生物：1.2《實驗一 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定》（舊人教第一冊）

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2、密安排才能完成。如實驗中教師應做好學生的分工合作可縮短實驗時間。同時又能培養(yǎng)學生的合作精神。二、教學目標：知識目標：闡明實驗原理顏色反應，識記和區(qū)分用于可溶性還原糖、脂肪、蛋白質鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色，初步掌握鑒定上述化合物的基本方法，學會描述實驗現(xiàn)象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 能力目標：培養(yǎng)學生主動獲取知識，應用知識分析現(xiàn)象，歸納總結的能力，培養(yǎng)學生實際操作的能力及從現(xiàn)象出發(fā)探求事物本質的能力。 情感與價值目標：通過親手實驗體驗科學家嚴謹治學的科學態(tài)度，培養(yǎng)實事求是的世界觀。三、教學重點： 掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。四、教學難點： 實驗內

3、容較多，實驗時間長，必須周密安排，才能按時完成。 學生要分工合作、教師指導演示。五、材料用具： 實驗材料：葡萄糖液、蘋果組織液，植物油滴、浸泡過的花生種子或新鮮的花生種子，雞蛋蛋白稀釋液、黃豆組織液。 儀器：徒手切片刀，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，載玻片，蓋玻片，毛筆，吸水紙，顯微鏡。 試劑：斐林試劑，蘇丹染液或蘇丹染液，雙縮脲試劑A、雙縮脲試劑B，體積分數(shù)為50的酒精溶液，蒸餾水。六、教學過程：（一）實驗原理講解： 1可溶性還原糖鑒定原理 生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多，有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內都含有游離的具還原性的半縮醛羥

4、基，因此叫做還原糖；蔗糖分子內沒有，為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑，只能鑒定生物組織中可溶性還原糖，而不能鑒定可溶性非還原糖。 斐林試劑為一定濃度的氫氧化鈉和硫酸銅配制而成的淡藍色Cu(OH)2沉淀的懸濁液，葡萄糖溶液在加入斐林試劑后，在加熱條件下還原為磚紅色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應式為： CH2OH(CHOHH)4CHO + 2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH + Cu2O + 2H2O 用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液變化過程為；淺藍色棕色磚紅色沉淀 2脂肪鑒定原理 蘇丹、蘇丹為一種橙黃色脂肪染色劑。蘇丹染液遇脂肪的顏色反應為橘黃色，蘇丹染液遇脂肪的顏色反應為紅

5、色。 3蛋白質鑒定原理 將尿素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。 (尿素) (尿素) (雙縮脲) 雙縮脲在堿性環(huán)境中能和硫酸銅結合成紅紫色的絡化物。蛋白質分子中含有的肽鍵結構與雙縮脲結構相似，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應：CONH（類似雙縮尿H2NOCNHCONH2結構）酸性條件下與Cu2+作用形成紫色絡合物雙縮脲反應（二）、操作指導：1.實驗成功的關鍵在于實驗材料的選擇。 “生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗，實際上是三個獨立的實驗。在實驗中，如注意以下問題，則效果會很好。 在做可溶性還原糖的鑒定實驗中，最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官)，而且

6、組織的顏色較淺，最好是白色或近于白色的植物組織，這樣可以避免材料自身顏色對實驗變化顏色的掩蓋。經(jīng)實驗比較，顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。 在做脂肪的鑒定實驗中，實驗材料最好選用富含脂肪的種子，且徒手切片要成功，要求實驗技能較高，不妨改成刮取花生子葉泥制作臨時裝片，易做，效果又好。 在做糖和蛋白質的實驗時，最好選用富含蛋白質的生物組織，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋，鑒定之前需要留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色做比較，這樣可增強說服力。2.注意事項：(1)斐林試劑很不穩(wěn)定，故應將組成斐林試劑的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL

7、的CuSO溶液)分別配制、儲存，使用時，再臨時配制，將45滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。(2) 鑒定可溶性還原糖，加熱試管時，應該用試管夾夾住試管上部，放入盛開水的大燒杯加熱；注意試管底部不接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以提起試管夾，使試管與沸水接觸面減少，以免溶液溢出。(3) 在鑒定脂肪的實驗中，若用花生種子作實驗材料，必須提前浸泡34小時，浸泡時間短了，不容易切片，浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形，切片要盡可能的薄。(4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去

8、浮色，染色和洗浮色時間不宜過長（否則酒精將脂肪溶解影響實驗效果），觀察時找最薄處最好只有12層細胞。(5)在蛋白質的鑒定實驗中，若用蛋白質作實驗材料，必須稀釋，如果稀釋不夠，與雙縮脲試劑發(fā)生反應后會粘固在試管內壁上，使反應不徹底，且試管不易洗刷干凈。 雙縮脲試劑的使用，應先加試劑A(0.1g/mL的NaOH溶液)，造成堿性的反應環(huán)境，再加試劑B(0.01g/mL的CuSO溶液)。（三）、方法步驟 教師把事先配制好已知待測樣品，葡萄糖液、植物油滴、雞蛋蛋白稀釋液讓學生按要求加入相應試劑，觀察顏色變化。磚紅色、橘黃色、紫色。然后分別鑒定生物組織中的三種物質。1、 可溶性還原糖的鑒定取材：含糖量較高

9、的白色或近于白色的組織（排除色素對顯色的干擾）約5克。制備組織樣液：加黃砂（充分研磨）、5ml水（溶解可溶性糖），研磨、過濾 取2ml組織樣液加入試管中顯色反應 加2ml剛配好的斐林試劑（用前混勻，加入溶液時呈藍色） 隔水加熱，煮沸2 min觀察結果：溶液中出現(xiàn)磚紅色沉淀2、脂肪的鑒定取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片選取最薄的薄片移至載玻片中央染色：滴加蘇丹 （蘇丹）染液23滴制片 洗去浮色：用吸水紙吸去花生子葉薄片周圍的染液，滴加體積分數(shù)為50%的酒精溶液12滴（溶解有機物）用吸水紙吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片 顯微鏡觀察：先在低倍顯微鏡下找到花生子葉的

10、最薄處，移至視野中央，再用高倍鏡觀察，可看到已著色的圓形小顆粒(注意指導學生使用高倍顯微鏡的方法) 結果：有橘黃色（或紅色）的脂肪微粒3、蛋白質的鑒定制備組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋白稀液）黃豆浸泡 去皮切片研磨過濾濾液 取組織樣液2ml加入試管顯色反應 加入雙縮尿試劑A 0.1g/mLNaOH 2ml 創(chuàng)設堿性條件 搖蕩均勻 再加入雙縮尿試劑B 0.1g/mLCuSO4 34滴 提供Cu2+搖蕩均勻觀察：蛋白質與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應，溶液變成紫色（四）、結論與討論 1結論：上述實驗證明蘋果果肉中、花生種子中、黃豆組織中各存在什么樣物質? 答：可溶性還原糖、脂肪、蛋白質。 2討論：為什么根

11、據(jù)某些化學反應能夠使生物組織中的有關有機物產(chǎn)生固定的顏色反應可以鑒定生物組織有糖、脂肪、蛋白質的存在? 因為某些化學試劑與生物組織中的化合物發(fā)生一定的化學反應后，可產(chǎn)生新的化合物，而這種化合物是有固定的顏色的。因此，根據(jù)待檢測物與某些化學試劑反應的固有顏色，如磚紅色、橘黃色、紫色等?？梢澡b定生物組織中存在有糖、脂肪、蛋白質。3. 做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗時，需要根據(jù)實驗需要選擇不同的實驗材料。清根據(jù)下表所列各種材料回答問題： 各種可供實驗的材料 梨 黃桃 胡蘿卜 黃豆花生種子小麥種子其中適合于鑒定糖的是 ，理由是 ，你打算用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適合

12、用來鑒定脂肪，這是因為 ，你打算用什么試劑鑒定? 適合于鑒定蛋白質的是 ，理由是 ，鑒定所用的試劑是 。 答案：梨 梨的組織細胞顏色為白色，并且糖含量較高 斐林試劑或班氏試劑。小麥種子的脂肪含量不如花生種子高，也不容易做切片 用蘇試劑鑒定。黃豆和花生 蛋白質含量高 雙縮脲試劑。（五）、實驗效果檢查與評定 銀幕顯示檢測題 1、某些單子葉植物，如韭菜、鳶尾的葉子內含有大量的可溶性還原糖，但這些單子葉植物的葉子不宜作實驗材料，原因是：答案：這些葉子的顏色較深，對還原性糖與斐林試劑的顏色反應起遮蔽作用2、下列哪組試劑在使用過程中，必須加熱：A.斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程中B.蘇丹染液在鑒定動物組織

13、中的脂肪時C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質時D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時 3、某學生在鑒定脂肪的實驗中，在顯微鏡下觀察花生子葉切片，當轉動細調節(jié)器時，有一部分細胞看的清楚，另一部分較模糊，這是由于：A.反光鏡未調節(jié)好    B.標本切的厚薄不均 C.細調節(jié)器未調節(jié)好D.顯微鏡物鏡損壞 4、蘇丹溶液的配制的方法是： 稱取0.1g蘇丹干粉，溶于100mL酒精的體積分數(shù)為95溶液中，待全部溶解后再使用，為什么用酒精而不用蒸餾水？ 答案：蘇丹染液易溶解于酒精中 ，不易溶解于水。5、鑒定蛋白質樣品時加雙縮脲試劑的正確做法是 A先加A液，混合后再加B液搖勻觀察B先加B液，混合后再加A液搖勻觀察CA、B混合后加入，搖勻觀察DA、B液同時加入樣液，搖勻后觀察 6、在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗中，對實驗材料的選擇中，錯誤的是：A、甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等，都含有較多的糖且近于白色，因此可用于進行可溶性還原糖的鑒定B、花生種子含脂肪多且子葉肥厚，適用于脂肪鑒定C、大豆種子蛋白質含量高，可用于蛋白質的鑒定D、 雞蛋清含蛋白質多，是蛋白質鑒定的理想材料 （六）、布置作業(yè) 1將可溶性糖、脂肪、蛋白質鑒定原理及結淪填寫在實驗報告冊上。 2斐林試劑主要用來鑒定可溶性還原糖