炙甘草湯對大鼠在體心肌缺血再灌注損傷后左心功能及抗氧化酶的

1、炙甘草湯對大鼠在體心肌缺血再灌注損傷后左心功能及抗氧化酶的影響 【摘要】目的探討炙甘草湯對大鼠在體心肌缺血再灌注損傷后左心功能及抗氧化酶的影響。方法大鼠隨機(jī)分為兩組，生理鹽水對照組和炙甘草湯處理組，分別用生理鹽水和炙甘草湯灌胃4 d后，造成缺血-再灌注模型,觀察再灌注10，20 min后左心室內(nèi)壓力峰值(LVSP)、左心室舒張末期壓(LVEDP)和左心室內(nèi)壓最大變化速率(dp/dtmax)；血中超氧化物歧化酶（SOD）及過氧化氫酶（CAT）活性、活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）含量的變化。結(jié)果再灌注10 min 時，炙甘草湯處理組與生理鹽水對照組比較，LVSP及dp/dtmax明顯升高(P0

2、 01，P0 05), LVEDP明顯降低(P0 01)；再灌注20min后, 炙甘草湯處理組與生理鹽水對照組比較, LVSP明顯升高(P0. 01)、dp/dtmax變化不顯著, LVEDP降低(P0 05)；炙甘草湯能明顯提高再灌注10 min時血中SOD活性(P0.01)，降低MDA和ROS的含量(P0.01)。結(jié)論炙甘草湯能明顯提高缺血-再灌注損傷后的左心功能，可提高血中SOD活性，降低MDA和ROS的含量。 【關(guān)鍵詞】 炙甘草湯 心功能 缺血 再灌注損傷 抗氧化Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Zhi Gan Cao De

3、coction on left cardiac function and antioxidative enzymes in ischemia-reperfusion injured rats.MethodsRats were divided into two groups:control group and treating group,After the rats were adminstrated with 0.9%NaCl or Zhi Gan Cao Decoction for 4 days,the myocardial ischemia-reperfusion injury mode

4、l was established. Left ventricular systolic pressure(LVPS), left ventricular end-diastolic pressure(LVEDP) and dp/dtmax after reperfusion 10min,20min were measured; the activities of SOD and CAT,the levels of ROS and MDA after reperfusion 10min.ResultsZhi Gan Cao Decoction could obviously increase

5、LVSP,dp/dtmax after reperfusion 10min(P0.01,P0.05), decrease LVEDP (P0.01) after reperfusion 10min; increase LVSP after reperfusion 20min(0.01), decrease LVEDP (P0.05) after reperfusion 20min,but had dp/dtmax; Zhi Gan Cao Decoction could obviously increase the activity of SOD,decrease the levels of

6、ROS and MDA(P0.01).ConclusionZhi Gan Cao Decoction can obviously improve the left cardiac function in ischemia-reperfusion injured rats, increase the activity of SOD and decrease the levels of ROS and MDA.Key words：Zhi Gan Cao Decoction; Left cardiac function; Ischemia-reperfusion injury; Antioxidat

7、ive在心血管疾病的 治療 過程中,有許多治療措施都不可避免地造成缺血再灌注損傷,如冠脈搭橋、溶栓治療等,由氧自由基引發(fā)的膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)可導(dǎo)致或加重心肌的損傷，因此缺血再灌注時的心肌保護(hù)越來越成為心血管領(lǐng)域的研究。炙甘草湯(Zhi Gan Cao Decoction)在傷寒論中就用于許多疾病的治療，具有滋陰補血、益氣復(fù)脈之功效，常常用來主治“心動悸，脈結(jié)代”1，至今仍沿用，治療許多類型的心律失常。實驗證明，本方對氯仿致小鼠室顫、烏頭堿致大鼠心律失常均有明顯抑制作用2。本實驗在大鼠在體心肌缺血再灌注模型上，觀察炙甘草湯對大鼠缺血再灌注后左心功能及抗氧化酶的影響。 1 材料與方法 1.1 動物及

8、分組取健康SD大鼠20只，由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，各半，體重（20318.4）g，按 文獻(xiàn) 隨機(jī)分為2組（n=10）：生理鹽水對照組, 常規(guī)喂養(yǎng)，并用生理鹽水罐胃4 d（11.4 mlkg-1），1次/d；炙甘草湯處理組，常規(guī)喂養(yǎng)，并用炙甘草湯罐胃4 d（11.4 mlkg-1），1次/d。1.2 儀器與藥品756MC型紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；BL-410系統(tǒng)（成都泰盟 電子 產(chǎn)品）；活性氧（ROS）測定試劑盒、超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒、過氧化氫酶（CAT）測定試劑盒、丙二醛（MDA）測定試劑盒均為南京建成生物研究所產(chǎn)品；DH-1型呼吸機(jī)；炙甘草湯，按傷寒論原

9、方組成，制成1 g生藥/ml的水煎液。1.3 方法兩組用藥4 d后，動物以20%氨基甲酸乙酯溶液對大鼠行腹腔注射麻醉(1.0 gkg-1)，仰臥位固定于鼠臺，頸部正中切口，分離氣管，作氣管插管，接動物呼吸機(jī)，呼吸機(jī)頻率為40 次/min，潮氣量為25 ml。分離右側(cè)頸外靜脈并插管（便于隨時取血測ROS，CAT，SOD和MDA）。于第3，4肋間隙胸骨外緣開口，打開胸腔，剪開胸包膜，于左冠狀動脈前降支下方穿線備用。分離左側(cè)頸總動脈，行左心室插管，用BL-410系統(tǒng)描記左心室功能參數(shù)：左心室內(nèi)壓力峰值(LVSP)、左心室舒張末期壓(LVEDP)和左心室內(nèi)壓最大變化速率(dp/dtmax)；結(jié)扎冠狀動

10、脈10 min，造成心肌缺血，然后將結(jié)扎線松開，觀察20 min。分別于再灌注10 min和再灌注20 min記錄左心室功能參數(shù)的變化，并取血測ROS，CAT，SOD和MDA。1.4 數(shù)據(jù)處理再灌注10 min，再灌注20 min時左心室功能參數(shù)的變化；SOD與CAT活性、ROS與MDA含量的變化數(shù)據(jù)以s表示，以SPSS FOR WINDOWS 11.5進(jìn)行t檢驗學(xué)處理。 2 結(jié)果 2.1 再灌注10 min時左心室功能參數(shù)的變化再灌注10 min時炙甘草湯處理組與生理鹽水對照組比較, LVSP及dp/dtmax明顯升高(P0.01，P0.05), LVEDP明顯降低(P0.01),見表1。表

11、1 再灌注10min時 LVSP, dp/dtmax和 LVEDP 的變化（略）2.2 再灌注20 min時左心室功能參數(shù)的變化再灌注20 min后, 炙甘草湯處理組與生理鹽水對照組比較, LVSP明顯升高(P0.01)，dp/dtmax變化不顯著, LVEDP降低(P0.05),見表2。表2 再灌注20 min時 LVSP，dp/dt max 和 LVEDP 的變化（略）2.3 再灌注10 min時血中SOD與CAT活性、MDA和ROS含量的變化炙甘草湯能明顯提高再灌注10min時血中SOD活性(P0.01)，降低MDA和ROS的含量(P0.01)，但不能明顯提高CAT活性，見表3。表3 再

12、灌注10 min時血中SOD與CAT活性，MDA和ROS含量的變化（略） 3 討論 心肌缺血再灌注損傷是上常見的病理生理過程,常為心臟病患者猝死的主要原因之一，其發(fā)病機(jī)制與鈣超載、自由基以及能量代謝障礙有關(guān)，心肌缺血-再灌注損傷過程中產(chǎn)生大量的氧自由基，破壞細(xì)胞膜上不飽和脂肪酸，形成脂質(zhì)過氧化物MDA等，導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)和功能破壞，引起嚴(yán)重的心律失常。脂質(zhì)過氧化作用及能量代謝異常是導(dǎo)致心肌缺血再灌注損傷的兩個重要因素，且兩者相互影響。細(xì)胞內(nèi)自由基增多是心肌缺血等諸多病理條件下細(xì)胞損傷的共同機(jī)制之一35。炙甘草湯又名復(fù)脈湯，有益氣養(yǎng)血、滋陰振陽復(fù)脈的作用。溫病條辨說：“溫病誤用升散，脈結(jié)代，甚則兩至者

13、，重與復(fù)脈，雖有他證后治之”“下焦溫病，熱深厥甚，脈細(xì)促，心中憺憺大動，甚則心中痛者，三甲復(fù)脈湯主之?！泵}結(jié)代、心動悸有三種情況：一是心動悸脈結(jié)，二是心動悸脈代，三是心動悸脈既結(jié)又代。炙甘草湯加減能 治療 脈結(jié)、代、促 與既結(jié)又代等多種脈象。本實驗結(jié)果表明炙甘草湯可以提高SOD活性，降低ROS和MDA的含量，提示炙甘草湯可以增強心肌的抗氧化能力，從而減少膜的脂質(zhì)過氧化損傷，最終達(dá)到保護(hù)心肌的作用，同時, 炙甘草湯明顯提高再灌注10 min時LVSP和dp/dtmax，降低LVEDP;明顯提高再灌注20 min時LVSP, 降低LVEDP，說明炙甘草湯具有保護(hù)缺血-再灌注損傷心肌的作用，這種作用

14、可能與炙甘草湯能提高抗氧化酶活性、清除過多氧自由基有關(guān)，從而保護(hù)了心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的完整，有效地保護(hù)了心肌的收縮和舒張功能。炙甘草湯提高LVSP和dp/dtmax、降低LVEDP的具體機(jī)制還不十分清楚，有待進(jìn)一步研究。本實驗提示, 炙甘草湯能清除體內(nèi)活性氧，減少膜脂質(zhì)過氧化，增強左心室的功能，從而保護(hù)心肌缺血-再灌注損傷。【 參考 文獻(xiàn) 】 1馮大千.炙甘草湯治療心律失常的臨床觀察J.湖北中醫(yī)雜志, 2003, 25(12)：29.2李興高，陳 奇，黃夢雨，等炙甘草湯拆方抗心律失常作用的實驗研究J.江西中院學(xué)報，2002，14(3)：7.3王怡，王少峽，任 明，等. 首烏丹參方預(yù)處理對缺血再灌注損傷大鼠心肌保護(hù)作用研究J.天津中醫(yī)藥,2006,23(5):413.4ZHOU P hua，LV Juan xiu，ZHU Da nian. Effects of acupuncture at acupoint nguan(PC6) and intravenous Inje