本科答辯 PPT

1、北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)系北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)系20082008級(jí)學(xué)士論文答辯級(jí)學(xué)士論文答辯沙門(mén)氏菌在北京地區(qū)流行性的調(diào)研沙門(mén)氏菌在北京地區(qū)流行性的調(diào)研指導(dǎo)教師：李秋明指導(dǎo)教師：李秋明學(xué)生：袁欣學(xué)生：袁欣二零一三年六月二零一三年六月主要內(nèi)容主要內(nèi)容 前言前言 研究目的與意義研究目的與意義 實(shí)驗(yàn)的主要材料與內(nèi)容實(shí)驗(yàn)的主要材料與內(nèi)容 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)的結(jié)論實(shí)驗(yàn)的結(jié)論一、前言一、前言 沙門(mén)氏菌是世界范圍內(nèi)最為重要的人畜共患病病菌之一，它不僅對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的影響頗深，也是引起北京甚至是全球的食源性疾病的重要致病菌之一。 我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模及禽產(chǎn)品的消費(fèi)量都越來(lái)越來(lái)大，使得人畜感染沙門(mén)氏菌的機(jī)會(huì)大大增加。因

2、此，不論是個(gè)人不論是個(gè)人還是國(guó)家都應(yīng)該重視對(duì)沙門(mén)氏菌的防控，并且要繼續(xù)研制還是國(guó)家都應(yīng)該重視對(duì)沙門(mén)氏菌的防控，并且要繼續(xù)研制出安全、有效以及快速的檢測(cè)方法。我相信隨著科學(xué)水平出安全、有效以及快速的檢測(cè)方法。我相信隨著科學(xué)水平的進(jìn)步，我國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)也一定會(huì)穩(wěn)步發(fā)展起來(lái)的。的進(jìn)步，我國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)也一定會(huì)穩(wěn)步發(fā)展起來(lái)的。二、研究目的與意義二、研究目的與意義 據(jù)報(bào)道，北京地區(qū)沙門(mén)氏菌的流行性研究數(shù)據(jù)并不據(jù)報(bào)道，北京地區(qū)沙門(mén)氏菌的流行性研究數(shù)據(jù)并不完善，所以調(diào)查沙門(mén)氏菌在北京地區(qū)肉雞場(chǎng)的流行性情況完善，所以調(diào)查沙門(mén)氏菌在北京地區(qū)肉雞場(chǎng)的流行性情況就更加重要。就更加重要。此次課題就是為了研究對(duì)北京地區(qū)的肉雞場(chǎng)

3、的沙門(mén)氏菌流行情況以及分子分型情況。并且對(duì)該地區(qū)雞源沙門(mén)菌的流行情況做近一步的調(diào)查分析，構(gòu)建北京地區(qū)構(gòu)建北京地區(qū)雞源沙門(mén)雞源沙門(mén)氏氏菌的分子分型數(shù)據(jù)庫(kù)，為臨床用藥提供一定依菌的分子分型數(shù)據(jù)庫(kù)，為臨床用藥提供一定依據(jù)，為后續(xù)的生態(tài)學(xué)控制策略的制定奠定基礎(chǔ)。據(jù)，為后續(xù)的生態(tài)學(xué)控制策略的制定奠定基礎(chǔ)。三、實(shí)驗(yàn)的主要材料與內(nèi)容三、實(shí)驗(yàn)的主要材料與內(nèi)容1 1、樣品采集情況、樣品采集情況2 2、實(shí)驗(yàn)主要材料、實(shí)驗(yàn)主要材料2.1 實(shí)驗(yàn)主要試劑 Na2EDTAH2O、Premix Ex Taq、Tris、Gold View、DNA Maker DL 1000、沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代)、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液

4、（SC）、沙門(mén)氏菌診斷血清、十二烷基肌氨酸鈉、十二烷基硫酸鈉（SDS）、蛋白酶K、PFGE專(zhuān)用瓊脂糖、EB 存儲(chǔ)液（10mg/ml）、Xba I 限制性?xún)?nèi)切酶2.2 實(shí)驗(yàn)主要器械高速離心機(jī)、超凈工作臺(tái)、電熱恒溫培養(yǎng)箱、PCR儀、電泳儀、凝膠成像儀、細(xì)菌濁度儀、恒溫水浴鍋、恒溫水浴搖床、脫色搖床、CHEF-DR III型脈沖場(chǎng)凝膠電泳儀、CHEF MAPPER脈沖場(chǎng)凝膠電泳儀3 3、實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容雞泄殖腔拭子及雞泄殖腔拭子及2121日齡雞胚的樣品采集日齡雞胚的樣品采集將采集回的樣品進(jìn)行顯色培養(yǎng)，之后進(jìn)行篩選，將采集回的樣品進(jìn)行顯色培養(yǎng)，之后進(jìn)行篩選，挑出挑出可疑菌落可疑菌落，再進(jìn)

5、行純培養(yǎng)，備用，再進(jìn)行純培養(yǎng)，備用對(duì)于可疑菌落要進(jìn)行對(duì)于可疑菌落要進(jìn)行Rt-PCRRt-PCR的鑒定的鑒定經(jīng)過(guò)經(jīng)過(guò)PCRPCR鑒定過(guò)鑒定過(guò)后，確定后，確定為沙門(mén)氏菌的菌株，為沙門(mén)氏菌的菌株，再再進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)于同一血清型的沙門(mén)對(duì)于同一血清型的沙門(mén)氏菌做出基因分型實(shí)驗(yàn)氏菌做出基因分型實(shí)驗(yàn)沙門(mén)氏菌菌落形態(tài) 在沙門(mén)氏菌的選擇培養(yǎng)基上菌落一般呈現(xiàn)紫色，有時(shí)是透明的，大概有針尖大小。沙門(mén)氏菌PCR鑒定結(jié)果 PCR鑒定法擴(kuò)增的invA基因，其得到的擴(kuò)增長(zhǎng)度應(yīng)在284bp處出現(xiàn)目的片段。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 1、沙門(mén)氏菌分離鑒定結(jié)果、沙門(mén)氏菌分離鑒定結(jié)果2 2、沙門(mén)氏菌分子分型結(jié)果、沙

6、門(mén)氏菌分子分型結(jié)果 1 1、沙門(mén)氏菌的分離率與血清型分布、沙門(mén)氏菌的分離率與血清型分布一共分離出沙門(mén)氏菌共記149株。腸炎型沙門(mén)氏菌較常見(jiàn)共計(jì)97株，II型沙門(mén)氏菌分離出15株，Tennessee型沙門(mén)氏菌分離出27株，還有10株沙門(mén)氏菌是不可分型的。 2 2、沙門(mén)氏菌基因分型的結(jié)果、沙門(mén)氏菌基因分型的結(jié)果 北京地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)的腸炎沙門(mén)氏菌的同源性并不高，而且具有一定的差異，II型沙門(mén)氏菌也存在著一定的差異性，而Tennessee型沙門(mén)氏菌的同源性較高。五、實(shí)驗(yàn)的討論五、實(shí)驗(yàn)的討論 本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果說(shuō)明了北京地區(qū)肉雞場(chǎng)流行的沙門(mén)氏菌以腸炎和Tennessee型沙門(mén)氏菌為優(yōu)勢(shì)血清型，并且沙門(mén)氏菌的流行性與地域之間存在著一定的相關(guān)性，即不同地區(qū)流行的沙門(mén)氏菌菌株可能存在差異。 基因分型結(jié)果說(shuō)明了北京地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)有3種主要