LI-6400便攜式光合儀使用流程說明(個人總結(jié))

1、LI-6400便攜式光合儀使用流程說明一、儀器連接安裝1、加裝化學藥品 藍色干燥劑在正面主機面，白色蘇打在 換藥時先擰開底蓋并且填充量低于螺線 兩個化學管在不測時調(diào)在中間，測定時要在bypass，調(diào)零時Scrub，測CO2響應曲線時蘇打管完全scrub，干燥管-bypass； 白色蘇打不能重復利用且不變色，而干燥劑可重復利用，吸水后變紅色，在210烘90min，變成藍色，當出現(xiàn)粉末時將其倒掉；2、連接硬件 將25針的連接器一端插入標有IRGA的插座中，另一端插入標有CHAMBER插座中，寬面(長邊)朝上，且擰緊螺絲釘（注意不要擰得太緊，否則螺絲釘將被折斷）； 將末端有黑色標記的軟管與操作臺右端

2、標有SAMPLE的端口（有黑色皮墊）連接，另外一個軟管（無黑色標記）與標有REF的端口（無黑色皮墊）連接； 標有INLET的端口（套有綠色軟管）是空氣的入口，連接緩沖瓶（懸掛在空中，空氣流動相對穩(wěn)定處，以防止污物進入主機，同時在測量過程中可減少空氣流動對測量結(jié)果的影響）； 連接電纜與IRGA頭部圓形IRGA端口上的紅色圓點和IRGA分析器上的紅色選點對齊時插進，且能聽到響聲，注意：插頭一定要推到底，不能留有空隙； 安裝CO2鋼瓶（測CO2響應曲線時才安裝，或?qū)嶒灡匦瑁O2 小鋼瓶裝入套筒，順時針旋轉(zhuǎn)，直到感覺保護罩接觸到了小鋼瓶，稍微加力便導致鋼瓶被刺穿，這時需要快速旋緊，防止CO2 泄露

3、，注意：O形圈后將套筒旋緊； 切記分析器各部件：光量子傳感器，紫色插頭處，葉溫熱電偶，2個黃色：匹配閥，如果使用CF卡存數(shù)據(jù)，則插入主機后面固定小槽內(nèi)。注意：插頭直插直拔，勿晃動，最好拔金屬，勿動線。 另外，把光量子傳感器紅帽和進氣口（緩沖瓶）綠帽都先收好。3、電池安裝 將電池傾斜，以頂起電池槽上端的止脫銷，然后平推到底，2節(jié)電池能用4h； 充電器上燈滅表示充好，充時燈亮，一節(jié)電池3h就能充好，充滿電池不需再充電； 檢測有電標志，先燈亮，幾秒后滅掉表明有電，注意換保險絲220-230v，1/4安。二、開機預熱1、預熱期間檢查 檢查溫度 ：h行三個溫度值Tblock, Tair和 Tleaf彼此

4、相差應該在1以內(nèi)； 葉溫熱電偶的位置：直接測葉片T時，其位置應高于葉室墊圈約1mm，使夾葉片時能充分接觸；若用能量平衡方法測量葉溫，則葉溫熱電偶的結(jié)點位置應低于葉室墊圈1mm，確保夾葉片時，接觸不到葉片； 檢查光源和光量子傳感器：光源，正常否，傳感器，g行 ParIn_m 和ParOut_m是否有響應（葉室密封為0），g行Prss_kPa（大氣壓）值是否合理，注意查完將分析器松開； 葉室混合扇：測量菜單中，按2、F1、按O關閉，或按F打開，聽分析器頭部聲音是否有變化，若有變化，表示正常，注意測量用恒溫時才打開風扇； 檢查是否存在氣路堵塞： 設定流速1000，化學管擰到完全bypass，當檢查儀

5、器實際流速能否達到650以上，然后將化學管從完全bypass調(diào)節(jié)到完全scrub，檢查儀器實際流速能否達到650以上，若達不到，則說明氣路堵塞，則首先檢查兩管，方法都是將調(diào)解旋鈕從一側(cè)完全旋到另一側(cè)，檢查流速下降是否大于10，若有則存在堵塞，常見堵塞地方是：化學管內(nèi)過濾嘴；化學管頂部的兩個小的聚乙烯透明管，注意把流量調(diào)回原來設定值400-500。2、預熱后檢查 葉室的漏氣檢查：將化學管scrub，然在葉室四周吹氣，如果發(fā)現(xiàn)A行樣品室CO2S的讀數(shù)于2微摩爾，說明密封好，如果變化超過2ppm，即為漏氣（注意：葉室墊圈、密封圈、排氣管） 檢查流速零點： (測量菜單中-按2-F2-按N關閉)，然關閉

6、葉室風扇（按2-F1-按O關閉）；檢查b行 flow在±2ppm之間表示正常；如果不在需進入校準菜單，進行Flow meter zero。 檢查CO2和H2O IRGAs零點：（1）將兩個化學管都完全吸收（scrub），完全閉合約5min，參比CO2讀數(shù)在±5ppm以內(nèi)，且CO2在±1ppm以內(nèi)，參比H2O在±0.5ppm，且H2O在±0.1ppm，說明零點正常；（2）如果超過這個范圍，約10min，還不能達到要求，需進入校準菜單，進行IRGAs zero（IRGA調(diào)零：關閉葉室（不能有葉片）等待 CO2和H2O濃度下降，CO2 R和S波動范圍

7、在±0.1，蘇打管：scrub,化學管：bypass（按下F1-Auto CO2進入自動調(diào)整CO2零點），H2OR和S波動范圍在±0.01，蘇打管：bypass，化學管：scrub（按下F2-Auto H2O，自動調(diào)整H2O零點）按 quit-F5 退出，約15min，化學管完全scrub，注意一個一個管開始調(diào)，若對CO2和H2O同時調(diào)F3-Auto All，切記都不要經(jīng)常調(diào)；（3）可直接從view Settingsveiw History（查看歷史）調(diào)用以前出廠校準信息（最頂端帶進入set to（F3）F5（OK）。 注意：絕不允許進行“CalibMenu”中“IRGAS

8、pan”的任何操作！ 校準葉溫熱電偶 拔出連接插頭，切斷葉溫熱電偶連接，然后檢查h行Tblock-Tleaf<0.1以內(nèi)，不在0.1以內(nèi)，需要調(diào)節(jié)電位調(diào)節(jié)器進行校準。 檢查匹配閥 開始測量前進行一次匹配，當全天都在相同的CO2濃度下做實驗，每20到30分鐘就應當匹配一次，每次測量都要改變CO2濃度，每變一次需要進行一次匹配。三、校準菜單（Calib Menu）1、Flow Meter Zero選擇“Flow Meter Zero”，校正自動進行，10秒鐘后，流量計信號應在 0±1mV范圍內(nèi)，按F5 退出。注意關閉空葉室，化學管完全scrub。2、 紅外分析儀IRGA Zero選

9、擇“IRGA Zero”，先校正CO2零點：按F1，AutoCO2，蘇打管：Scrub，化學管：bypass；等待CO2R和CO2S穩(wěn)定在±1mol/mol； 再校正H2O零點：按F2，AutoH2O，蘇打管：bypass，化學管：scrub；等待H2OR和H2OS穩(wěn)定在0.01（時間最少15分鐘），按F5（Quit）返回Calibration Menu； 當對CO2 和 H2O 都同時調(diào)零，則，這時按F3 (AutoAll)，旋緊堿石灰管和干燥管上端的調(diào)節(jié)螺母指向Full scrub方向，按F5 (Quit)退出，在“Calib Menu”（按F3）中選擇“View, Store

10、Zero & Spans”，按提示進行存貯操作。注意：絕不允許進行“Calib Menu”中“IRGA Span”的任何操作，校正CO2和H2O零點時，應該關閉葉室并且保持葉室中不能夾入葉片，而且利用新鮮的堿石灰和干燥劑。關閉儀器葉室，然選擇“Y”。 3、CO2 Mixer 校正 選擇“CO2 Mixer -Calibrate”，確認CO2 Mixer的最大值，應該在2000mol/mol以上； 自動校正 CO2 Mixer，該過程在05000mv之間進行8個點的校正，每個點大約需要2030秒； 顯示校正數(shù)據(jù)并提示用戶Plot this（Y/N），選擇“Y”，顯示校正數(shù)據(jù)的圖形； 應用

11、校正結(jié)果“Implement this calibration（Y/N）”，選擇Y，退出返回到校正主菜單。 注意：校正前應該安裝CO2 Mixer，并將Cylinder Cover擰緊以刺破CO2鋼瓶如長期未使用CO2鋼瓶，則首次使用時需要進行CO2 calibration，以后則不必經(jīng)常校準，注意將CO2調(diào)節(jié)旋鈕擰至Scrub并關閉葉室。4、LED光源校準 LED光源取代上部葉室的位置，LED的光傳感器接頭替代原葉室的內(nèi)置光量子傳感器接頭； 選擇“Light Source Calibrate”；選擇“Y”；自動校正 LED光源 ； 顯示校正結(jié)果并顯示響應的圖形 ；應用校正結(jié)果，選擇“Y”；選

12、 回 OPEN 測量主菜單。 注意：只有當安裝了LED紅藍光源并且選擇了響應的配置文件才能夠按以上操作；不要忘記安放3個O型圈。四、測量菜單注意！下面測量方式都需進行以上相關的準備步驟，以下詳細說明各方式測定流程第一種測量步驟：非控制環(huán)境條件（日變化）流程1、開機選擇 Config Menu打開標準葉室（factory default）；2、打開測量菜單進行日常檢查 （參照以上第二大點內(nèi)容）；3、打開葉室 夾好葉片，再密封；（注意葉溫熱電偶避開葉脈，用手柄上旋鈕密封后，確定不漏氣，每次用直接打開夾葉片，切記不必每次再擰手柄旋鈕了，不然會折斷）；4、進入測量菜單F4（New Menu） 按1,

13、F1，打開Open LogFile將數(shù)據(jù)存入建立一個文件，（注意 按F1“Dir”，重新定義路徑：選 中Flash，這樣文件保存在CF卡，方便導數(shù)據(jù)；不然默認在User主機上，導數(shù)據(jù)費時費電）確定輸入一個remark（標記何處理何品種名），完成文件名。 等待a行參數(shù)穩(wěn)定，b行CO2值波動 < 0.2，Photo參數(shù)穩(wěn)定在小數(shù)點之后1位； c行參數(shù)在正常范 圍內(nèi)（0 < Cond < 1、Ci > 0、Tr > 0）； 按F1(Log)記錄數(shù)據(jù)； 更換另一葉片（按F4，添加remark，分清不同處理或品種）；按F3，一定記住Close file保存數(shù)據(jù)文件；注意：至

14、少半小時進行一次Match（建議每一品種測3片葉子，讀3個數(shù)）5、導出數(shù)據(jù) （若在CF卡上，直接用讀卡器導出來，存在主機時詳細見后面第四大點）6、退回主界面：關機。注意：把化學管旋鈕旋至中間松弛狀態(tài)；保持葉室處于打開狀態(tài)。第二種測量步驟：控制環(huán)境條件的測定流程1、開機選擇 主菜單Config Menu（打開紅藍光源（LED）已安裝2、進入測量菜單 將光強設為自然狀態(tài)一致或光強飽和點（一般1000-1500范圍），設定需要CO2 濃度，取下外置光量子傳感器的小紅帽，若外界光強低于1000，則要進行光誘導光越弱誘導時間越長（取決于最高光強，誘導完成后在測量菜單第2功能行F5，按f5，選擇“Q) Q

15、uantum Flux XXX mol/m2/s”，enter，輸入需要光強，enter； 將蘇打管擰到完全scrub位置，化學管擰到完全bypass位置，按2，再按F3- Mixer(CO2)按上下箭頭鍵選擇參考室R和樣品室S設定CO2需要濃度（安裝鋼瓶狀態(tài)）； 按2（2功能行）：F1，LeafFan，保持Fast；F2，F(xiàn)low通常為500（小葉片或低光合速率的植物，可以將Flow調(diào)低到200以上）；F4，Temp，一般為off狀態(tài)，做控制溫度時才進行設定（測量之前一定要首先查看參數(shù)行H的值，了解當前環(huán)境的溫度，因只能控制環(huán)境溫度的正負7度以內(nèi)；F5，Lamp通常保持off； 打開葉室 ：

16、夾好葉片，從測量菜單上按F1，Open LogFile，然后按F1“Dir”，重新定義路徑：選中Flash或user建立一個文件，enter，輸入一個remark標記； 等待a行參數(shù)穩(wěn)定，b行CO2值波動 < 0.2 mol-1，Photo參數(shù)穩(wěn)定在小數(shù)點之后一位，c行參數(shù)在正常范圍內(nèi)（0<Cond<1、Ci>0、Tr>0）； 按F1(Log)記錄數(shù)據(jù)；（一般每一品種測3片葉子，每片讀3個數(shù)） 更換另一葉片，按F4，添加remark, 重復4-6步驟，進行測量；注意：至少半小時進行一次Match； F3(Close file)，保存數(shù)據(jù)文件。3、導出數(shù)據(jù)（詳細見后

17、面第四大點）4、退回主界面：關機。提示：如果外界光強低于1000molmol-1，則需要進行光誘導，一般誘導時間約30mins左右，誘導光強取決于實驗設計的光響應曲線中的最高光強，或者植物生活中較適宜的光強，在測量菜單第2功能行的F5，按Q，設定相應的光強，打開光源，然后將葉片夾入已打開光源的葉室，如果外界光強很好，不需要誘導，夾上葉片后打開光源，設定成光強梯度的飽和點，閉合葉室不漏氣，準備測量。注意：把化學管旋鈕旋至中間松弛狀態(tài)；旋轉(zhuǎn)葉室固定螺絲，保持葉室處于打開狀態(tài)，把光量子傳感器紅帽和緩沖瓶進氣口綠帽都蓋好。第三種測量步驟：光響應曲線測定步驟1、開機選擇主菜單Config Menu（打開

18、紅藍光源（LED）已安裝；2、進入測量菜單，進行日常檢查 （參照以上第二大點內(nèi)容）； 當安裝鋼瓶狀態(tài)時，將蘇打管擰到完全Scrub位置，化學管擰到完全Bypass位置，按2，再按F3， Mixer(CO2)按上下箭頭鍵選擇參考室R和樣品室S設定CO2需要濃度；當沒有安裝鋼瓶時，兩個化學管都擰到完全bypass位置； 當有無鋼瓶狀態(tài)下，光強都設為自然狀態(tài)一致或光強梯度的第一個點，設定CO2 濃度（安裝鋼瓶時設定：等于或高于空氣中的；未安裝：直接用自然的CO2 濃度），取下外置光量子傳感器的小紅帽，若外界光強低于1000，則要進行光誘導光越弱誘導時間越長，誘導完成后在測量菜單第2功能行F5，按Q設

19、定相應光強； 按2（2功能行）：F1，LeafFan，保持Fast；F2，F(xiàn)low通常為500（小葉片或低光合速率的植物，可以將Flow調(diào)低到200以上）； F4，Temp，一般為off狀態(tài)，做控制溫度時才進行設定一般25-30（測量之前一定要首先查看參數(shù)行H的值，了解當前環(huán)境的溫度，因只能控制環(huán)境溫度的正負7度以內(nèi)；F5，Lamp通常保持off，做控制溫度設為自然狀態(tài)一致或光飽和點； 當安裝鋼瓶狀態(tài)時，需按F3，Mixer(CO2)，按上下箭頭鍵選擇參考室R和樣品室S設定CO2需要濃度當沒有安裝鋼瓶時，無需按F3，直接用自然的CO2 濃度。3、進入測量菜單 打開葉室，夾好葉片，閉合葉室；注意

20、葉溫熱電偶避開葉脈 按F1，Open LogFile，選擇將數(shù)據(jù)存入Flash或user建立一個文件，進入輸入一個remark確定； 按5，F(xiàn)1(Auto prog) ，進入自動測量界面，按上下箭頭鍵選擇Light Curve，確定，出現(xiàn)Desired lamp settings，可按home鍵自高到低設定光強梯度2000、1600、1200、1000、800、600、400、300、200、150、100、50、0（注意設定時將數(shù)據(jù)刪除完，數(shù)值間一定空格間隔，200以下的可多設幾個），確定，出現(xiàn)最小等待時間：設定120S（不能更改，不然數(shù)據(jù)不佳），最大等待時間：設定200s，enter，CO

21、2絕對值低于50需匹配enter，按Y，進入自動測量（Log記錄數(shù)據(jù)，表明數(shù)據(jù)記錄進行中）。 按1，F(xiàn)3(Close file)保存文件（切記），更換葉片，重復1-3步驟。注意：等待測量中可通過功能行1的F2（view file）下的F1(ImportGrafDef)從light curve進入看到散點圖（完成后功能行左上角*消失），或按F3（View Data），以D這種格式的數(shù)據(jù)為成列排列，按字母D，查看數(shù)據(jù)。按住shift鍵和右鍵頭，可以快速查看各列數(shù)據(jù)。4、 導出數(shù)據(jù) （詳細見后面第四大點）5、退回主界面：關機。注意：把化學管旋鈕旋至中間松弛狀態(tài)；旋轉(zhuǎn)葉室固定螺絲，保持葉室處于打開狀態(tài)

22、，把光量子傳感器紅帽和緩沖瓶進氣口綠帽都蓋好。提示： 每次開始測量之前，進行一次匹配（F5-match）,一個植株上選3片葉子，每片取1個數(shù)，建議輪回測完1次重復，再測第2次重復，減少時間跨度； 選程序紅藍光，2-3日校準一次光源（按F3校準菜單-選LED，calibration，enter，plot Y，一條直線說明正常。第種測量步驟：CO2響應曲線測定步驟1、 開機選擇 主菜單Config Menu（打開紅藍光源（LED）已安裝；2、進入測量菜單 安裝上CO2鋼瓶：將蘇打管擰到完全Scrub位置，Dessicant化學管擰到完全Bypass位置（注意密封圈，把油濾勾出來裝好，放在2個化學管

23、中間并擰好螺絲；每個鋼瓶在使用之前都要求做1次校準） CO2混合器校準：將注入系統(tǒng)（鋼瓶）進行預熱1分鐘左右，按Escape進入主菜單，按2，再按F3， Mixer(CO2)按上下箭頭鍵選擇參考室R和樣品室S設定CO2需要濃度，再按F3進入calib menu（選擇CO2 Mixer，calibrate，enter），若CO2濃度高于2000ppm-按Y，自動進行8點校準（8個電壓值標定8個CO2濃度），完成后提示“implement this calibrate?”，按“Y”，然后按esc（注意：每個鋼瓶在使用之前都要求校準一次；若曲線不直，把蘇打管擰到完全scrub，再校準1次） 按2（2

24、功能行）：F1，LeafFan保持Fast；F2，F(xiàn)low通常為500； F4，選擇Block（輸入測定溫度，一般25-30）； F5，Lamp，選擇 Q) Quantum Flux，設定為飽和光強(根據(jù)光響應曲線確定約700以上或設為實驗要求的光強)， enter；按3，F(xiàn)1（area）輸入測量葉面積或默認葉室面積。3、進入測量菜單 打開葉室 夾好葉片（可提前夾住葉片，留封勿脅迫，做20分鐘光誘導活化，CO2S濃度可設定為比 環(huán)境濃度40-50ppm（約400ppm左右）； 將光強設為飽和光強（一般1200左右）或設為實驗要求的光強，從測量菜單上按F1，Open LogFile，選擇將數(shù)據(jù)存

25、入Flash或user建立一個文件，enter輸入一個remark； 按5功能行：F1(Auto prog) ，進入自動測量界面，按上下箭頭鍵選擇A-Ci-Curve，enter，命名新文件進入，添加remark，出現(xiàn)Desired CO2 settings，可按home鍵自高到低設定光強梯度1500、1000-0（注意設定時將數(shù)據(jù)刪除完，數(shù)值間一定空格間隔，200以下的可多設幾個) ，enter，出現(xiàn)最小等待時間：設定60S；最大等待時間：設定300，enter，CO2絕對值低于50需匹配，按Y，進入自動測量，等待測量結(jié)束。（期間可通過功能行1的F2（view file）下的F1(Impor

26、tGrafDef)從light curve進入看到散點圖（完成后功能行左上角*消失）， 按1，F(xiàn)3，Close file，保存文件（切記），更換葉片，重復1-3步驟。4、 導出數(shù)據(jù) （詳細見后面第四大點）5、退回主界面：關機。提示：把化學管旋鈕旋至中間松弛狀態(tài)；旋轉(zhuǎn)葉室固定螺絲，保持葉室處于打開狀態(tài)，把光量子傳感器紅帽和緩沖瓶進氣口綠帽都蓋好。注意：每次換鋼瓶后都要求做1次校準匹配；提前做20分鐘光誘導，把葉室夾住，留縫，勿脅迫，把光強設到最高值五、導出數(shù)據(jù)用RS-232數(shù)據(jù)線連接電腦和6400（按esc退回主界面，按F5 Utility Menu），按上下箭頭選擇“File Exchange

27、 Mode”，在電腦上預先安裝SimFX軟件，雙擊打開LI6400FileEx，點擊File，選擇Prefs，選擇Com端口，按Connect，連接成功后，選擇文件傳輸?shù)街付ㄎ恢茫–F卡內(nèi)的數(shù)據(jù)也可在退出卡后，直接插入電腦讀卡器來導出數(shù)據(jù)），關機把化學管旋鈕旋至中間松弛狀態(tài)；旋轉(zhuǎn)葉室固定螺絲，保持葉室處于打開狀態(tài)。測量結(jié)束后，應關閉文件（“closefile”按F3）使其存貯。不進行此操作，數(shù)據(jù)會丟失。6400-09土壤呼吸葉室測量步驟1、安裝土壤呼吸葉室 用8顆內(nèi)六角螺絲把土壤呼吸室固定塊裝到葉室下半部分的位置；（閉路式） 安裝時注意在分析器底座上的密封墊片（可重復使用，要一直粘在分析器底座

28、上，勿移位） 8顆螺絲上緊，逐漸上緊，均勻受力；2、先裝好化學藥品 蘇打管下和干燥管上位置正確； 換藥先擰開底蓋并且填充量低于螺線1cm； 不可擰的過緊，注意密封圈； 干燥管完全bypass，蘇打管完全Scrub以抽提CO2；3、LI-6400連接一條纏有黑膠接到主機側(cè)面的樣本室與參比室進氣口“Y”形管；一條連接土壤呼吸室的膠管到LI-6400主機采氣口（標有Inlet）。4、開機（Is the chamber/IRGA connected? Y選擇“Soil Chamber”加載相應計算程序OPEN主菜單）5、測量菜單 測量土壤表面CO2濃度（把葉室靠近土表，屏幕顯示的CO2S 濃度）； 改

29、變管道的連接方式（蘇打管部分Scrub，干燥管完全bypass）； 去除塑料蓋，輸入文件名（1，F(xiàn)1），進入顯示存儲空間，進入添加標記remark； 輸入葉室的面積（功能3，F(xiàn)1），80cm2 （用土壤環(huán)）默認為81.6 cm2，確定土壤表面的CO2S； 將葉室安裝到土壤環(huán)（PVC）上，插入土壤溫度傳感器（靠近葉室，深度為510cm）； 輸入Target 值（變值）和“Delta”值 (功能7，F(xiàn)1) ，輸入Depth值(功能7，F(xiàn)5如果使用了土壤環(huán)，一般為-1) ，輸入測量重復3次（功能7，F(xiàn)2），選擇測量結(jié)果（功能7，F(xiàn)4），測量開始（功能7，F(xiàn)3），設表樣（±1），進入“Y”，

30、查看數(shù)據(jù)，功能1，F(xiàn)2-F3-D-shift左右鍵查看數(shù)據(jù)。6、導出數(shù)據(jù) 用RS-232數(shù)據(jù)線連接電腦和LI-6400，按esc退回主界面，Utility Menu（F5），file exchange mode，在電腦上預先安裝SimFX軟件，雙擊打開LI6400FileEx，點擊File，選擇Prefs，選擇Com端口，按Connect，連接后選擇文件傳輸?shù)街付ㄎ恢茫–F卡內(nèi)的數(shù)據(jù)也可在退出卡后，直接插入電腦讀卡器來導出數(shù)據(jù)），Ok，按connect，顯示user下存儲文件，將文件拖到電腦相應文件夾。土壤呼吸測定注意事項1、校準菜單(Calib Menu)只有以下三個選項供選擇："IRGA Zero (CO2S, H2OS)" -是僅對樣