_葉綠素的提取和分離_實(shí)驗(yàn)的一種方法

1、 液, 取一條三齡幼蟲置于液滴中, 在體視鏡(或肉眼直觀 下, 左手持尖鑷子或解剖針壓住蟲體前1 31 2處, 右手持解剖針或1號(hào)縫衣針壓住器處, 左手緩慢向前用力拉出, 左手適當(dāng)向前擠壓, 唾腺即被拉出, 除去其余組織, 吸去多余水分。5. 4染色在載玻片的唾腺上滴加23滴改良苯酚品紅染液, 25下靜置染色半小時(shí)即可。5. 5壓片染色后, 滴一滴45%醋酸(分色用, 可使背景無色 立即加蓋玻片(勿使用氣泡 , 拇指適度用力垂直下壓, 染色體即可分散開, 壓好的片子可用于直接(顯微鏡下 觀察唾腺染色體。也可以選擇那些較好的臨時(shí)裝片(分散開的5條染色體臂、橫紋清晰 制成永久片長期保存?zhèn)溆谩?果蠅

2、的雜交試驗(yàn)如有可能教師可事先準(zhǔn)備一些具性狀的果蠅突變類型如檀黑體、殘翅、白眼等, 讓學(xué)生在前面幾個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行果蠅雜交試驗(yàn), 以驗(yàn)證分離規(guī)律(1對因子 , 自由組合規(guī)律(2對因子 , 伴性遺傳(X 連鎖 等。此實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意必須在教師嚴(yán)格的指導(dǎo)下進(jìn)行, 要選取處女蠅為材料做雜交, 否則易出錯(cuò)誤結(jié)論。7幾點(diǎn)說明7. 1此系列實(shí)驗(yàn)不需太多儀器、設(shè)備, 便于操作, 非常適合于小學(xué)、初中和高中學(xué)生進(jìn)行課外活動(dòng), 內(nèi)容可依據(jù)學(xué)生及客觀條件取舍。前4個(gè)實(shí)驗(yàn)比較適合高年級(jí)小學(xué)及初中生做, 后兩個(gè)實(shí)驗(yàn)高中生則可以完成。7. 2實(shí)驗(yàn)14的方法, 同樣適用于其他昆蟲的采集、飼養(yǎng)、形態(tài)觀察、生活史觀察、臨時(shí)裝片和永

3、久片制作等, 由此可以極大地豐富學(xué)生的生物課外活動(dòng)內(nèi)容, 還可以為生物實(shí)驗(yàn)室制作一定數(shù)量的標(biāo)本。7. 3進(jìn)行生活史觀察時(shí), 還可改變其他生活條件如培養(yǎng)基pH 值、滲透勢、水分含量和瓊脂含量等, 觀察比較各種外部因素對生活周期的影響。通過此系列實(shí)驗(yàn), 不僅使學(xué)生驗(yàn)證了課堂所學(xué)到的知識(shí), 還能提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能和生物學(xué)素質(zhì), 對于培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)研究興趣和意識(shí)都具有積極的作用?！叭~綠素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)的一種方法我們以燈芯柱紙層析法為基礎(chǔ), 進(jìn)行該實(shí)驗(yàn), 取得了較好的效果, 現(xiàn)介紹如下。具體的方法是:取洗凈、5g 剪碎, 加85%丙酮5l ; 2. 5c m ×5. 5, 卷成柱狀, ,

4、(不用汽油 , 紙芯下端浸入四氯化碳中; 用尖鑷夾取研好的色素勻漿均勻堆于紙芯周圍, 蓋上皿蓋, 靜置觀察。15m in 左右色素可充分?jǐn)U展, 分離結(jié)束。此實(shí)驗(yàn)方法具有以下特點(diǎn):克服了提取液中色素量少的缺點(diǎn), 層析后, 4種色素在濾紙上形成清晰可見的4個(gè)同心圓。其分布由外及里依次為胡蘿卜素(橙黃色 、葉黃素(黃色 、葉綠素a (藍(lán)綠色 、葉綠素b (黃綠色 ; 分離速度的快慢與紙芯的粗細(xì)相關(guān)。紙芯捻得越細(xì)越實(shí), 其分離速度越慢, 反之則快, 由此可對分離的速度加以控制; 分離的葉綠素a 的色帶寬度可達(dá)0. 30. 5c m , 且與葉綠素b 的色帶之間有約1mm 的分界。因此能夠提高葉綠素a

5、和葉綠素b 提取的純度和濃度。池春玉丁國華徐啟江(黑龍江農(nóng)墾師范專科學(xué)校生物系黑龍江阿城150301“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)方法1提取色素為了得到墨綠色的色素濾液, 于實(shí)驗(yàn)前23天, 取質(zhì)地柔軟、深綠色的草本植物的葉片放在通風(fēng)處陰干。研磨時(shí), 所取葉片要除去粗的葉脈和葉柄。向研缽中加入少量二氧化硅和碳酸鈣, 進(jìn)行研磨。待研, 就出現(xiàn)了深用毛細(xì)吸管吸取色素濾液, 采用毛筆的執(zhí)筆方式握住毛細(xì)吸管, 懸腕, 沿濾紙條上的鉛筆劃線作快速的劃動(dòng), 重復(fù)23次, 就可以得到細(xì)、勻、齊的濾液細(xì)線。3分離色素3. 1采用小試管法取長15c m 、直徑15mm 的小試管, 試管塞用橡皮塞。在橡皮塞的中央

6、用刀片刻一細(xì)槽, 然后將劃過濾液細(xì)線的濾紙條無色素的一端, 插入橡皮塞的細(xì)槽中。向小試管內(nèi)加入3. 5m l 層析液, 將濾紙條慢慢地垂直插入層析液中, 橡皮塞要塞緊小試管。注意濾液細(xì)線不能沒及層析液。3. 2采用培養(yǎng)皿法不用濾紙條, 也不劃濾液細(xì)線, 而取直徑為11c m 的干燥圓形定性濾紙, 用毛細(xì)吸管吸取色素濾液, 在濾紙的中央點(diǎn)成圓形的色素斑。重復(fù)45次。然后取一枚縫衣針, 穿一條細(xì)棉線, 在棉線末端打個(gè)結(jié), 將針穿過濾紙上的色素斑中心, 在距線結(jié)約4c m 處剪斷棉線。取直徑10c m 的培養(yǎng)皿一套, 向培養(yǎng)皿底中加入5m l 層析液。把上述圓形濾紙扣在培養(yǎng)皿底上面, 無線結(jié)的一面朝下, 棉線則浸沒在層析液中。再將培養(yǎng)皿蓋蓋在濾紙上。采用該方法, 可以看到色素隨層析液由線結(jié)處向周圍均勻擴(kuò)散。因此得到的4條色素帶呈同