本科答辯 PPT

1、北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)系北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)系20082008級學(xué)士論文答辯級學(xué)士論文答辯沙門氏菌在北京地區(qū)流行性的調(diào)研沙門氏菌在北京地區(qū)流行性的調(diào)研指導(dǎo)教師：李秋明指導(dǎo)教師：李秋明學(xué)生：袁欣學(xué)生：袁欣二零一三年六月二零一三年六月主要內(nèi)容主要內(nèi)容 前言前言 研究目的與意義研究目的與意義 實驗的主要材料與內(nèi)容實驗的主要材料與內(nèi)容 實驗結(jié)果實驗結(jié)果 實驗的結(jié)論實驗的結(jié)論一、前言一、前言 沙門氏菌是世界范圍內(nèi)最為重要的人畜共患病病菌之一，它不僅對養(yǎng)雞業(yè)的影響頗深，也是引起北京甚至是全球的食源性疾病的重要致病菌之一。 我國養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模及禽產(chǎn)品的消費量都越來越來大，使得人畜感染沙門氏菌的機會大大增加。因

2、此，不論是個人不論是個人還是國家都應(yīng)該重視對沙門氏菌的防控，并且要繼續(xù)研制還是國家都應(yīng)該重視對沙門氏菌的防控，并且要繼續(xù)研制出安全、有效以及快速的檢測方法。我相信隨著科學(xué)水平出安全、有效以及快速的檢測方法。我相信隨著科學(xué)水平的進步，我國的養(yǎng)禽業(yè)也一定會穩(wěn)步發(fā)展起來的。的進步，我國的養(yǎng)禽業(yè)也一定會穩(wěn)步發(fā)展起來的。二、研究目的與意義二、研究目的與意義 據(jù)報道，北京地區(qū)沙門氏菌的流行性研究數(shù)據(jù)并不據(jù)報道，北京地區(qū)沙門氏菌的流行性研究數(shù)據(jù)并不完善，所以調(diào)查沙門氏菌在北京地區(qū)肉雞場的流行性情況完善，所以調(diào)查沙門氏菌在北京地區(qū)肉雞場的流行性情況就更加重要。就更加重要。此次課題就是為了研究對北京地區(qū)的肉雞場

3、的沙門氏菌流行情況以及分子分型情況。并且對該地區(qū)雞源沙門菌的流行情況做近一步的調(diào)查分析，構(gòu)建北京地區(qū)構(gòu)建北京地區(qū)雞源沙門雞源沙門氏氏菌的分子分型數(shù)據(jù)庫，為臨床用藥提供一定依菌的分子分型數(shù)據(jù)庫，為臨床用藥提供一定依據(jù)，為后續(xù)的生態(tài)學(xué)控制策略的制定奠定基礎(chǔ)。據(jù)，為后續(xù)的生態(tài)學(xué)控制策略的制定奠定基礎(chǔ)。三、實驗的主要材料與內(nèi)容三、實驗的主要材料與內(nèi)容1 1、樣品采集情況、樣品采集情況2 2、實驗主要材料、實驗主要材料2.1 實驗主要試劑 Na2EDTAH2O、Premix Ex Taq、Tris、Gold View、DNA Maker DL 1000、沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代)、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液

4、（SC）、沙門氏菌診斷血清、十二烷基肌氨酸鈉、十二烷基硫酸鈉（SDS）、蛋白酶K、PFGE專用瓊脂糖、EB 存儲液（10mg/ml）、Xba I 限制性內(nèi)切酶2.2 實驗主要器械高速離心機、超凈工作臺、電熱恒溫培養(yǎng)箱、PCR儀、電泳儀、凝膠成像儀、細菌濁度儀、恒溫水浴鍋、恒溫水浴搖床、脫色搖床、CHEF-DR III型脈沖場凝膠電泳儀、CHEF MAPPER脈沖場凝膠電泳儀3 3、實驗的主要內(nèi)容、實驗的主要內(nèi)容雞泄殖腔拭子及雞泄殖腔拭子及2121日齡雞胚的樣品采集日齡雞胚的樣品采集將采集回的樣品進行顯色培養(yǎng)，之后進行篩選，將采集回的樣品進行顯色培養(yǎng)，之后進行篩選，挑出挑出可疑菌落可疑菌落，再進

5、行純培養(yǎng)，備用，再進行純培養(yǎng)，備用對于可疑菌落要進行對于可疑菌落要進行Rt-PCRRt-PCR的鑒定的鑒定經(jīng)過經(jīng)過PCRPCR鑒定過鑒定過后，確定后，確定為沙門氏菌的菌株，為沙門氏菌的菌株，再再進行血清學(xué)實驗進行血清學(xué)實驗對于同一血清型的沙門對于同一血清型的沙門氏菌做出基因分型實驗氏菌做出基因分型實驗沙門氏菌菌落形態(tài) 在沙門氏菌的選擇培養(yǎng)基上菌落一般呈現(xiàn)紫色，有時是透明的，大概有針尖大小。沙門氏菌PCR鑒定結(jié)果 PCR鑒定法擴增的invA基因，其得到的擴增長度應(yīng)在284bp處出現(xiàn)目的片段。四、實驗結(jié)果四、實驗結(jié)果1 1、沙門氏菌分離鑒定結(jié)果、沙門氏菌分離鑒定結(jié)果2 2、沙門氏菌分子分型結(jié)果、沙

6、門氏菌分子分型結(jié)果 1 1、沙門氏菌的分離率與血清型分布、沙門氏菌的分離率與血清型分布一共分離出沙門氏菌共記149株。腸炎型沙門氏菌較常見共計97株，II型沙門氏菌分離出15株，Tennessee型沙門氏菌分離出27株，還有10株沙門氏菌是不可分型的。 2 2、沙門氏菌基因分型的結(jié)果、沙門氏菌基因分型的結(jié)果 北京地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場的腸炎沙門氏菌的同源性并不高，而且具有一定的差異，II型沙門氏菌也存在著一定的差異性，而Tennessee型沙門氏菌的同源性較高。五、實驗的討論五、實驗的討論 本實驗的結(jié)果說明了北京地區(qū)肉雞場流行的沙門氏菌以腸炎和Tennessee型沙門氏菌為優(yōu)勢血清型，并且沙門氏菌的流行性與地域之間存在著一定的相關(guān)性，即不同地區(qū)流行的沙門氏菌菌株可能存在差異。 基因分型結(jié)果說明了北京地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場有3種主要