山東省1999年麻疹實驗室監(jiān)測結(jié)果分析

1、    山東省1999年麻疹實驗室監(jiān)測結(jié)果分析        摘要：山東省1999年共報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標(biāo)本861份，采集率為48.48。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）捕獲法檢測麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體，陽性率分別為59.12（509861）和10.34（89861），兩者全部陰性者占30.54（263861）。1337例麻疹暴發(fā)疑似病例，麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陽性率分別為58.81（327556）和14.57（81556）；439例散發(fā)疑似病例分別為59.6

2、7（182305）、2.62（8305）。首次在1例典型麻疹確診病例的咽拭子標(biāo)本中分離到1株麻疹野病毒株。ELISA捕獲法檢測IgM抗體用于麻疹的血清學(xué)早期診斷敏感性較高，其結(jié)果與血清標(biāo)本采集時間及麻疹疑似病例的最終分類有很大的關(guān)系。關(guān)鍵詞：麻疹I(lǐng)gM抗體；風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體；麻疹病毒中分類號：R511.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1006916X（2000）060348-03Analysis of Laboratory Surveillance for Suspected Measles Cases in Shandong Province in 1999WANG Chang-yin， XU

3、Qing， XU Ai-qiang(Shandong Provincial Epidemic Prevention Station，Shandong，Jinan 250014，China)Abstract：1，776 suspected measles cases were reported in Shandong Province in 1999.Among them，861（48.48） serum specimens were tested for measles and rubella IgM antibodies by Capture-IgM ELISA. The results s

4、howed that 59.12 cases （509861） were laboratory confirmed as measles and 10.34 （89/861） cases were confirmed as rubella。Of the 1，337（75.28） outbreak cases， 556（41.58） serum specimens showed 58.81 （327556） and 14.5（81556） positive to measles and rubella respectively.Of the 439（24.72） sporadic cases，3

5、05（69.48） serum specimens showed 59.67 and 2.62 positive to measles and rubella respectively.One measles wild type virus was isolated from a typical measles case. The capture-IgM ELISA is highly sensitive for early diagnosis of measles and rubella，the results are related to the time of sample collec

6、tion and the final classification of suspected measles cases.Key words：Measles IgM antibody； Rubella IgM antibody； Measles virus1999年，山東省17個市（地區(qū)，下同）麻疹實驗室監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)全面啟動。按山東省麻疹控制方案的要求，麻疹疑似病例早期血清學(xué)檢測和咽拭子采集工作由各市衛(wèi)生防疫站麻疹實驗室承擔(dān)，并統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）捕獲法檢測血清IgM抗體，省衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)供應(yīng)檢測試劑并對各市麻疹實驗室進(jìn)行年度質(zhì)量控制。為評價實驗室監(jiān)測在麻疹控制中的作用，進(jìn)一步完

7、善今后麻疹實驗室監(jiān)測工作，我們對山東省1999年麻疹實驗室監(jiān)測結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報告如下。材料與方法1標(biāo)本采集由各市麻疹實驗室采集疑似病例的血清標(biāo)本和咽拭子標(biāo)本。血清標(biāo)本在3天內(nèi)完成檢測，及時報告結(jié)果并反饋省衛(wèi)生防疫站；咽拭子盡快送省衛(wèi)生防疫站麻疹實驗室，不能及時送檢時，30暫時存放市麻疹實驗室。2實驗方法血清學(xué)診斷采用國際通用的ELISA IgM抗體捕獲法，檢測試劑由上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供，由省衛(wèi)生防疫站統(tǒng)一發(fā)放。B95a細(xì)胞由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所提供，用于咽拭子麻疹病毒分離。3判斷標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)本以酶標(biāo)儀判定，用波長450nm測OD值，PN2.1為IgM抗體陽性；咽拭子以B95a

8、細(xì)胞呈融合病變?yōu)榕袛嘁罁?jù)。4結(jié)果分析所有資料錄入計算機(jī)，以Excel軟件進(jìn)行分析。結(jié)果1標(biāo)本采集及結(jié)果反饋情況1999年全省監(jiān)測系統(tǒng)報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標(biāo)本861份，采集率為48.48。除棗莊、聊誠、臨沂、菏澤等市血清標(biāo)本采集率低（30左右）外，其余市均較高（90）。全省3天內(nèi)血清標(biāo)本送檢率為82.03，檢測結(jié)果及時反饋率為99.77。共采集咽拭子標(biāo)本65份，采集率為3.66。2IgM抗體檢測結(jié)果861例麻疹疑似病例血清標(biāo)本中，麻疹I(lǐng)gM抗體陽性率為59.12（509861），風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陽性率為10.34（89861），兩者全部陰性者占30.54（263861）。暴發(fā)的13

9、37例疑似病例中，采集血清標(biāo)本556例，其中麻疹I(lǐng)gM抗體陽性率為58.81（327556），風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陽性率為14.57（81556）；散發(fā)的439例病例中，采集血清標(biāo)本305例，麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陽性率分別為59.67（182305）和2.62（8305）。經(jīng)實驗室確診，我省的暴發(fā)病例中絕大部分為麻疹，但泰安、東營、棗莊、萊蕪等市有小范圍的風(fēng)疹流行。3IgM抗體陽性率與采集血清標(biāo)本時間的關(guān)系在所采集的861例血清標(biāo)本中，對采集時間明確的646例疑似病例進(jìn)行分析顯示，出疹后328天采集，血清IgM抗體檢出率為87.79；出疹后3天，IgM抗體檢出率為61.46；出疹后28天仍有78.5

10、0的血清標(biāo)本檢出IgM抗體。如果將出疹后328天為合格采集，出疹后3天、28天為不合格采集（IgM抗體陽性率為62.25），兩者IgM抗體陽性率之間差異有極顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（257.26，P0.01）（表1）。表1麻疹疑似病例IgM抗體陽性率與采集血清標(biāo)本時間的關(guān)系采樣時間檢測數(shù)陽性數(shù)IgM抗體陽性率（）出疹后328天34430287.79出疹后3天28817761.46出疹后28天141178.57合計64649075.854咽拭子標(biāo)本病毒分離及其與相應(yīng)血清標(biāo)本IgM抗體的關(guān)系在65份咽拭子標(biāo)本中，僅對有明確采集時間的59份咽拭子標(biāo)本進(jìn)行分析。59份咽拭子標(biāo)本中同時采集血清標(biāo)本者30份，占5

11、0.85。其中血清學(xué)確診麻疹24例，IgM抗體陽性率為80.00（2430），分離麻疹病毒1株（暴發(fā)病例，出疹當(dāng)天采樣，麻疹I(lǐng)gM抗體陽性、風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陰性）。而另外29份病毒分離陰性的咽拭子標(biāo)本，因未采集血清標(biāo)本，無法進(jìn)行血清學(xué)診斷（占49.15）。其中，暴發(fā)病例和散發(fā)病例的咽拭子中未采集血清標(biāo)本者，分別占51.11（2345）和42.86（614）。另外，從咽拭子標(biāo)本采集時間分析，咽拭子標(biāo)本合格（出疹當(dāng)天或出疹3天內(nèi)）采集率僅為55.93（3359），亦直接影響麻疹病毒的分離結(jié)果（表2）。 表2咽拭子標(biāo)本病毒分離情況與相應(yīng)血清標(biāo)本IgM抗體的關(guān)系咽拭子標(biāo)本數(shù) 出疹后不同時間采集咽拭子數(shù)

12、麻疹病毒分離株 血清IgM抗體 0天 13天 4天陽性 陰性 未采樣暴發(fā)4542021119323散發(fā)140950536合計5942926124629討論 血清學(xué)檢測在麻疹的早期診斷和鑒別診斷中，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，尤其在控制暴發(fā)疫情方面，起到很重要的作用13。1999年，山東省報告麻疹疑似病例1776例，采集血清標(biāo)本861份，經(jīng)實驗室血清學(xué)檢測，麻疹I(lǐng)gM抗體陽性率為59.12，風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體陽性率為10.34（部分市風(fēng)疹流行）。全省3天內(nèi)血清標(biāo)本及時送檢率、結(jié)果反饋率均達(dá)到較高水平，說明我省市級麻疹實驗室的監(jiān)測靈敏度逐步提高，在麻疹疫情控制方面能及時、準(zhǔn)確的發(fā)揮作用。隨著控制麻疹

13、工作的進(jìn)展，實驗室確診和排除病例應(yīng)逐漸提高到較高的比例4。但從我省麻疹疑似病例分析，經(jīng)實驗室確診的病例在所有疑似病例中所占比例仍較低，僅28.66。這一方面是由于血清標(biāo)本采集率低，另一方面是血清標(biāo)本的合格采集率低，對結(jié)果有一定影響。從血清IgM抗體檢測結(jié)果分析，ELISA捕獲法檢測IgM抗體有較高的靈敏性，出疹后328天采集，IgM抗體陽性率達(dá)87.79，但采集時間對其有一定影響。采集不合格標(biāo)本所占比例的大小，影響IgM抗體陽性率的高低，并最終影響到麻疹病例的分類，尤其是散發(fā)病例。我省麻疹疑似病例的咽拭子標(biāo)本采集率及合格采集率不高，麻疹病毒分離率低，僅為1.54（165），低于國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)的報

14、道5。其原因是多方面的：首先，與咽拭子標(biāo)本的采集質(zhì)量和采集時間有很大關(guān)系。因咽拭子標(biāo)本的采集工作主要由縣級來完成，在采集方法上尚不規(guī)范，致使咽拭子標(biāo)本的采集率低，質(zhì)量不高，特別是部分咽拭子標(biāo)本采集時間過晚，影響病毒的分離率。1999年，全省共采集咽拭子標(biāo)本65份，在有明確采集時間的59份咽拭子標(biāo)本中，在出疹當(dāng)天或出疹3天內(nèi)合格采集的咽拭子標(biāo)本僅占55.93（3359），有44.07（2659）的咽拭子標(biāo)本因采集時間過晚，錯過病毒分離的最佳時間。其次，由于采用無菌華氏管進(jìn)行病毒分離，其細(xì)胞接種量少、接觸面過小等，估計對麻疹病毒的分離亦有較大影響，再加上咽拭子標(biāo)本在保存、運(yùn)送等環(huán)節(jié)方面的因素，都影

15、響了麻疹病毒的分離。另外，在所采集的咽拭子標(biāo)本中，未采集血清標(biāo)本的比例較高，對病毒分離陰性的標(biāo)本來說，因缺乏血清學(xué)診斷聯(lián)系，給進(jìn)一步明確診斷帶來困難。值得注意的是，在861例血清標(biāo)本中，有263例其臨床癥狀為發(fā)熱、出疹，但麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體全部陰性，占30.54。這是否為其它小DNA病毒引起的出疹性病例在其中（如B19病毒）？因本次未做相關(guān)實驗，不好定論。但因其臨床癥狀與輕型風(fēng)疹極為相似，近年來已被引起重視。另外，不排除因采集血清標(biāo)本時間過早，IgM抗體尚未出現(xiàn)而造成漏診的可能。從采集時間分析，出疹后3天采樣130例，占49.43（130263）。這些標(biāo)本因未進(jìn)行復(fù)檢，將有部分IgM抗體被漏

16、檢（出疹后3天采樣IgM抗體陽性率61.46），從而造成漏診。因此，為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須嚴(yán)格血清標(biāo)本的采集，對于采集時間過早（3天內(nèi)）而IgM抗體陰性者，必須復(fù)檢，有條件時可開展B19病毒檢測，以更好地指導(dǎo)麻疹的控制工作。綜上所述，實驗室監(jiān)測在麻疹的控制工作中具有很重要的作用，但標(biāo)本的采集質(zhì)量對實驗結(jié)果有很大的影響，并最終影響麻疹病例的分類，因此，必須逐級加強(qiáng)對各專業(yè)人員在標(biāo)本采集方面的培訓(xùn)，提高標(biāo)本采集的質(zhì)量，保證實驗室檢測的準(zhǔn)確性。基金項目：山東省衛(wèi)生廳資助項目（9908）作者簡介：王常銀（1963），男，山東省濟(jì)寧市人，山東省衛(wèi)生防疫站檢驗技師，主要從事計劃免疫針對疾病的病毒學(xué)、血清學(xué)實驗室研究工作。王常銀(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)許青(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)徐愛強(qiáng)(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)王同展(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)宋立志(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)肖作奎(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)張麗(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)李漫時(山東省衛(wèi)生防疫站，濟(jì)南250014)許文波(中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所，北京100050)參考文獻(xiàn)：1郭可謇，宋光運(yùn)，張禮璧，等.應(yīng)