參麥注射液質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究

1、 參麥注射液含量測(cè)定項(xiàng)的修訂色譜分析方法參麥注射液制備直接移取參麥注射液,平行份,進(jìn)樣量林。標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制各取,置于容量瓶中,用甲醇溶解,定容至。密封低溫保存。儀器型高效液相色譜儀,配四元梯度泵、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測(cè)器。色譜分析方法色譜柱為一柱,林,公司, ,柱溫,檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng),流動(dòng)相流速為,梯度洗脫程序?yàn)槠渲辛姿嵋凰?乙睛,。在上述色譜條件下,三組分按保留時(shí)間先后出峰順序?yàn)槿藚⒃砦?、?組分得到良好分離,相鄰峰分離度皆大于。參麥注射液譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品譜圖如圖一所示。 圖一參麥注射液及對(duì)照品色譜圖按洗脫順序,從左到右依次為,和方法學(xué)驗(yàn)證方法精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品

2、溶液,連續(xù)進(jìn)樣次,測(cè)定種成分含量,計(jì)算各自的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,考察方法的精密度取同一批次參麥注射液,平行配置供試品溶液份,計(jì)算 表一回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果人參皂昔人參皂昔人參皂普含量伽留回收率含量伽創(chuàng)回收率含量單留回收率勺尸了、曰勺口,山,夕,弓氣乙尹滬一戶樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品戈曰哎月呼內(nèi),”甘月峙氣嶺月峙,甘、公內(nèi)乙,山,勺,山呂三勺幾二口曰二皿二畢曼華,·,·“”、林歲夕加標(biāo)準(zhǔn)品林歲回收率陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)取麥冬中間體按條件進(jìn)行分析,與參麥注射液譜圖對(duì)照,所得鏡像圖如圖一可見(jiàn)參麥注射液中麥冬中間體成分對(duì)含量測(cè)定的人參皂昔成分分析無(wú)干擾。 圖一參麥注射液譜圖和麥冬中間體譜圖的比對(duì)耐

3、用性實(shí)驗(yàn)柱溫條件不同在流動(dòng)相梯度條件和進(jìn)樣條件相同的情況下,分別選定柱溫條件為,和,考察柱溫的變化對(duì)參麥注射液圖譜的影響。結(jié)果表明柱溫在一范圍內(nèi),三種人參皂昔、和皆與相鄰峰分離良好,分離度都在以上。圖一分別顯示了一一一一一一一一一一一一一進(jìn)性竺柱溫為、時(shí)測(cè)得的圖譜。 圖一不同柱溫條件下參麥注射液樣品色譜圖流速在流動(dòng)相梯度條件和進(jìn)樣條件相同的情況下,分別選定流動(dòng)相流速為血,和,考察流速的變化對(duì)參麥注射液圖譜的影響。結(jié)果表明流速在一范圍內(nèi),三種人參皂昔、和皆與相鄰峰分離良好,分離度都在以上。圖一顯示了流速為,而和時(shí)測(cè)得的圖譜。圖一不同流速條件下參麥注射液樣品色譜圖不同廠家及不同批號(hào)色譜柱在流動(dòng)相梯

4、度條件和進(jìn)樣條件相同的情況下,使用不同批號(hào)的及一柱,三種人參皂昔、和皆分離良好,分離度都在以上。見(jiàn)圖一。 經(jīng)實(shí)驗(yàn),條件在一定變動(dòng)范圍內(nèi)能保證測(cè)定結(jié)果不受影響,方法適用。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取正大青春寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的樣品批號(hào),于室溫放置、個(gè)月,分別進(jìn)行含量測(cè)定,表一和圖一結(jié)果顯示,本品的室溫穩(wěn)定性良好。表一參麥注射液含里測(cè)定月間穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果月份人參皂昔林創(chuàng)皂昔林創(chuàng)山參皂普”創(chuàng) 參麥注射液樣品含量測(cè)定結(jié)果制備供試品溶液,進(jìn)樣林,二。以外標(biāo)法計(jì)算參麥注射液中人參皂昔和的含量。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表一。 實(shí)驗(yàn)條件儀器型高效液相色譜儀色譜柱漢邦色譜柱“,。試劑乙睛色譜純,優(yōu)級(jí)純,超純水一純水處理系統(tǒng)。參麥注射液藥材、

5、中間體和制劑色譜流動(dòng)相梯度條件川如表一所示其中。比的水溶液,乙睛水溶液。檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)。所得指紋圖譜及考察的色譜峰如圖一所示。表一參麥注射液指紋圖譜的洗脫梯度時(shí)間 紅參藥材對(duì)照指紋圖譜研究實(shí)驗(yàn)方法參照高效液相色譜法中國(guó)藥典年版一部附錄測(cè)定。紅參藥材指紋圖譜分析參照參麥注射液的檢測(cè)條件。供試品制備準(zhǔn)確稱取紅參藥材粉末,加乙醉,稱重,加熱回流,冷卻,補(bǔ)足損失的重量,過(guò)濾即得。測(cè)定法分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各林,分別注入液相色譜儀測(cè)定。數(shù)據(jù)處理方法供試品指紋圖譜相似度與所附的對(duì)照指紋圖譜經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)計(jì)算所得。紅參藥材指紋圖譜方法學(xué)研究精密度取同一份紅參提取液,連續(xù)進(jìn)樣次

6、,分別考察了如圖一中個(gè)主要色譜峰面積的及其保留時(shí)間的平均偏差。這個(gè)峰的相對(duì)峰面積皆小于,相對(duì)保留時(shí)間偏差小于,具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表一,精密度良好。 圖一紅參藥材指紋圖譜精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表一紅參藥材指紋圖譜精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果 重復(fù)性取同一批號(hào)紅參制備樣品份,分別制成供試品溶液分析,計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的,結(jié)果見(jiàn)圖一和表一。相對(duì)保留時(shí)間的,相對(duì)峰面積的,表明該方法重復(fù)性良好,符合指紋圖譜分析要求。 圖一紅參藥材指紋圖譜重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表。紅參藥材指紋圖譜重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果 穩(wěn)定性取紅參供試品溶液,在小時(shí)內(nèi)進(jìn)樣次,計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的,結(jié)果見(jiàn)圖一和表一。相對(duì)保留時(shí)間的,相對(duì)峰面積的,表明紅參供試品溶液

7、在小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 圖一紅參藥材指紋圖譜穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表一紅參藥材指紋圖譜穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果 紅參藥材對(duì)照指紋圖譜收集個(gè)廠家所采用的紅參藥材共批,進(jìn)行分析后所得譜圖如圖一所示。利用指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),計(jì)算批藥材指紋圖譜的平均值,作為對(duì)照指紋圖譜,如圖一。 圖批紅參藥材指紋圖譜 圖一紅參藥材對(duì)照指紋圖譜采用相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)計(jì)算批紅參藥材指紋圖譜的相似度,表一結(jié)果表明相似度很高,除了一批紅參藥材指紋圖譜相似度為外,其余均在以上,不同廠家采用的紅參藥材相差不大。表一批紅參藥材指紋圖譜相似度螃儷藥材指紋圖譜的建立是為了控制制劑生產(chǎn)所用藥材的質(zhì)量,同時(shí)也為制劑指紋圖譜相關(guān)性提供基礎(chǔ)。紅參中間體對(duì)照指紋圖譜研究

8、實(shí)驗(yàn)方法紅參中間體指紋圖譜分析按照紅參藥材檢測(cè)條件。紅參中間體為紅參藥材按照生產(chǎn)工藝以乙醇提取濃縮過(guò)濾得到的溶液,主要含有人參皂昔等成分。測(cè)定法分別精密吸取參照物溶液和本品各林,分別注入液相色譜儀,測(cè)定。數(shù)據(jù)處理方法供試品指紋圖譜相似度與所附的對(duì)照指紋圖譜為經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)計(jì)算所得。紅參中間體指紋圖譜方法學(xué)研究精密度取同一紅參中間體樣品,連續(xù)進(jìn)樣次,計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的,結(jié)果見(jiàn)圖一和表。相對(duì)保留時(shí)間的巧,相對(duì)峰面積的,表明該方法精密度良好。圖一紅參中間體指紋圖譜精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表一紅參中間體指紋圖譜精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果峰號(hào)相對(duì)保留時(shí)間相對(duì)峰面積 尸凡內(nèi)丹產(chǎn)幾內(nèi)了,月了,尸,門(mén)

9、臼了,八,魷幾氣,衛(wèi)勺,月了月呀氣矛八一產(chǎn)幾凡產(chǎn)幾勺,幾了矛工矛八八矛連月呀,內(nèi),內(nèi),山飛曰凡、內(nèi),穩(wěn)定性取紅參中間體樣品,在小時(shí)內(nèi)進(jìn)樣次,計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的,結(jié)果見(jiàn)圖一和表。相對(duì)保留時(shí)間的,相對(duì)峰面積的,表明紅參中間體樣品溶液在小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文重復(fù)性取同一批號(hào)紅參中間體樣品份,分別進(jìn)樣分析,計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的,結(jié)果見(jiàn)圖一和表一。相對(duì)保留時(shí)間的,相對(duì)峰面積的,表明該方法重復(fù)性良好,符合指紋圖譜分析要求。 圖一紅參中間體指紋圖譜重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果 浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文閃石。丹甲卜內(nèi),內(nèi)幾,名腸了月呼八巧紅參中間體對(duì)照指紋圖譜研究收集個(gè)廠家所采用的紅參中間體共

10、批,分析結(jié)果如下圖一所示。利用指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),生成紅參中間體對(duì)照指紋圖譜如圖一。 圖一不同廠家紅參中間體指紋圖譜浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文圖一紅參甲體對(duì)照指紋圖諳以國(guó)家藥典委頒布的中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),對(duì)不同批次紅參中間體指紋圖譜進(jìn)行相似度計(jì)算,結(jié)果見(jiàn)表一。不同批次中間體相似度較高,除兩批中間體相似度為和,其余均大于。表。不同批次紅參中間體指紋圖譜相似度計(jì)算結(jié)果參麥注射液對(duì)照指紋圖譜收集個(gè)廠家所采用的參麥注射液共批,分析結(jié)果如下圖一所示。利用指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),生成參麥注射液對(duì)照指紋圖譜如圖。 圖一批不同廠家參麥注射液指紋圖譜 圖一參麥注射液對(duì)照指紋圖譜以國(guó)家藥典委頒布的中藥色

11、譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng),對(duì)不同批次參麥注射液指紋圖譜進(jìn)行相似度計(jì)算,結(jié)果見(jiàn)表一。不同批次參麥注射液相似度較高,除其中幾批相似度略低于,其余均在以上。表一不同批次參麥注射液指紋圖譜相似度計(jì)算結(jié)果,可見(jiàn)不同廠家參麥注射液指紋圖譜相似度差異很大同一廠家內(nèi)部產(chǎn)品批次之間質(zhì)量差異較小,穩(wěn)定均一。參考文獻(xiàn)川崔勤敏參麥注射液指紋圖譜分析與工藝研究浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文, 表一批參麥注射液含量測(cè)定結(jié)果卜留注射劑生產(chǎn)企業(yè)批號(hào)一月呀八矛戈甘,了產(chǎn)勺,、曰廠家廠家一,勺月峙玲夕臺(tái)產(chǎn)比比一“一甘飛,廠家一一一一一廠家廠家 討論對(duì)含量測(cè)定和指紋圖譜分析數(shù)據(jù)進(jìn)一步分析,以比較不同分析技術(shù)和數(shù)據(jù)處理方法的特點(diǎn)。指紋圖譜測(cè)定

12、結(jié)果分析樣本集共有個(gè)樣本,分別來(lái)自個(gè)不同生產(chǎn)廠家,指紋圖譜中共有峰共計(jì)個(gè)。結(jié)果直接進(jìn)行主成分分析后得圖一,其中主成分的貢獻(xiàn)率為,主成分的貢獻(xiàn)率為。從圖中可以看出,指紋圖譜數(shù)據(jù)對(duì)于廠家產(chǎn)品的分類效果較好廠家產(chǎn)品較分散廠家產(chǎn)品的類內(nèi)距離較大,使得其、和號(hào)產(chǎn)品與廠家產(chǎn)品混淆,不能實(shí)現(xiàn)較好的分類。 甲一一廠家,一一廠家,一一廠家,一一廠家,一廠家。含量測(cè)定結(jié)果分析含量測(cè)定指標(biāo)為個(gè)化合物,得到一個(gè)數(shù)據(jù)集,用分析后得圖一,其中主成分的貢獻(xiàn)率為,主成分的貢獻(xiàn)率為。從圖中可以看出,運(yùn)用含量測(cè)定數(shù)據(jù),可以將大多數(shù)樣本很好的區(qū)分開(kāi),但樣本和樣本錯(cuò)分,廠家和廠家產(chǎn)品未達(dá)到分類效果,且同一廠家樣本的類內(nèi)距離同樣較大。

13、含量測(cè)定結(jié)果與指紋圖譜分析結(jié)果融合將指紋圖譜數(shù)據(jù)與含量測(cè)定數(shù)據(jù)分別標(biāo)準(zhǔn)化后,串聯(lián)得到、數(shù)據(jù)集,進(jìn)行主成分分析,結(jié)果如圖一所示。其分類結(jié)果與指紋圖譜數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果相似。原因在于指紋浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文圖譜數(shù)據(jù)的維數(shù)遠(yuǎn)大于含量測(cè)定數(shù)據(jù)的維數(shù),簡(jiǎn)單的像素級(jí)融合不能提高分類能力。圖一甲。一廠家,像素級(jí)串聯(lián)融合計(jì)算得到不同廠家參麥注射液一圖··廠家,一一廠家,一一廠家,·廠家因此我們又采用特征級(jí)數(shù)據(jù)融合。它的基本方法是先對(duì)色譜指紋圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行特征提取,得到能夠表示的原始化學(xué)指紋特征的特征向里,再與表示化學(xué)組成特征的含量測(cè)定向量進(jìn)行特征級(jí)融合,結(jié)果如圖一所示。將融合特征進(jìn)行系統(tǒng)

14、聚類,如圖一。圖一特征級(jí)融合計(jì)算得到不同廠家參麥注射液的一圖守一一廠家·一廠家,一一廠家,一一廠家,廠家從圖中可知廠家一,廠家·,除樣本離散廠家一,廠 相似度,以此為指標(biāo)考察溶劑倍數(shù)、溶劑濃度、提取時(shí)間和提取次數(shù)等工藝參數(shù)與色譜指紋圖譜間的相關(guān)性。結(jié)果見(jiàn)表一。表一不同工藝所得樣品的指紋圖譜相似度值相似度值尹、以八八產(chǎn)。,了挑一了、門(mén)分卜喇八曰弓八內(nèi)一一工藝參數(shù)溶劑倍數(shù)溶劑濃度提取時(shí)間提取次數(shù)。利用三次樣條函數(shù)建立指紋圖譜以相似度表示和工藝參數(shù)相關(guān)性的模型。圖一分別給出了指紋圖譜隨溶劑倍數(shù)、溶劑濃度、提取時(shí)間和提取次數(shù)等工藝參數(shù)波動(dòng)的變化情況。以溶劑倍數(shù)為例圖一,隨著溶劑倍數(shù)的增加,指紋圖譜相似度先快速增大溶劑倍數(shù)達(dá)到一定量后,