不能漏水, 電泳時凝膠管不能漏水,

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