范式纖維素測定法

1、附錄 Van Soest法測定物料中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的含量原理:植物性樣品經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細(xì)胞壁成分，其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。植物性樣品經(jīng)酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素（ADL ）的含量。材料：烘干至恒重粉碎并過篩（40目）的水葫蘆及其它植物樣品試劑：十二烷基硫酸鈉（AR ）、乙二胺四乙酸二鈉(AR、無

2、水磷酸氫二鈉(AR、硫酸(AR、十六烷三甲基溴化銨(AR、乙二醇乙醚(AR、十氫化萘、無水亞硫酸鈉(AR、丙酮(AR。一、 實驗內(nèi)容（一）溶劑的配制1、中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）的配制：準(zhǔn)確稱取18.6g 乙二胺四乙酸二鈉（EDTA ，C 10H 14O 8Na 22H2O ，分析純）和6.8g硼酸鈉 （Na 2B 4O 710H2O ，分析純）放入燒杯中，加入少量蒸餾水，加熱溶解后，再加入30.0g 十二烷基硫酸鈉（C 12H 25NaO 4S ，分析純）和 10ml乙二醇乙醚（C 4H 10O 2，分析純）；再稱取4.56 g無水磷酸氫二鈉（Na 2HPO 4，分析純）置于另一燒杯中

3、，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后，倒入前一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml ，其中pH 值約為6.97.1（pH 值一般勿需調(diào)整）；2、1N 硫酸溶液的配制：量取約27.87 ml 濃硫酸（分析純，比重1.84，98%），徐徐加入已裝有500ml 蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000ml 容量瓶定容，標(biāo)定；3、酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）的配制：稱取20g 十六烷三甲基溴化銨（CTAB ，分析純）溶于1000ml1N 硫酸，必要時過濾；4、72%硫酸溶液的配制：（濃硫酸：水=36:13）（二）測定過程詳細(xì)操作步驟1. 中性洗滌纖維測定準(zhǔn)確稱取1.0000g 樣品（通過40目篩）置于直

4、筒燒杯中，加入100ml 中性洗滌劑。將磨口圓底燒瓶套上冷凝裝置于電爐上，在510min 內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min 。煮沸完畢后，取下直筒燒杯，將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的已知重量的玻璃坩堝中進行過濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。用20ml 丙酮沖洗二次，抽濾。將玻璃坩堝置于105烘箱中烘2h 后，在干燥器中冷卻30 min稱重，直稱至恒重。2. 酸性洗滌纖維測定準(zhǔn)確稱取1.0000g 樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100 ml 酸性洗滌劑。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在510min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min 。趁熱用已

5、知重量的玻璃坩堝抽濾，并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止，并抽凈丙酮。將玻璃坩堝置于105烘箱中烘2h 后，在干燥器中冷卻30 min 稱重，直稱至恒重。3. 酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分（AIA ）測定將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，在20消化3h 后過濾，并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素，不溶解的殘渣為酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分，將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分的含量。（三）測定過程流程圖 二、 實驗結(jié)果及數(shù)據(jù)處理中性洗滌纖維含量的計算：NDF （%）=（W1W2）/ W100式中：W1玻璃坩堝和NDF 重（g ） W2玻璃坩堝重（g ） W試樣重（g ）； 酸性洗滌纖維含量的計算：ADF （%）=（G1G2）/G100式中：G1玻璃坩堝和ADF 重（g ） G2玻璃坩堝重（g ） W試樣重（g ）； 半纖維素含量的計算：半纖維素（%）=NDF（