實驗22細(xì)菌的芽孢染色ppt課件

1、實實 驗驗 2-2細(xì)菌的芽孢染色細(xì)菌的芽孢染色 細(xì)菌的染色和細(xì)菌細(xì)胞構(gòu)造的察看 目的要求目的要求 染色原理染色原理 實驗資料實驗資料 實驗程序?qū)嶒灣绦?思索題思索題目的要求目的要求 無菌操作無菌操作 微生物涂片微生物涂片 掌握細(xì)菌的芽孢染色枯草桿菌掌握細(xì)菌的芽孢染色枯草桿菌 熟煉顯微鏡運用熟煉顯微鏡運用實驗資料實驗資料 涂片染色用的細(xì)菌培育物涂片染色用的細(xì)菌培育物 芽孢染色枯草桿菌芽孢染色枯草桿菌24-48h的斜面培育物。的斜面培育物。 5%孔雀綠水溶液、孔雀綠水溶液、0.5%番紅水溶液番紅水溶液 顯微鏡、鏡頭油、擦鏡紙、吸水紙等。顯微鏡、鏡頭油、擦鏡紙、吸水紙等。細(xì)菌的芽孢染色原理細(xì)菌的芽孢

2、染色原理 細(xì)菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，細(xì)菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易著色，假設(shè)用普通染色法只能使菌體著色而芽孢不著色芽假設(shè)用普通染色法只能使菌體著色而芽孢不著色芽孢呈無色透明狀。芽孢染色法就是根據(jù)芽孢既難以孢呈無色透明狀。芽孢染色法就是根據(jù)芽孢既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設(shè)計的。染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設(shè)計的。一切的芽孢染色法都基于同一個原那么：除了用著色一切的芽孢染色法都基于同一個原那么：除了用著色力強的染料外，還需求加熱，以促進(jìn)芽孢著色。當(dāng)染力強的染料外，還需求加熱，以促進(jìn)芽孢著色。當(dāng)染芽孢時，菌體也會著色，然后水洗，芽孢染上的顏色

3、芽孢時，菌體也會著色，然后水洗，芽孢染上的顏色難以滲出，而菌領(lǐng)會脫色。然后用對比度強的染料對難以滲出，而菌領(lǐng)會脫色。然后用對比度強的染料對菌體復(fù)染，使菌體和芽孢呈現(xiàn)出不同的顏色，因此能菌體復(fù)染，使菌體和芽孢呈現(xiàn)出不同的顏色，因此能更明顯地烘托出芽孢，便于察看。更明顯地烘托出芽孢，便于察看。 Schaeffer與與Fulton氏染色法氏染色法 ，改良的，改良的Schaeffer和和Fulton氏染色法氏染色法 芽孢染色的方法和步驟芽孢染色的方法和步驟1.涂片、枯燥、固定：待涂片晾干后在酒精燈火焰上經(jīng)過23次。2.染色：加染色液：加5%孔雀綠水溶液于涂片處染料以鋪滿涂片為度，然后將涂片放在銅板上，

4、用酒精燈火焰加熱至染液冒蒸汽時開場計算時間，約維持5-10min。加熱過程中要隨時添加染色液，切勿讓標(biāo)本干涸。加熱時溫度不能太高。水洗：待玻片冷卻后 ，用水悄然地沖洗，直至流出的水中無染色液為止。復(fù)染：用蕃紅液染色1-2min。3.水洗、晾干或吸干。4.鏡檢：察看：芽孢菌體顏色、外形、著生位置、芽孢囊特征等。 簡約流程簡約流程 涂片枯燥固定涂片枯燥固定5%孔雀孔雀綠水溶液，加熱至染液冒蒸汽，約維綠水溶液，加熱至染液冒蒸汽，約維持持5min勿干勿干冷卻冷卻水洗水洗番紅液染色番紅液染色1-2min水洗水洗晾干或吸干晾干或吸干鏡檢鏡檢記錄記錄 錄像演示錄像演示 思考題思考題 芽孢染色法蕃紅為什么用水溶液？芽孢染色法蕃紅為什么用水溶液？ 芽孢染色法為什么運用孔雀綠？芽孢染色法為什么運用孔雀綠？實實 驗驗 2-22-2結(jié)結(jié) 束束染色簡約流程染色簡約流程 莢膜染色莢膜染色 制片制片枯燥空氣中晾干或用冷風(fēng)吹干枯燥空氣中晾干或用冷風(fēng)吹干復(fù)紅染色液染色復(fù)紅染色液染色3-5min水洗水洗枯燥晾枯燥晾干干涂苯胺黑薄層涂苯胺黑薄層風(fēng)干風(fēng)干鏡檢鏡檢記錄記錄 芽孢染色芽孢染色 涂片枯燥固定涂片枯燥固定5%孔雀綠水溶液，孔雀綠水溶液，加熱至染液