高效離子色譜法測定淀粉糖的組分

1、高效離子色譜法測定淀粉糖的組分摘要：本文建立了高效離子色譜法測定淀粉糖組分的方法。樣品經(jīng)稀釋、過濾后直接進(jìn)行色譜分析，以NaOH/NaOAc為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，采用CarboPac PA10（250 4 mm）離子色譜柱分離，安培檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，淀粉糖中測得了葡萄糖、異麥芽糖、麥芽糖、潘糖、麥芽三糖等組分，各種糖的線性范圍為0.1 10 mg/L，相關(guān)系數(shù)為0.9999，回收率為93% 101%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2%。該方法前處理簡便，用于淀粉糖組分的檢測，結(jié)果令人滿意。關(guān)鍵詞：高效離子色譜法；淀粉糖；組分 淀粉糖是利用含淀粉的糧食、薯類等為原料，采用酸法、酸酶法

2、或全酶法制取的糖，包括麥芽糖、異麥芽糖、葡萄糖、果糖、果葡糖漿、山梨醇以及各種低聚糖等，統(tǒng)稱淀粉糖。淀粉糖長期以來被廣泛地應(yīng)用于食品，醫(yī)藥，造紙等諸多行業(yè)，其消費(fèi)領(lǐng)域廣，消費(fèi)數(shù)量大，是淀粉深加工的支柱產(chǎn)品，是農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化和糧食深加工的重要途徑之一1。伴隨著玉米深加工，食品工業(yè)的發(fā)展以及酶制劑等生物技術(shù)的進(jìn)步和人們消費(fèi)結(jié)構(gòu)的變化，我國淀粉糖行業(yè)取得了顯著的發(fā)展，2006年淀粉糖產(chǎn)量達(dá)560萬噸，產(chǎn)量僅次于美國，居世界第二位。淀粉糖工業(yè)在我國國民經(jīng)濟(jì)發(fā)展中起著重要作用。同時(shí)酶法生產(chǎn)的淀粉糖中含有大量的低聚糖組分，低聚糖類對于消化系統(tǒng)的保健作用日益受到重視。 以往對于使用酸法制取的淀粉糖漿，人們使用葡

3、萄糖DE值反應(yīng)淀粉的水解程度（DE值為淀粉糖品中還原糖按葡萄糖折算占干物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)），以DE值作為淀粉糖品分類和分級的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行生產(chǎn)控制。隨著技術(shù)的進(jìn)步，各種新型的酶法生產(chǎn)淀粉糖已成趨勢。用酶法工藝生產(chǎn)出的淀粉糖其組成與酸法有所區(qū)別，具有相同DE值的糖會(huì)有糖分組成不盡相同2。目前常用的測定淀粉糖組分的方法是高效液相色譜視差折光檢測法（HPLCRID）3-4，HPLC法通常需要兩根色譜柱兩次分析才能完成淀粉糖的分析，采用NaOH/NaOAc梯度淋洗安培檢測器檢測，一次進(jìn)樣可同時(shí)完成淀粉糖中常見的單糖、二糖和低聚糖分析，且操作簡便，靈敏度高，重復(fù)性好5。 1. 實(shí)驗(yàn)部分 2.1 儀器、試劑與材料D

4、ionex ICS-3000離子色譜儀配安培檢測器（美國戴安公司），Chromeleon色譜工作站，Barnstead-Nanopure純水機(jī)， CarboPac PA10 (250 4 mm)色譜柱，0.22 m尼龍濾膜過濾頭。 單糖、二糖、低聚糖標(biāo)樣（99%，進(jìn)口分裝），NaOH（50%，F(xiàn)luka），NaOAc(Sigma，生化級別)實(shí)驗(yàn)用水均為大于18.2 M.cm的二次去離子水。 1.2實(shí)驗(yàn)步驟 1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取各種糖的標(biāo)樣，用水配制1000 mg/L各種糖的準(zhǔn)溶液，保存于冰箱冷藏室中。臨用時(shí)稀釋成100mg/L，分別準(zhǔn)確移取100 mg/L的各種糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.0

5、mL、1.0mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、25 mL于100 mL容量瓶中，用水準(zhǔn)確定容至刻度，配制成0、1.0、2.0、5.0、10.0 、25.0 mg/L不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。 1.2.2 樣品制備稱取淀粉糖樣品適量，稀釋一定倍數(shù)，混勻，溶液過0.22 m尼龍濾膜過濾，取續(xù)濾液供色譜測定。中國色譜網(wǎng) 1.2.3 色譜條件淋洗液：NaOH/NaOAc梯度淋洗；流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣體積25 L；積分脈沖安培檢測；外標(biāo)法定量。 2 結(jié)果與討論 2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的譜圖所選的色譜條件下，五種糖的分離譜圖如下。見圖1。 圖1 五種糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(10.0 m

6、g/L)2.2 方法學(xué)考察 2.2.1 線性關(guān)系 取各種糖的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按“1.2.3”節(jié)色譜條件進(jìn)行測定。以峰面積Y對質(zhì)量濃度X（mg/L）進(jìn)行線性回歸，其線性系數(shù)如表1。 表1 各種糖的的線性2.2.2 方法的重復(fù)性取同一樣品，按“1.2.2”節(jié)樣品制備方法平行處理8份樣品，按“1.2.3”節(jié)色譜條件測定各樣品，考察方法的重復(fù)性，各種糖的的保留時(shí)間、峰面積、峰高和含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2%。 2.2.3 回收率準(zhǔn)確稱取淀粉糖樣品，分別加入高、中、低三種不同濃度的5種糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“1.2.2”節(jié)樣品制備方法制備樣品，按“1.2.3”節(jié)色譜條件測定樣品，計(jì)算回收率，結(jié)果各樣品的回收率范圍為90% 102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3%。 2.3 樣品測定按“1.2.2”樣品制備的方法，對淀粉糖樣品進(jìn)行處理，按“1.2.3”節(jié)色譜條件測定其各種糖的的含量。該樣品的色譜圖見圖2。 圖2 淀粉糖樣品的色譜圖3 結(jié)論以NaOH/NaOAc梯度溶液為流動(dòng)相，采用離子色譜分離，脈沖積分安培法檢測，可對淀粉糖中的各種糖的含量進(jìn)行測定。本方法快速、準(zhǔn)確，樣品處理步驟簡單，分析周期短，不受雜質(zhì)干擾，可用于監(jiān)控酶法制備的淀粉糖的品質(zhì)。 參考文獻(xiàn) 1 張景樓，鄭毅，寧彥東等，中國糖料，2009，4：77-78 2 黃立新，陳家明，中國標(biāo)準(zhǔn)化，2001，3：21-22 3 田艷玲，