水產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)ppt課件

1、12l獸藥獸藥殘留概述殘留概述l前處理技術(shù)前處理技術(shù)l液質(zhì)分析殘留方法的建立步驟液質(zhì)分析殘留方法的建立步驟l方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證l能力驗(yàn)證思路和經(jīng)驗(yàn)?zāi)芰︱?yàn)證思路和經(jīng)驗(yàn) 3 獸藥殘留（animal drug residues）是指給動(dòng)物使用藥物后蓄積或貯存在細(xì)胞、組織或器官內(nèi)的藥物原形、代謝產(chǎn)物和藥物雜質(zhì)。4 農(nóng)業(yè)部193號(hào)公告獸藥禁用清單有21類，包括硝基呋喃類，孔雀石綠類，氯霉素類，汞制品類等，出口水產(chǎn)品重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的獸藥還包扣磺胺類，喹諾酮類，大環(huán)內(nèi)酯類，青霉素類，四環(huán)素類等。出口指定的獸藥檢測(cè)項(xiàng)目要求不得檢出。5獸藥殘留超標(biāo)的主要原因1、非法使用違禁藥品2、不遵守休藥期，中國(guó)獸藥典。 3、其他原

2、因如飼料加工的交叉污染，動(dòng)物個(gè)體代謝差異等。 6 對(duì)獸藥殘留實(shí)施監(jiān)控是一種復(fù)雜的系統(tǒng)工程，包括從藥物研制、注冊(cè)登記、生產(chǎn)、使用及食品和環(huán)境監(jiān)測(cè)等諸多環(huán)節(jié)。建立殘留分析方法和制定最高殘留限量、休藥期是最基本的方面。 目前國(guó)內(nèi)頒布的法定檢測(cè)方法還缺乏系統(tǒng)性和完善性，其他危害性比較大，特別是出口歐盟產(chǎn)品必須要檢測(cè)的品種如抗甲狀腺制劑、類固醇類、硝基咪唑類藥物、精神類藥物、抗蠕蟲(chóng)藥物、環(huán)境污染物等的檢測(cè)方法尚在研究之中。 2002年農(nóng)業(yè)部再次對(duì)已發(fā)布的獸藥最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了修訂并重新發(fā)布，此次共規(guī)定了134種獸藥的動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。 隨著獸藥科技的發(fā)展，新獸藥品種還會(huì)不斷出現(xiàn)，因此

3、需要不斷地制定和修訂在水產(chǎn)品的獸藥最高殘留限量規(guī)定及相應(yīng)的殘留檢測(cè)方法。7 獸藥殘留檢測(cè)涉及到穩(wěn)定性試驗(yàn)方法，提取方法，凈化方法，測(cè)定方法(分離方法檢測(cè)方法)。 81.文獻(xiàn)檢索 文獻(xiàn)檢索僅能顯示最適宜的分析方法可能是什么，提供樣品處理，分離和檢測(cè)方面粗略信息，進(jìn)行方法的比較和借鑒，調(diào)整具體的實(shí)驗(yàn)條件，改進(jìn)和建立符合要求的新方法。如針對(duì)新對(duì)象或采用新技術(shù)，可以從較早的化學(xué)合成文獻(xiàn)得到待測(cè)物的物理性質(zhì)或分離方面的原始資料，或從具有相近結(jié)構(gòu)或官能團(tuán)化合物的方法方法中獲得某些信息和提示。有現(xiàn)成標(biāo)準(zhǔn)方法的采用現(xiàn)成標(biāo)準(zhǔn)方法（驗(yàn)證）。2.建立測(cè)定方法 建立測(cè)定方法和線性范圍，為后續(xù)的各種工作提供分析手段，最

4、后根據(jù)干擾和使用情況逐步確立測(cè)定條件和建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。如獸殘及代謝物屬中等極性或較高極性化合物，不能直接進(jìn)行GC分析，HPLC常用的檢測(cè)器有紫外（UVD），熒光（FLD，共軛雙烯）,電化學(xué)（EehlD）。MS為非常規(guī)檢測(cè)器。93.建立樣品處理方法 提取，凈化，衍生4.標(biāo)準(zhǔn)曲線 LC-MS/MS要求設(shè)4個(gè)點(diǎn)，相關(guān)系數(shù)大于0.995，有外標(biāo)（基質(zhì)匹配法）和內(nèi)標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)加入法，基質(zhì)匹配法。5.穩(wěn)定性試驗(yàn) 一般包括標(biāo)準(zhǔn)溶液（溶劑）和樣品中貯存條件下的穩(wěn)定性試驗(yàn)，如室溫，冷凍，反復(fù)冷凍-解凍條件下的穩(wěn)定性。6.方法評(píng)價(jià) 準(zhǔn)確度，精密度，靈敏度等。10 樣品處理方法涉及的因素很多，操作復(fù)雜，方法靈活，直接影響

5、各項(xiàng)分析指標(biāo)、成樣品處理方法涉及的因素很多，操作復(fù)雜，方法靈活，直接影響各項(xiàng)分析指標(biāo)、成本和效率，一般占本和效率，一般占70%的分析工作量。的分析工作量。11 常用的提取溶劑有乙腈，甲醇，丙酮，這些溶劑與水，稀酸，稀堿的混合溶劑如乙腈常用的提取溶劑有乙腈，甲醇，丙酮，這些溶劑與水，稀酸，稀堿的混合溶劑如乙腈- -甲醇，甲醇，氯仿氯仿- -甲醇，乙腈甲醇，乙腈- -水，或酸化，堿化等。乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚和叔丁基甲醚。水，或酸化，堿化等。乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚和叔丁基甲醚。叔丁基甲醚可代替鹵代溶劑。叔丁基甲醚可代替鹵代溶劑。 12l乙腈，甲醇，丙酮與樣品容易結(jié)合，溶劑化作用和滲

6、透能力強(qiáng)，粘度小，提取速度快，能乙腈，甲醇，丙酮與樣品容易結(jié)合，溶劑化作用和滲透能力強(qiáng)，粘度小，提取速度快，能使結(jié)合態(tài)的藥物釋放，提取的同時(shí)脫蛋白脫脂，使結(jié)合態(tài)的藥物釋放，提取的同時(shí)脫蛋白脫脂，PH值可調(diào)，待測(cè)物分布均勻。但提取的值可調(diào)，待測(cè)物分布均勻。但提取的雜質(zhì)較多，進(jìn)一步萃取乳化嚴(yán)重，效果相似，甲醇提取液的雜質(zhì)最高。雜質(zhì)較多，進(jìn)一步萃取乳化嚴(yán)重，效果相似，甲醇提取液的雜質(zhì)最高?！叭f(wàn)能溶萬(wàn)能溶劑劑”DMSO沸點(diǎn)高極少用。沸點(diǎn)高極少用。l在酯溶性的殘留物中，采用非水溶性極性溶劑，乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚。在酯溶性的殘留物中，采用非水溶性極性溶劑，乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚。l加無(wú)水

7、硫酸鈉，鹽析提高回收率。干樣（含水小加無(wú)水硫酸鈉，鹽析提高回收率。干樣（含水小10%）加水增強(qiáng)提取。）加水增強(qiáng)提取。 13l均漿提取法；震蕩法；索氏提取法（考慮熱穩(wěn)定性，適合水分少如飼料樣品，水產(chǎn)品組織均漿提取法；震蕩法；索氏提取法（考慮熱穩(wěn)定性，適合水分少如飼料樣品，水產(chǎn)品組織要和海砂或無(wú)水硫酸鈉一起研磨成干粉）；超聲波提取（要和海砂或無(wú)水硫酸鈉一起研磨成干粉）；超聲波提取（SAE，空化作用，增加溶解，時(shí)，空化作用，增加溶解，時(shí)間不能長(zhǎng)，發(fā)熱）；超臨界流體萃?。ㄩg不能長(zhǎng)，發(fā)熱）；超臨界流體萃?。⊿FE），強(qiáng)化溶劑萃?。ǎ?，強(qiáng)化溶劑萃?。ˋSE）和微波輔助萃取）和微波輔助萃?。∕AE）14l超

8、臨界流體密度與液體相似，但是溶質(zhì)在其中的擴(kuò)散系數(shù)比液體中大得多。超臨界流體密度與液體相似，但是溶質(zhì)在其中的擴(kuò)散系數(shù)比液體中大得多。l極性低的碳?xì)浠衔?，醚，酯，環(huán)氧化合物，可以在低壓力下提?。O性低的碳?xì)浠衔?，醚，酯，環(huán)氧化合物，可以在低壓力下提?。?-10MPa）進(jìn)行萃取，）進(jìn)行萃取，羥基，羧基難萃取，一個(gè)羧基和兩個(gè)羥基的化合物和三個(gè)酚羥基的苯環(huán)衍生物可以被萃取；羥基，羧基難萃取，一個(gè)羧基和兩個(gè)羥基的化合物和三個(gè)酚羥基的苯環(huán)衍生物可以被萃??；40 MPa以下，糖和氨基酸都不能被萃?。环旨?jí)極性差異和揮發(fā)性差異。以下，糖和氨基酸都不能被萃??；分級(jí)極性差異和揮發(fā)性差異。15 超臨界流體萃取儀超臨

9、界流體萃取儀流體源，加壓裝流體源，加壓裝置，控溫裝置，萃取容器，節(jié)流裝置，置，控溫裝置，萃取容器，節(jié)流裝置，收集裝置。收集裝置。CO2作為流體操作溫度低，作為流體操作溫度低，利于熱不穩(wěn)定的化合物，組分中不含利于熱不穩(wěn)定的化合物，組分中不含氧，防止氧化。氧，防止氧化。16液液-液萃取液萃取LLE LLE利用待測(cè)組分與樣品雜質(zhì)在互不相溶的兩相中溶解性差異進(jìn)行凈化。設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)為：利用待測(cè)組分與樣品雜質(zhì)在互不相溶的兩相中溶解性差異進(jìn)行凈化。設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)為：極性組分與非極性組分；極性物質(zhì)再分成酸性，中性，堿性物質(zhì)。正己烷（石油醚）極性組分與非極性組分；極性物質(zhì)再分成酸性，中性，堿性物質(zhì)。正己烷（石油醚）-

10、乙乙腈；正己烷腈；正己烷-甲醇；正己烷甲醇；正己烷-丙酮；異辛烷丙酮；異辛烷-80%丙酮；氯仿丙酮；氯仿-水；乙酸乙酯水；乙酸乙酯-水。水。 影響因素：溶劑，影響因素：溶劑，PH值（磺胺，喹諾酮，苯并米唑類，苯乙胺類等）值（磺胺，喹諾酮，苯并米唑類，苯乙胺類等）17液液-液萃取操作方法液萃取操作方法 分液漏斗震蕩，漩渦萃取，逆流萃取，特殊容器萃取。分液漏斗震蕩，漩渦萃取，逆流萃取，特殊容器萃取。 從水相中提取藥物時(shí)溶劑中常帶如少量的水分，可干擾固相萃取，延長(zhǎng)濃縮時(shí)間和增加雜從水相中提取藥物時(shí)溶劑中常帶如少量的水分，可干擾固相萃取，延長(zhǎng)濃縮時(shí)間和增加雜質(zhì)，加無(wú)水硫酸鈉脫水。高極性的藥物在凈化中發(fā)

11、生吸附，硅烷化玻璃器皿（質(zhì)，加無(wú)水硫酸鈉脫水。高極性的藥物在凈化中發(fā)生吸附，硅烷化玻璃器皿（1%三甲基三甲基氯硅烷的甲苯溶液淌一次，氯硅烷的甲苯溶液淌一次，100下干燥下干燥30min）；加異丙醇或二乙胺也能降低吸附。）；加異丙醇或二乙胺也能降低吸附。18固相萃?。ü滔噍腿。⊿PE） 采用固相萃取小柱作為分離媒介，小柱中添加了不同填料的固定相，以鍵合硅膠為基質(zhì)的采用固相萃取小柱作為分離媒介，小柱中添加了不同填料的固定相，以鍵合硅膠為基質(zhì)的C18、NH2、COOH、PSA、SAX等，是硅膠的表面活性大為降低，最大程度的降低了極等，是硅膠的表面活性大為降低，最大程度的降低了極性化合物的不可吸附和拖

12、尾，使樣品回收率和重現(xiàn)性得到保障；以高分子聚合物為基質(zhì)性化合物的不可吸附和拖尾，使樣品回收率和重現(xiàn)性得到保障；以高分子聚合物為基質(zhì)的如的如PEP、HXN、PAX、PCX等，具有高純度、高比表面的特點(diǎn)；以吸附型填料為固定等，具有高純度、高比表面的特點(diǎn)；以吸附型填料為固定相的如硅酸鎂、氧化鋁等，主要通過(guò)表面的極性吸附達(dá)到分離的目的。因此，固相萃取相的如硅酸鎂、氧化鋁等，主要通過(guò)表面的極性吸附達(dá)到分離的目的。因此，固相萃取法適用于各種極性的化合物法適用于各種極性的化合物 19固相萃取（固相萃?。⊿PE） 20固相萃取（SPE）操作步驟：活化，上樣，洗滌，洗脫。其他方法固相微萃取：固液吸附平衡固相微萃

13、?。汗桃何狡胶庵苽渖V法：制備制備色譜法：制備HPLC分析激素殘留分析激素殘留凝膠滲透色譜法：分子篩作用凝膠滲透色譜法：分子篩作用膜分離技術(shù)：硝酸纖維，醋酸纖維等半透膜膜分離技術(shù)：硝酸纖維，醋酸纖維等半透膜基質(zhì)固相分散技術(shù)：樣品和填料的比例是基質(zhì)固相分散技術(shù)：樣品和填料的比例是1：4免疫親和色譜：連接有抗體的惰性基質(zhì)做固定相，選擇性吸附。免疫親和色譜：連接有抗體的惰性基質(zhì)做固定相，選擇性吸附。分子印跡技術(shù)：印跡聚合物，塑料抗體分子印跡技術(shù)：印跡聚合物，塑料抗體 21 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)：溶劑可回收旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)：溶劑可回收氣流吹蒸：少量溶劑氣流吹蒸：少量溶劑K-D濃縮器：濃縮，回流，洗滌，定容濃縮器：濃縮，

14、回流，洗滌，定容真空離心：熱敏性組分，粘稠液體真空離心：熱敏性組分，粘稠液體再溶解使用流動(dòng)相的初始比例作溶劑再溶解使用流動(dòng)相的初始比例作溶劑22步驟步驟1.確立質(zhì)譜條件確立質(zhì)譜條件2.建立建立LC方法方法3.內(nèi)標(biāo)選擇內(nèi)標(biāo)選擇4.前處理方法選擇前處理方法選擇23 文獻(xiàn)檢索：了解化合物的性質(zhì)包括化合物的結(jié)構(gòu)、化合物的極性及化合物的文獻(xiàn)檢索：了解化合物的性質(zhì)包括化合物的結(jié)構(gòu)、化合物的極性及化合物的pKa值。值。首先了解化合物的結(jié)構(gòu)，可大概的推斷其碎片離子的斷裂方式，選擇較為穩(wěn)定的首先了解化合物的結(jié)構(gòu)，可大概的推斷其碎片離子的斷裂方式，選擇較為穩(wěn)定的碎片離子作為定量的子離子，也可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷選用哪種

15、離子源更為合適；根碎片離子作為定量的子離子，也可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷選用哪種離子源更為合適；根據(jù)化合物的極性大小，可以選擇一種或幾種恰當(dāng)?shù)娜軇┳鳛槿苊?，既能保證完全據(jù)化合物的極性大小，可以選擇一種或幾種恰當(dāng)?shù)娜軇┳鳛槿苊?，既能保證完全將樣品溶解，又能提高化合物的質(zhì)譜響應(yīng)；化合物的將樣品溶解，又能提高化合物的質(zhì)譜響應(yīng)；化合物的pKa值，有助于選擇流動(dòng)相值，有助于選擇流動(dòng)相的添加劑及其的添加劑及其pH值，從而提高質(zhì)譜響應(yīng)。值，從而提高質(zhì)譜響應(yīng)。 24251.連接管路 2. 選擇Q1MS掃描模式和Full Scan掃描類型 3. 設(shè)置離子源參數(shù) 4.將流動(dòng)相導(dǎo)入質(zhì)譜儀，觀察到待測(cè)化合物的準(zhǔn)分子離子峰峰強(qiáng)度

16、在10的6次方左右 。265. 選擇MS Only優(yōu)化模式和Syringe Pump Infusion入口類型選項(xiàng) 6.優(yōu)化Tube Lens Offset、Spray Voltage、Sheath Gas Pressure、Aux Gas Pressure獲得待測(cè)化合物穩(wěn)定的準(zhǔn)分子離子峰。7.選擇MS+MS/MS優(yōu)化模式設(shè)置Parent Mass、Charge State和Num Product對(duì)子離子進(jìn)行優(yōu)化。 8. MRM優(yōu)化模式優(yōu)化Tube Lens Offset和Collision Pressure9.記錄并保存子離子全掃描質(zhì)譜圖。保存Tune Method文件。272829l在液相

17、-紫外檢測(cè)中，使用的添加劑的種類繁多，可以是揮發(fā)性的酸或者堿（如甲酸、乙酸和氨水等），也可以是不易揮發(fā)的緩沖鹽（如磷酸二氫鈉-磷酸緩沖液、磷酸二氫鉀-磷酸緩沖鹽）。但是在液質(zhì)分析中，基于質(zhì)譜檢測(cè)的原理，我們只能使用可揮發(fā)的酸堿或緩沖鹽，那么種類就會(huì)受到極大的限制。在日常分析中使用到的添加劑主要有甲酸、乙酸、三氟乙酸、氨水和甲酸銨、乙酸銨等緩沖鹽。三乙胺在紫外檢測(cè)中，常作為掃尾劑，但是在液質(zhì)檢測(cè)中是絕對(duì)禁止的。因?yàn)槿野愤M(jìn)入質(zhì)譜后不易清除，殘留及其嚴(yán)重，能夠抑制離子的響應(yīng)。l在液相色譜紫外檢測(cè)中，要求化合物之間R1.5，進(jìn)行定量，那R最好2.0，要求準(zhǔn)確的配制流動(dòng)相，精確的調(diào)好流動(dòng)相的pH及添加

18、劑的濃度。但在液質(zhì)分析中，我們經(jīng)常使用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM/SRM）對(duì)化合物進(jìn)行定量，由于MRM要求選擇兩次離子，因此它具有很高的專屬性，基于這點(diǎn)我們對(duì)多個(gè)化合物同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不需要彼此間達(dá)到完全分離就可以對(duì)他們進(jìn)行定量分析。30l由于生物樣品中含有大量的基質(zhì)，這些基質(zhì)的存在會(huì)嚴(yán)重的干擾和影響化合物的測(cè)定，因而我們需要利用色譜將化合物與基質(zhì)分開(kāi)，從而降低基質(zhì)效應(yīng)的影響，即降低離子抑制。 l待測(cè)化合物要在色譜柱上有保留，并且適當(dāng)延長(zhǎng)保留時(shí)間。三聚氰胺最好用離子柱。31內(nèi)標(biāo)工作方式：l在每個(gè)樣品、標(biāo)準(zhǔn)和空白中加入l測(cè)定到每個(gè)樣品中內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)l根據(jù)實(shí)際測(cè)定內(nèi)標(biāo)響應(yīng)值與預(yù)期內(nèi)標(biāo)響應(yīng)值的比值來(lái)校正其他化

19、合物的信號(hào)l用分析信號(hào)和內(nèi)標(biāo)的比作標(biāo)準(zhǔn)曲線或乘校正因子或除內(nèi)標(biāo)回收率l計(jì)算未知樣品的分析信號(hào)和內(nèi)標(biāo)的比值并從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出信號(hào)321.樣品中不存在或者可以忽略2.沒(méi)有受到質(zhì)譜干擾3.沒(méi)有對(duì)分析對(duì)象產(chǎn)生質(zhì)譜干擾4.不容易受到環(huán)境污染5.和分析對(duì)象質(zhì)量數(shù)接近（氘代物）6.離解方式和分析對(duì)象接近33為什么要采用LC-MSl考核化合物的含量越來(lái)越低l基體越來(lái)越復(fù)雜l藥殘的能力驗(yàn)證建議的第一方法例如：l干魚粉中的恩諾沙星和環(huán)丙沙星l魚肉中的氟苯尼考34 考核中的質(zhì)量控制方法考核中的質(zhì)量控制方法l控制樣品空白控制樣品空白 l平行雙樣測(cè)定或三樣平行雙樣測(cè)定或三樣 l加標(biāo)回收加標(biāo)回收l(shuí)標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的同步分析標(biāo)

20、準(zhǔn)參考物質(zhì)的同步分析l重復(fù)測(cè)定和儀器比對(duì)重復(fù)測(cè)定和儀器比對(duì)35 加標(biāo)回收：加標(biāo)回收：可分為前處理加標(biāo)回收和上機(jī)加 標(biāo)（單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)加入）36 加標(biāo)回收：加標(biāo)回收：可分為前處理加標(biāo)回收和上機(jī)加 標(biāo)（單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)加入）l加標(biāo)回收接近100不能代表考核結(jié)果完全準(zhǔn)確無(wú)誤 。l不能檢查標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身所帶來(lái)的誤差； l不能檢查加和性干擾 ，如污染和質(zhì)譜干擾 ；37標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的同步分析標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的同步分析 ：選擇基體和濃度相似的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)同步進(jìn)行分析作用：l標(biāo)準(zhǔn)是否合格l樣品前處理是否合適l測(cè)定中是否存在干擾l目前藥殘的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)很難購(gòu)買，對(duì)于固體的國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，即使不能購(gòu)得，也要盡量收集到證書。38其他

21、質(zhì)控方法其他質(zhì)控方法l不同儀器的比對(duì)實(shí)驗(yàn) 不同儀器在一定程度可考察基體和質(zhì)譜的干擾狀況l重復(fù)分析和人員比對(duì)實(shí)驗(yàn)l盡量消除過(guò)失誤差和隨機(jī)誤差以上的質(zhì)量控制方法在考核中應(yīng)盡量多采用39考核前準(zhǔn)備考核前準(zhǔn)備l確認(rèn)色譜柱柱效l各流動(dòng)相充足l清洗錐口l重新調(diào)諧校正儀器重新調(diào)諧校正儀器總之就是使儀器處于良好狀態(tài)40預(yù)試驗(yàn)預(yù)試驗(yàn)l稀釋到一定稀釋到一定(或要求或要求)的倍數(shù)后測(cè)定的倍數(shù)后測(cè)定稀釋成多種稀釋倍數(shù)稀釋成多種稀釋倍數(shù) l有利于多項(xiàng)目的測(cè)定有利于多項(xiàng)目的測(cè)定l使?jié)舛仍跇?biāo)準(zhǔn)曲線的中間點(diǎn)使?jié)舛仍跇?biāo)準(zhǔn)曲線的中間點(diǎn)l有利于發(fā)現(xiàn)干擾有利于發(fā)現(xiàn)干擾l有利于防止污染有利于防止污染41定容定容 要考慮溶劑的匹配。要考

22、慮溶劑的匹配。測(cè)定測(cè)定 每個(gè)樣品測(cè)定每個(gè)樣品測(cè)定2 3次，同時(shí)分析標(biāo)準(zhǔn)參加物質(zhì)并分析加標(biāo)樣品。次，同時(shí)分析標(biāo)準(zhǔn)參加物質(zhì)并分析加標(biāo)樣品。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理 l查看校準(zhǔn)曲線是否符合要求查看校準(zhǔn)曲線是否符合要求l確定是不同質(zhì)量數(shù)測(cè)定結(jié)果是否相同確定是不同質(zhì)量數(shù)測(cè)定結(jié)果是否相同盡量不同超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍，如超過(guò)應(yīng)稀釋后測(cè)定。盡量不同超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍，如超過(guò)應(yīng)稀釋后測(cè)定。42基質(zhì)效應(yīng)成因基質(zhì)效應(yīng)成因l待測(cè)組分與基質(zhì)中內(nèi)源性物質(zhì)共洗脫而引起的色譜柱超載所致，這些成分常因在色譜分析中與目待測(cè)組分與基質(zhì)中內(nèi)源性物質(zhì)共洗脫而引起的色譜柱超載所致，這些成分常因在色譜分析中與目標(biāo)化合物分離不完全或未被檢測(cè)到而進(jìn)入質(zhì)

23、譜后產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)。標(biāo)化合物分離不完全或未被檢測(cè)到而進(jìn)入質(zhì)譜后產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)。l待測(cè)組分與生物樣品中的基質(zhì)成分在霧滴表面離子化過(guò)程中的競(jìng)爭(zhēng)。由于基質(zhì)中某些干擾組分的待測(cè)組分與生物樣品中的基質(zhì)成分在霧滴表面離子化過(guò)程中的競(jìng)爭(zhēng)。由于基質(zhì)中某些干擾組分的存在會(huì)使待測(cè)組分離子生成的速度同標(biāo)準(zhǔn)樣品相比有顯著不同，使得信號(hào)響應(yīng)值產(chǎn)生較大變異。存在會(huì)使待測(cè)組分離子生成的速度同標(biāo)準(zhǔn)樣品相比有顯著不同，使得信號(hào)響應(yīng)值產(chǎn)生較大變異。l離子的有效淌度受到周圍離子的影響，由其周圍離子所形成的包圍圈，稱為離子基體。如果樣品離子的有效淌度受到周圍離子的影響，由其周圍離子所形成的包圍圈，稱為離子基體。如果樣品組分從進(jìn)樣點(diǎn)到探測(cè)

24、點(diǎn)遷移過(guò)程中，在某一時(shí)間間隔遇上一個(gè)不同組成的基體區(qū)帶，這個(gè)離子基組分從進(jìn)樣點(diǎn)到探測(cè)點(diǎn)遷移過(guò)程中，在某一時(shí)間間隔遇上一個(gè)不同組成的基體區(qū)帶，這個(gè)離子基體區(qū)帶就將對(duì)樣品組分產(chǎn)生影響，使它們的淌度發(fā)生瞬時(shí)變化，從而選擇性地影響溶質(zhì)的遷移和體區(qū)帶就將對(duì)樣品組分產(chǎn)生影響，使它們的淌度發(fā)生瞬時(shí)變化，從而選擇性地影響溶質(zhì)的遷移和分離，這就是瞬時(shí)離子基體效應(yīng)。分離，這就是瞬時(shí)離子基體效應(yīng)。l分為離子抑制和離子增強(qiáng)分為離子抑制和離子增強(qiáng) 43基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)：基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)： 1.用流動(dòng)相配制高中低三個(gè)濃度的待測(cè)物，并加入內(nèi)標(biāo)，測(cè)得響應(yīng)值。用流動(dòng)相配制高中低三個(gè)濃度的待測(cè)物，并加入內(nèi)標(biāo)，測(cè)得響應(yīng)值。 2.空白基

25、質(zhì)提取后加入相同濃度的待測(cè)物和內(nèi)標(biāo)，測(cè)響應(yīng)值。空白基質(zhì)提取后加入相同濃度的待測(cè)物和內(nèi)標(biāo)，測(cè)響應(yīng)值。 基質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng) =空白基質(zhì)響應(yīng)值空白基質(zhì)響應(yīng)值/流動(dòng)相響應(yīng)值流動(dòng)相響應(yīng)值100 這樣不同濃度的待測(cè)物的基質(zhì)效應(yīng)和內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)效應(yīng)均可得到。這樣不同濃度的待測(cè)物的基質(zhì)效應(yīng)和內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)效應(yīng)均可得到。 44基質(zhì)效應(yīng)消除方法基質(zhì)效應(yīng)消除方法 1.選擇合適的樣品制備方法，對(duì)于不同的樣品制備方法，不能簡(jiǎn)單地說(shuō)某種方法優(yōu)于另一種方法，選擇合適的樣品制備方法，對(duì)于不同的樣品制備方法，不能簡(jiǎn)單地說(shuō)某種方法優(yōu)于另一種方法，每種組分對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的敏感度不同，其適宜采用的樣品制備方法也不同，要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。每種組分對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的敏感度不同，其適宜采用的樣品制備方法也不同，要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。2.改善色譜分析條件：采用反相色譜分離，適當(dāng)?shù)卦黾哟郎y(cè)組分的保留時(shí)間；減少進(jìn)樣體積；改善色譜分析條件：采用反相色譜分離，適當(dāng)?shù)卦黾哟郎y(cè)組分的保留時(shí)間；減少進(jìn)樣體積； 3.優(yōu)化質(zhì)譜分析條件，源的選擇優(yōu)化質(zhì)譜分析條件，源的選擇 4.選擇內(nèi)標(biāo)。選擇內(nèi)標(biāo)。 5.基質(zhì)匹配定量基質(zhì)匹配定量45l