急性化膿性扁桃體炎證候?qū)哟闻cT淋巴細胞亞群變化的相關(guān)性研究-

1、·臨床研究·基金項目:湖南省教育廳科研項目(No08C621,No10A093;湖南省高校創(chuàng)新平臺開放基金項目(No101C047作者單位:湖南中醫(yī)藥大學,湖南長沙410007通訊作者:周小青,Email :zxq5381sohucom 急性化膿性扁桃體炎證候?qū)哟闻cT 淋巴細胞亞群變化的相關(guān)性研究劉旺華洪凈周小青劉建新曾逸笛【摘要】目的探討急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)分證、氣分證、營分證患者外周血中T 淋巴細胞亞群數(shù)目及比值變化。方法對85例急性化膿性扁桃體炎患者和30例健康體檢兒童用采用流式細胞技術(shù)檢測外周血中T 淋巴細胞亞群的數(shù)目及比值。結(jié)果與正常對照組比較,衛(wèi)分證組CD3+、

2、CD4+細胞數(shù)目、CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P 005,P 001;氣分證組CD3+、CD4+細胞數(shù)目、CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值明顯升高,CD8+/CD3+比值顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P 001;營分證組CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值顯著升高,CD8+/CD3+比值顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P 001。與衛(wèi)分證組比較,氣分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目變化差異無統(tǒng)計學意義(P 005;營分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目均顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P 005,P 001。與氣分證組比較,營分證組

3、CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目均顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P 001。結(jié)論T 淋巴細胞亞群數(shù)目與比值的改變可能是急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)氣營3個不同階段傳變的內(nèi)在原因之一?！娟P(guān)鍵詞】急性化膿性扁桃體炎;證候?qū)哟?T 淋巴細胞【中圖分類號】76618【文獻標識碼】A 【DOI 】1013935/jcnkisjzx140816Correlative Study on Syndrome Hierarchy and T Lymphocyte subsets in A-cute Suppurative TonsillitisLIU Wang hua ,HONG Jing ,ZHOU Xiao qin

4、g ,LIU Jian xin ,ZENG Yi di (Hunan University of Traditional Chinese Medicine ,Changsha Hunan 410007【Abstract 】Objective To discuss the changes in the count and ratios of T lymphocyte subsets in pe-ripheral blood in the patients of acute suppurative tonsillitis differentiated as wei ,qi and ying syn

5、dromesMethods Eighty five patients of acute suppurative tonsillitis and 30children with health physical examina-tion were selectedThe flow cytometry was adopted to determine the counts and ratio of T lymphocyte subsets in peripheral bloodesults Compared with the normal control group ,in wei syndrome

6、 group ,CD3+and CD4+counts ,CD4+/CD3+and CD4+/CD8+were increased significantly ,indicating the significant differ-ence (P 005,P 001;in qi syndrome group ,CD3+and CD4+counts ,CD4+/CD3+and CD4+/CD8+were increased obviously ,and CD8+/CD3+was reduced significantly ,indicating the significant difference

7、(P001;in ying syndrome group ,CD4+/CD3+and CD4+/CD8+were increased significantly ,and CD8+/CD3+was reduced significantly ,indicating the significant difference (P 001Compared with wei syn-drome group ,the differences in the counts of CD3+,CD4+and CD8+were not significant in ying syndromegroup (P 005

8、,the counts of CD3+,CD4+and CD8+were reduced significantly in ying syndrome group ,indicating significant difference (P 005,P 001Compared with qi syndrome group ,the counts ofCD3+,CD4+and CD8+were reduced significantly in ying syndrome group ,indicating significant difference (P 001Conclusion The ch

9、ange in the counts and ratios of T lymphocyte subsets is possibly one of the reasons for the transmission among wei ,qi and ying levels in acute supporative tonsillitis【Key words 】Acute Supporative Tonsillitis ;Syndrome Hierarchy ;T Lymphocytes正常情況下,以分化抗原簇(cluster of differenti-ation ,CD 為區(qū)分標志的CD4+、

10、CD8+等T 淋巴細胞亞群相互介導,相互抑制,處于平衡狀態(tài),當二者之間的比例失衡時往往會引起多種疾病的發(fā)生12,急性化膿性扁桃體炎即為其中的一個例子,乙型溶血性鏈球菌為本病的主要致病菌,當人體抵抗力降低時,病原體大量繁殖,毒素破壞隱窩上皮,細菌侵入其實質(zhì)而發(fā)生炎癥,常伴有一定程度的咽黏膜及咽淋巴組織的急性炎癥,是一種常見的急性咽部疾病,具有反復發(fā)作、易引起局部及全身并發(fā)癥等特點。若不及時治療,可因高熱而引起抽搐、嘔吐及昏睡,也可引起咽旁膿腫等局部并發(fā)癥及心肌炎、腎炎等全身并發(fā)癥3。這與溫病衛(wèi)氣營血由淺入深的傳變過程相似。而其臨床多種表現(xiàn)形式和轉(zhuǎn)歸主要取決于感染機體所產(chǎn)生的免疫的強度及活躍程度,

11、可視為正邪相爭的體現(xiàn)。為了探討二者之間的聯(lián)系,本文觀察了急性化膿性扁桃體炎患者衛(wèi)分證、氣分證、營分證CD3+、CD4+和CD8+淋巴細胞亞群的變化,為揭示急性化膿性扁桃體炎不同階段證候本質(zhì)及衛(wèi)氣營血傳變的內(nèi)在機理提供客觀化依據(jù)。資料與方法一、臨床資料1一般資料:病例和健康體檢兒童均來自湖南中醫(yī)藥大學附一醫(yī)院。選擇兒科門診或住院部患者85例,均符合急性化膿性扁桃體炎的診斷標準。根據(jù)病情進行中醫(yī)衛(wèi)氣營血辨證,分為3組。衛(wèi)分證組30例,男性18例,女性12例,平均年齡(451147歲,體重(1586419kg,扁桃體腫大度18例、度8例、度4例。氣分證組30例,男性14例,女性16例;平均年齡(46

12、8157歲;體重(1621448kg,扁桃體腫大度15例、度15例。營分證組25例,男性14例,女性11例,平均年齡(435183歲,體重(1554435kg,扁桃體腫大度12例、度13例。另外以健康體檢兒童30例作為對照組,男性16例,女性14例,平均年齡(446164歲,體重(1528483kg,兩組一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P005,具有可比性。2診斷標準:(1西醫(yī)診斷標準:西醫(yī)診斷標準參照實用內(nèi)科學4、中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉學5:體溫38,伴有咽痛;扁桃體腫大度,扁桃體及腭舌弓黏膜充血腫脹,表面有膿點或膿性分泌物,白細胞總數(shù)升高,中性白細胞增多。(2中醫(yī)證候診斷(分型標準:中醫(yī)證候診

13、斷(分型標準參照實用中醫(yī)診斷學6,符合其衛(wèi)分證、氣分證、營分證辨證診斷標準者。3納入標準:臨床診斷為急性化膿性扁桃體炎,并符合中醫(yī)辨證屬衛(wèi)分證、氣分證、營分證者。4排除標準:治療前1個月系統(tǒng)使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑和抗生素;或有本病以外的免疫性疾病、系統(tǒng)性疾病和感染性疾病者,以及中醫(yī)辨證符合“衛(wèi)氣同病”、“氣營同病”等兼證證候者。二、方法1儀器和試劑:主要儀器:CO2培養(yǎng)箱為芬蘭Thermo公司生產(chǎn),EPICS XL型流式細胞儀由美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)。主要試劑:佛波醇乙脂(PMA、離子霉素(Ionomycin、布雷菲德菌素A (BrefeldinA,BFA、PBS緩沖液

14、等均購自sigma公司,PMI1640購自北京鼎國生物技術(shù)有限公司。標準微球FlowCheck,購自BD公司。2檢測方法:(1標本采集:清晨空腹采血5 6 mL,肝素抗凝。(2CD3+、CD8+淋巴細胞亞群測定方法:采用免疫熒光流式細胞技術(shù)檢測。取抗凝全血與PM11640培養(yǎng)基11混勻,等分為A、B管。A管加入PMA和ionomycin,濃度分別為25ng·mL1和1g·mL1,再加入濃度為2g·mL1的BA。B管加入BFA,不加PMA/ionomycin。從A、B 兩管中分別取100L培養(yǎng)的全血加入20L CD8+/CD3+抗體混勻,在室溫下孵育15min。加入

15、100L Cytofix/CytopemkitA液,避光室溫保存15 min,加含5mL·L1胎牛血清的PBS液洗滌,12000轉(zhuǎn)·min1條件下離心5min,棄上清液,再加500L PBS待上機。用FlowCheck熒光微球進行光路與流路校正,熒光信號變異系數(shù)CV2%,調(diào)節(jié)電壓及顏色補償,以前向散射光FSC及側(cè)向散射光SSC設(shè)定,選定淋巴細胞群,收集10000個細胞,用EXPO32ADC Analysis軟件分析。三、統(tǒng)計學處理計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)標準差(xs表示,用SPSS150統(tǒng)計軟件統(tǒng)計。多組間比較用單因素方差分析,方差齊時用LSD檢驗,方差不齊時,用Dun-nett

16、's T3檢驗。檢驗水準=005。結(jié)果1各組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目比較:與正常對照組比較,急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)分證組CD3+、CD4+細胞數(shù)目顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P005,P001;氣分證組CD3+、CD4+細胞數(shù)目明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P001;營分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目變化差異無統(tǒng)計學意義(P005。與衛(wèi)分證組比較,氣分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目變化差異無統(tǒng)計學意義(P005;營分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目均顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P001。與氣分證組比較,營分證組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目均顯

17、著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P001。結(jié)果見表1。表1各組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)目比較(xs組別例數(shù)CD3+細胞(個CD4+細胞(個CD8+細胞(個正常對照組301304031247967169650731532衛(wèi)分證組30147852896a93301627b54551299氣分證組30150852700b95801403b55051398營分證組25125842644cd80961424cd44881232cd 注:與正常組比較,a P005,b P001;與衛(wèi)分證組比較,c P001;與氣分證組比較,d P0012各組CD4+/CD3+、CD4+/CD8+和CD8+/ CD3+

18、細胞數(shù)比值比較:與正常對照組比較,急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)分證組CD4+/CD3+和CD4+/ CD8+比值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P005,CD8+/CD3+比值顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P005;氣分證組CD4+/CD3+和CD4+/ CD8+比值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P001,CD8+/CD3+比值顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P001;營分證組CD4+/CD3+和CD4+/ CD8+比值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P001,CD8+/CD3+比值顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P001。與衛(wèi)分證組比較,氣分證組CD4+/ CD3+、CD4+/CD8+和CD8+/CD3+比值變化差異無

19、統(tǒng)計學意義(P005;營分證組CD4+/CD8+比值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P005。與氣分證組比較,營分證組CD4+/CD3+、CD4+/CD8+和CD8+/CD3+比值變化差異無統(tǒng)計學意義(P005。結(jié)果見表2。表2各組CD4+/CD3+、CD8+/CD3+和CD4+/CD8+細胞數(shù)比值比較(xs組別例數(shù)CD4+/CD3+CD8+/CD3+CD4+/CD8+正常對照組30062004038004163028衛(wèi)分證組30063002a037002a175018a氣分證組30064004b036004b183056b營分證組25065027b035003b186023bc 注:與正常組比較

20、,a P005,b P001;與衛(wèi)分證組比較,c P005討論中醫(yī)稱腭扁桃體為喉核,稱急性扁桃體炎為“喉蛾脹”或“蛾風”,黃白膿點分清而不融合的又拿蓮房來比擬,稱為“蓮房蛾”。本病以其發(fā)病熱點屬溫病范疇,其傳變和辨證治療規(guī)律?？勺裱l(wèi)氣營血辨證。從現(xiàn)代醫(yī)學的角度來看,中醫(yī)“溫病”衛(wèi)氣營血證病理實質(zhì)是細菌內(nèi)毒素或病毒引起的炎性反應(yīng)。T淋巴細胞亞群在炎癥性疾病促炎/抑炎失衡中的調(diào)節(jié)作用已被廣泛證實,其中CD4+T細胞的作用主要輔助性T細胞,而CD8分子分布在抑制性T淋巴細胞(suppressor T cell,TS和殺傷性T淋巴細胞表面,CD4+、CD8+的消長平衡能反映促炎/抑炎的失衡方向及程度

21、。維持免疫系統(tǒng)抗炎與抑炎平衡的各T淋巴細胞亞群之間,存在著與中醫(yī)學中各不同證型與疾病進展的相關(guān)性。華銀雙7經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE患者外周血CD4+、CD8+T淋巴細胞亞群的變化與病期和辨證分型有關(guān),提示T淋巴細胞亞群與中醫(yī)證候病理機制有密切相關(guān)性,值得進一步探討。本研究旨在從具有典型衛(wèi)氣營血表現(xiàn)的急性化膿性扁桃體炎切入,探討其各證患者外周血中CD3+、CD4+和CD8+淋巴細胞亞群數(shù)目及比值變化,力圖揭示其衛(wèi)氣營血傳變的病因病機、證候特點和疾病的演變規(guī)律。本研究結(jié)果顯示急性化膿性扁桃體炎患者隨著病情發(fā)展由衛(wèi)氣營分證階段T細胞亞

22、群CD3+、CD4+、CD4+/CD3+和CD4+/CD8+均有升高趨勢,提示溫邪侵襲機體,里熱蒸迫,正氣抗邪作用得以充分動員,免疫系統(tǒng)細胞處于活化狀態(tài),釋放炎癥介質(zhì)以試圖祛邪外出,此時易引起全身炎癥反應(yīng);而CD3+和CD4+T細胞亞群先升后降,氣分證達到頂點,營分證開始回落,提示溫熱邪氣初犯時,病情較輕,機體尚未調(diào)動正氣以固護肌表,氣分證階段正邪抗爭劇烈,進一步隨著疾病的發(fā)展,邪入營分,營陰已損,正氣受損,重要臟器功能及免疫系統(tǒng)機能下降。而衛(wèi)分證CD8+/CD3+的比值下降,提示正氣抗邪作用還沒有充分激發(fā),以致正邪相爭尚不劇烈,不必調(diào)動機體的自我調(diào)節(jié)機制來抑制炎癥細胞的免疫應(yīng)答。同時也顯示肺

23、衛(wèi)為人體第一道防線,它具有抵抗外邪入侵和驅(qū)邪外出的功能。氣分證時CD8+/CD3+比值雖有下降,但是CD8+細胞絕對值有升高趨勢,提示機體為了防止過度應(yīng)激,CD8+細胞同時活化,發(fā)揮抑制效應(yīng),盡力恢復體內(nèi)的自穩(wěn)狀態(tài),促炎抑炎達到一種新的亢盛狀態(tài)的平衡。CD8+細胞增多,而CD8+/CD3+比值卻反而有下降提示:相對于CD8+細胞增多,CD4+細胞升高更有優(yōu)勢,CD4+/CD3+顯著升高達到頂峰,過猶不及,引起了炎癥反應(yīng)的過度泛濫。營分證CD3+、CD4+、CD8+絕對數(shù)與正常組相比無明顯變化,但CD4+/CD3+、CD4+/CD8+的比值明顯升高(P005,P001,而CD8+/CD3+明顯降

24、低(P001,提示營分證階段營熱熾盛,(下轉(zhuǎn)第896頁化背景,從而更好地學習中醫(yī)專業(yè)知識。除了漢語教學,中醫(yī)孔子學院還提供太極拳、太極扇和中國烹飪等課程。24式簡化太極拳是大學中醫(yī)系的必修課程,每年均固定開設(shè)。為滿足大學員工及周邊社區(qū)人士的學習需求,中醫(yī)孔子學院根據(jù)學員的具體情況,教授8式和16式太極拳、八步拳、八段錦和太極扇等。為傳播“藥食同源”的中醫(yī)養(yǎng)生理念,中醫(yī)孔子學院在社區(qū)開辦有中國烹飪系列課程,介紹各種食材的特性與搭配,現(xiàn)場教授烹飪方法,邀請學員品嘗。2中醫(yī)文化活動:圍繞“中醫(yī)”主題,中醫(yī)孔子學院面向大學中醫(yī)系學生開展多種形式的中醫(yī)文化活動,或在其他文化活動中融入中醫(yī)藥“元素”?！爸?/p>

25、醫(yī)入門大家談”邀請中醫(yī)系高年級學生和往屆畢業(yè)生,向一年級新生介紹學習中醫(yī)的體會,交流學習中醫(yī)的經(jīng)驗與方法;在“中國語言文化日”,演示太極拳、中國畫和書法,并進行現(xiàn)場互動,提高他們對中國文化的興趣和熱情;在書法講座中,把“陰陽”“金木水火土”“得氣”等作為演練的內(nèi)容,藉此介紹漢字的形體結(jié)構(gòu)、發(fā)展衍化,以及這些醫(yī)用漢字中所隱含的中醫(yī)文化蘊涵;以“中醫(yī)”為“漢語角”的話題,練習漢語口語,同時引導學員展開交流與討論;面向赴南京實習的中醫(yī)系本科5年級學生,征集中國與中醫(yī)主題的攝影作品,在中醫(yī)系展出并進行評比和頒獎;結(jié)合元宵節(jié)、中秋節(jié)等節(jié)日慶祝活動,開展中醫(yī)藥燈謎競猜、中醫(yī)故事會等活動,激發(fā)學員學習中醫(yī)、

26、探索中醫(yī)文化奧秘的興趣。中醫(yī)孔子學院還走出校園,融入社區(qū),面向更為廣泛的群體傳播中醫(yī)文化。一方面,聯(lián)合維多利亞州執(zhí)業(yè)中醫(yī)師協(xié)會、針灸師協(xié)會等民間中醫(yī)社團,邀請中西醫(yī)專業(yè)人士,不定期組織舉辦中醫(yī)文化沙龍、中醫(yī)文化論壇等活動,促進本地區(qū)中西醫(yī)從業(yè)人員及中醫(yī)從業(yè)人員之間的相互聯(lián)系與交流。如以“當西醫(yī)遇到中醫(yī)”為主題的系列論壇,從中西醫(yī)不同的視角闡釋同一疾病的發(fā)生機制及防治措施,既拓寬了思路,同時增進了雙方之間的理解;關(guān)于“人參的功效與食用方法”的文化沙龍不僅有科研成果的介紹和展示,對參與活動的非專業(yè)人士也是一次認識上的普及。另一方面,參與其他組織或單位主辦的墨爾本老人節(jié)、中國文化節(jié)及社區(qū)健康論壇等大型活動,進行中藥材的展示和中醫(yī)養(yǎng)生與健康咨詢,利用這些活動參與者眾多的特點,向更多民眾傳遞中醫(yī)文化信息,傳播中醫(yī)養(yǎng)生理念。通過中醫(yī)文化海外傳播的實踐,皇家