銀杏達(dá)莫對兔心肌缺血再灌注誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制

1、銀杏達(dá)莫對兔心肌缺血再灌注誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制         作者：郭瀟，王莉，陸艷，高雁 【摘要】 目的研究銀杏達(dá)莫對兔心肌缺血再灌注損傷內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。方法結(jié)扎兔左冠狀動(dòng)脈前降支制作心肌缺血再灌注損傷模型。實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為空白對照組（假手術(shù)）、缺血再灌注組和銀杏達(dá)莫組。銀杏達(dá)莫組在心肌缺血前10min給予銀杏達(dá)                

2、             作者：郭瀟，王莉，陸艷，高雁【摘要】  目的研究銀杏達(dá)莫對兔心肌缺血再灌注損傷內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。方法結(jié)扎兔左冠狀動(dòng)脈前降支制作心肌缺血再灌注損傷模型。實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為空白對照組（假手術(shù)）、缺血再灌注組和銀杏達(dá)莫組。銀杏達(dá)莫組在心肌缺血前10min給予銀杏達(dá)莫。觀察各組缺血再灌注過程中心電圖的動(dòng)態(tài)改變，以及銀杏達(dá)莫對血管性血友病因子及丙二醛和血清一氧化氮含量的影響。結(jié)果缺血再灌注組和銀杏達(dá)莫組均造成明顯的心電圖動(dòng)態(tài)改變，與空白對照組比較，銀杏

3、達(dá)莫組心電圖ST段出現(xiàn)有效改變。銀杏達(dá)莫組與缺血再灌注組比較血管性血友病因子活性和丙二醛水平較缺血再灌注組顯著降低，而血清一氧化氮水平明顯提高。結(jié)論 銀杏達(dá)莫對心肌缺血再灌注損傷內(nèi)皮細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用，其作用與清除氧自由基的膜脂質(zhì)過氧化及擴(kuò)張冠脈有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  銀杏達(dá)莫； 心肌缺血再灌注損傷； 內(nèi)皮細(xì)胞； 心肌保護(hù)； 脂質(zhì)過氧化Abstract：Objective To study the protective effects and mechanism of Egb on endothelial cell injury induced by myocardium exper

4、ienced ischemia-reperfusion in rabbits. MethodsThe model of myocardial ischemia-reperfusion injury was established by ligating the left anterior descending artery of New Zealand rabbits. Anesthetized rabbits were randomly divided into 3 groups: blank control group (n=9) in which left anterior descen

5、ding coronary artery was exposed and a piece of silk thread was placed around the artery but not tied; Myocardial ischemia-reperfusion group (n=9) in which 1ml/kg normal saline was injected into vein 10 min before logation. Egb group (n=9) received intravenous inject on of Egb 10min before logation.

6、 The effect of egb on the von willebrand factor (vWF), malondialdehyde (MDA) in the plasma, the level of serum NO in injured rabbits and ECG were observed. ResultsCompared with blank control group or myocardial ischemia-reperfusion group, Egb group showed protection against injury as evidenced by mo

7、re effective improvement in ST of ECG. Egb could evidently decrease the contects of MDA and vWF and increase serum NO as compared with ischemia-reperfusion group. ConclusionEgb has a protective effect on endordnelial injury induced by myocardial ischemia-reperfusion throngh inhibiting lipid peroxida

8、tion and increasing NO preduction.Key words：Egb;   Myocardial ischemia-reperfusion;  Endothelial cells;  Myocardial protection;   Lipid peroxidation    冠狀動(dòng)脈粥樣硬化所致心肌缺血病變是一種“代謝性疾病”。一些研究顯示冠心病梗塞心肌相關(guān)血管再開通后，部分患者反而會因發(fā)生急性血流動(dòng)力學(xué)障礙而死亡，稱為心肌缺血再灌注損傷(Myocardial ischemia

9、 reperfusion injury, MIRI)1。MIRI與心肌細(xì)胞密切相關(guān)，血管內(nèi)皮細(xì)胞是MIRI時(shí)氧自由基，黏附因子和其他生物活性物質(zhì)的來源，所以早期血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能嚴(yán)重?fù)p傷又是構(gòu)成MIRI的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。銀杏提取物（Extract of ginkgo biloba, EGB）具有改善血液流變狀態(tài)、抑制血小板聚集、抗氧化、清除自由基、緩解缺血、缺氧和舒張血管平滑肌等藥理作用2,3，并且可以縮小急性心肌梗塞范圍及減輕梗塞程度4,5。所以推斷銀杏達(dá)莫對心肌內(nèi)皮有部分保護(hù)作用。本研究對在體兔心肌缺血再灌注誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型予銀杏達(dá)莫干預(yù)，初步探討其對損傷的心肌內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用

10、。1  材料與方法1.1  藥物和試劑 銀杏達(dá)莫，由山西普德藥業(yè)公司提供（批號： 國藥準(zhǔn)字H14023515）。丙二醛（Malondialdehyde, MDA） 、一氧化氮（NO）試劑盒購自南京建成生物工程研究所， 血管性血友病因子（Von willebrand factor ,vWF）試劑盒購自上海朗卡公司。1.2  動(dòng)物 健康新西蘭大白兔，雌雄不限，共27只，體重（2.82±0.31）kg，由蘭州生物制品研究所提供。1.3  模型制備動(dòng)物分組1.3.1  心肌缺血再灌注損傷模型6及標(biāo)本的采樣 選擇健

11、康新西蘭大白兔,20%烏拉坦按5 ml/kg耳緣靜脈麻醉，氣管插管，人工呼吸，開胸，暴露心肌，自冠狀動(dòng)脈左前降支(Left anterior descending coronary artery, LAD)0.5 cm處穿線環(huán)繞動(dòng)脈，結(jié)扎線線自一膠管腔內(nèi)引出，結(jié)扎LAD，造成急性心肌缺血,通過肉眼觀察及心電圖改變判斷LAD結(jié)扎是否成功。LAD結(jié)扎30 min后剪開穿線使冠狀動(dòng)脈再通形成再灌注，再灌注30 min，從左心室取2 ml制備血漿供檢測。入選標(biāo)準(zhǔn)：結(jié)扎后導(dǎo)聯(lián)ST段出現(xiàn)弓背向上抬高，T波高聳等表現(xiàn)為缺血成功。剪線后，行再灌注，抬高的ST段出現(xiàn)下降1/2以上為再灌注成功，行再灌注60 mi

12、n。1.3.2  分組與給藥  大白兔隨機(jī)分為3組，每組9只?？瞻讓φ战M（組）行假手術(shù)(Sham operated control，SC)，即在LAD0.5 cm處穿一膠管內(nèi)引絲線，但不予結(jié)扎；缺血再灌注組（組）和銀杏達(dá)莫組（組，缺血再灌注+銀杏達(dá)莫）于結(jié)扎前10 min，組靜注生理鹽水1 ml/kg，組靜注銀杏達(dá)莫30 ml(銀杏總黃酮10 mg/kg，雙嘧達(dá)莫8 mg/kg)。1.4  心電圖動(dòng)態(tài)變化記錄  全程記錄心電圖變化,心電圖顯效標(biāo)準(zhǔn)為缺血導(dǎo)致抬高的ST段在再灌注60 min內(nèi)恢復(fù)接近正?；€。1.5 檢測指標(biāo) 采用硫代巴比妥酸（Thiobarbituric acid, TBA）法測定血漿MDA含量（nmol/ml）；血漿v