人參、三七在復方芪術調(diào)經(jīng)散中的高效液相色譜法鑒別

1、人參、三七在復方芪術調(diào)經(jīng)散中的高效液相色譜法鑒別 09-09-25 15:17:00 編輯：studa20 作者：何耀慧林榮鋒陳劍平李一圣黃曉其賴小平蘇子仁【摘要】 【目的】建立芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七的鑒別方法?！痉椒ā恳匀咴碥誖1和人參皂苷Rf為指標，采用高效液相色譜法對芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七進行鑒別?！窘Y果】通過利用人參特征性成分人參皂苷Rf和三七特征性成分三七皂苷R1，并綜合人參和三七中共有成分人參皂苷Rg1、人參皂苷Re及人參皂苷Rb1，可對芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七進行鑒別?！窘Y論】該方法簡便可行，可用于芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七的同時鑒別。 【關鍵詞】 人參/化學;三七/化學;人參皂苷R

2、f/分析;三七皂苷R1/分析;色譜法，高壓液相人參和三七均為貴重中藥材，人參有大補元氣，復脈固脫，補脾益肺，生津，安神的功效，而三七有散瘀止血，消腫定痛的功效1。同時含有人參和三七的經(jīng)典方屢見不鮮，但現(xiàn)有文獻尚無有關復方中同時鑒別人參和三七的報道。對于復方制劑，同時鑒別人參和三七是保證其質(zhì)量的必要條件，而人參和三七含有的成分極為相似，有效成分均為皂苷類成分，均含有人參皂苷Rg1、人參皂苷Re及人參皂苷Rb1，為鑒別增加了難度。本文以同時含有人參和三七兩味藥材，且制備工藝簡單的芪術調(diào)經(jīng)散作為研究對象，采用高效液相色譜(HPLC)法建立了芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七的鑒別方法，現(xiàn)將研究結果報道如下。1

3、材料11儀器DIONEX SUMMIT高效液相色譜儀(美國戴安公司);Hanest D2G303A水艾科浦U系列純化水機(重慶頤洋企業(yè)發(fā)展有限公司);舒美KQ5200DA型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);BP110s型萬分之一電子天平(德國Sartorius公司) ;CP225D型十萬分之一電子天平(德國Sartorius公司)。12藥物與試劑人參皂苷Rf(中國藥品生物制品檢定所，批號：111719200502 );人參皂苷Re(中國藥品生物制品檢定所，批號0754200013);人參皂苷Rg1(中國藥品生物制品檢定所，批號：110703200424);人參皂苷Rb1(中國藥品生物

4、制品檢定所，批號：110704200420);三七皂苷R1(中國藥品生物制品檢定所，批號：110745200313);甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。2方法和結果21色譜條件色譜柱：Waters YMC ODS (46mm50mm);流動相：以乙腈為流動相A，以水為流動相B;流速為10mL/min，按表1進行梯度洗脫;柱溫為27;檢測波長為203nm。表1梯度洗脫曲線22對照品溶液的制備取三七皂苷R1對照品、人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb1對照品及人參皂苷Rf對照品適量，精密稱定，加入甲醇分別制成三七皂苷R1 0201mg/mL、人參皂苷Rg1 09

5、40mg/mL、人參皂苷Re 0298mg/mL、人參皂苷Rb1 0880mg/mL及人參皂苷Rf 0335mg/mL的溶液，即得。23對照藥材溶液的制備取人參藥材1g，精密稱定，加三氯甲烷40mL，超聲處理1h，濾過，藥渣加適量水濕潤后，加水飽和正丁醇10mL，超聲處理30min，濾過，取上清液加30mL氨試液，搖勻，放置分層，取上層，蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至1mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得人參對照藥材溶液;同法制得三七對照藥材溶液。 09-09-25 15:17:00 編輯：studa2024供試品溶液的制備取芪術調(diào)經(jīng)散1429g，精密稱定，加三氯甲烷100mL，超聲處理1h，濾

6、過，藥渣加適量水濕潤后，加水飽和正丁醇100mL，超聲處理30min，濾過，取上清液加300mL氨試液，搖勻，放置分層，取上層，蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至1mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得。25陰性樣品溶液的制備按本品處方及制備工藝，同供試品溶液的制備方法制得缺人參陰性樣品溶液、缺三七陰性樣品溶液及缺人參、三七雙陰性樣品溶液。26樣品測定分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各10L，注入高效液相色譜儀，測定即得。結果見表2、圖1。表2芪術調(diào)經(jīng)散中皂苷類成分的保留時間由表2和圖1可知，人參和三七中含有共同成分人參皂苷Rg1、人參皂苷Re及人參皂苷Rb1，三七皂苷R1為三七的特征

7、性成分，人參皂苷Rf為人參中的特征性成分。結果表明，在此高效液相色譜條件下，通過三七的特征性成分三七皂苷R1和人參的特征性成分人參皂苷Rf可有效鑒別芪術調(diào)經(jīng)散中的人參和三七成分。3討論研究表明，高向軍等2采用二次展開，使化瘤顆粒中的三七皂苷R1與人參皂苷Re在普通硅膠G板上達到分離，僅僅鑒別出化瘤顆粒中的三七。王曉坤等3采用液液液三相靜態(tài)萃取法對人參、三七和西洋參藥材樣品進行預處理，然后對三相萃取物分別以不同的流動相梯度進行反相高效液相色譜法測定，對參類藥材的復雜成分能進行有效分離，但未能鑒別出三者混合樣品中的人參、三七和西洋參。翟為民等4用Polaris C18A，乙腈水梯度洗脫，流速15m

8、L/min，檢測波長203nm，能有效單獨鑒別人參、西洋參和三七，但不能鑒別出三者混合樣品。董桂玲等5用薄層鑒別的方法分別鑒別出蛇膽號中的人參和三七的共有成分，但不能將兩者區(qū)分開。由于人參和三七含有的成分相似，所知文獻中的薄層鑒別方法僅能對復方中的人參或三七單獨進行鑒別，而未能在復方中同時鑒別這兩種名貴藥材。本研究建立了在芪術調(diào)經(jīng)散中同時鑒別人參和三七的方法。前期研究曾采用顯微鑒別法觀察芪術調(diào)經(jīng)散粉末顯微特征，但由于復方中干擾因素較多，且人參和三七顯微特征極為相似而難以鑒別。也曾以正丁醇乙酸乙酯水(體積比為112，上層)6為展開劑，采用薄層色譜法對芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七進行鑒別，結果表明，三七

9、皂苷R1和人參皂苷Re在此展開條件下不能有效分離?？紤]到高效液相色譜法對結構相似的化學成分的分離效果好、靈敏度高，因此本研究采用高效液相色譜法對芪術調(diào)經(jīng)散中人參和三七成分進行鑒別。結果表明此方法簡便可行，能有效鑒別復方中人參和三七的特征化學成分。本方法的建立為其他復方中人參和三七的同時鑒別起到一定借鑒作用?！緟⒖嘉墨I】 1國家藥典委員會 中華人民共和國藥典(一部)S北京:化學工業(yè)出版社，2005：7，102高向軍，伍丕娥，劉挺松化瘤顆粒的薄層色譜鑒別J華西藥學雜志，1999，14(5-6)：4033王曉坤，程秀民，唐輝，等三相靜態(tài)萃取高效液相色譜法鑒別人參、三七及西洋參J藥物研究，2007，16(20)：304