四、常用緩沖溶液的配制

1、四、常用緩沖溶液的配制 常用的某些緩沖液列在下表中。絕大多數(shù)緩沖液的有效范圍約在其 pK a 值左右 1pH 單位。 酸 或 堿 pK a 1 pK a 2 pK a 3 磷酸 2.1 7.2 12.3 檸檬酸 3.1 4.8 5.4 碳酸 6.4 10.3 醋酸 4.8 巴比妥酸 3.4 Tris （三羥甲基氨基甲烷） 8.3 選擇實(shí)驗(yàn)的緩沖系統(tǒng)時(shí)，要特別慎重。因?yàn)橛绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有時(shí)并不是緩沖液的 pH 值，而是緩沖液中的某種離子。選用下列緩沖系統(tǒng)時(shí)應(yīng)加以注意。 1. 硼酸鹽 這個(gè)化合物能與許多化合物（如糖）生成復(fù)合物。 2. 檸檬酸鹽 檸檬酸離子能與 Ca 2+ 結(jié)合，因此不能在 Ca

2、 2+ 存在時(shí)使用。 3. 磷酸鹽 它可能在一些實(shí)驗(yàn)中作為酶的抑制劑甚至代謝物起作用。重金屬離子能與此溶液生成磷酸鹽沉淀，而且它在 pH7.5 以上的緩沖能力很小。 4. Tris 這個(gè)緩沖液能在重金屬離子存在時(shí)使用，但也可能在一些系統(tǒng)中起抑制劑的作用。它的主要缺點(diǎn)是溫度效應(yīng)（此點(diǎn)常被忽視）。室溫時(shí) pH7.8 的 Tris 緩沖液在 4 時(shí)的 pH 為 8.4 ，在 37 時(shí)為 7.4 ，因此一種物質(zhì)在 4 制備時(shí)到 37 測(cè)量時(shí)其氫離子濃度可增加 10 倍之多。 Tris 在 pH7.5 以下的緩沖能力很弱。 （一） 磷酸氫二鈉檸檬酸緩沖液 pH 0.2 mol/L Na 2 HPO 4（

3、mL） 0.1 mol/L 檸檬酸（mL） pH 0.2 mol/L Na 2HPO 4（mL ） 0.1 mol/L 檸檬酸（ mL ） 2.2 0.40 19.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91 3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37 3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15 3.6 6.44 13.56 6.6 1

4、4.55 5.45 3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55 4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27 4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85 5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na 2 HPO 4 相對(duì)分子質(zhì)量 =141.98 ； 0.2 mol/L 溶液為 28.40 g L 。 Na 2 HPO 4 · 2H 2 O 相

5、對(duì)分子質(zhì)量 =178.05 ； 0.2 mol/L 溶液含 35.61 g L 。 C 6 H 8 O 7 · H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =210.14 ； 0.1 mol/L 溶液為 21.01 g L 。 （二）檸檬酸 - 檸檬酸鈉緩沖液（ 0.1 mol/L ）   pH 0.1 mol/L檸檬酸（ mL ） 0.1 mol/L 檸檬酸鈉（ mL ） pH 0.1 mol/L 檸檬酸（ mL ） 0.1 mol/L 檸檬酸鈉（ mL ） 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7 3.4 16.0 4.0 5

6、.4 6.4 13.6 3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5 3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3 4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2 4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2 4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0 4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6 4.8 9.2 10.8       檸檬酸 C 6 H 8 O 7 · H 2 O ，相對(duì)分子質(zhì)量 =210.14 ； 0.1 mol/L 溶液為 21.01 g L 。 檸檬酸鈉 Na 3 C 6 H 5 O 7

7、83; 2H 2 O ，相對(duì)分子質(zhì)量 =294.12 ； 0.1 mol/L 溶液為 29.41 g/L 。 （三）醋酸 - 醋酸鈉緩沖液（ 0.2 mol/L ）   PH （ 18 ） 0.2 mol/L NaAC （ mL ） 0.2 mol/L HAC （ mL ） PH （ 18 ） 0.2 mol/L NaAC （ mL ） 0.2 mol/L HAC （ mL ） 3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10 3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00 4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10 4.2 2.65 7.35 5.4 8.

8、60 1.40 4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90 4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60 NaAC · 3H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =136.09 ； 0.2 mol/L 溶液為 27.22 g L 。 （四）磷酸鹽緩沖液 1. 磷酸氫二鈉 - 磷酸二氫鈉緩沖液（ 0.2 mol/L ） pH 0.2 mol/L Na2HPO 4（mL） 0.2 mol/LNaH2PO 4（mL） pH 0.2 mol/LNa2HPO4（mL） 0.2 mol/LNaH2PO4（mL） 5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0 5.9 10.0 90

9、.0 7.1 67.0 33.0 6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0 6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0 6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0 6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0 6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0 6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5 6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5 6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0 6.8 49.0 51.0 8.0 94.7 5.3 6.9 55.0 45.0      

10、   Na 2 HPO 4 · 2H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =178.05 ； 0.2 mol/L 溶液為 35.61 g/L 。 Na 2 HPO 4 · 12H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =358.22 ； 0.2 mol/L 溶液為 71.64 g/L ， NaH 2 PO 4 · H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =138.01 ； 0.2 mol/L 溶液為 27.6 g/L 。 NaH 2 PO 4 · 2H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =156.03 ； 0.2 mol/L 溶液為 31.21 g/L 。   2. 磷酸氫二鈉 - 磷酸二

11、氫鉀緩沖液（ 1/15 mol/L ） pH 1/15 mol/L Na 2 HPO 4（mL） 1/15 mol/LKH 2 PO 4（mL） pH 1/15 mol/LNa2HPO 4（mL ） 1/15 mol/LKH 2 PO 4 （ mL ） 4.92 0.10 9.90 7.17 7.00 3.00 5.29 0.50 9.50 7.38 8.00 2.00 5.91 1.00 9.00 7.73 9.00 1.00 6.24 2.00 8.00 8.04 9.50 0.50 6.47 3.00 7.00 8.34 9.75 0.25 6.64 4.00 6.00 8.67 9.9

12、0 0.10 6.81 5.00 5.00 8.18 10.00 0 6.98 6.00 4.00       Na 2 HPO 4 · 2H 2 O 相對(duì)分子質(zhì)量 =178.05 ； 1/15 mol/L 溶液為 11.876 g/L 。 KH 2 PO 4 相對(duì)分子質(zhì)量 =136.09 ； 1/15 mol/L 溶液為 9.078 g/L 。 （五）巴比妥鈉 - 鹽酸緩沖液（ 18 ） pH 0.04 mol/L 巴比妥鈉溶液 （ mL ） 0.2 mol/L鹽酸（mL） pH 0.04 mol/L巴比妥鈉溶液（mL） 0.2 mol/L鹽酸（mL）

13、 6.8 100 18.4 8.4 100 5.21 7.0 100 17.8 8.6 100 3.82 7.2 100 16.7 8.8 100 2.52 7.4 100 15.3 9.0 100 1.65 7.6 100 13.4 9.2 100 1.13 7.8 100 11.47 9.4 100 0.70 8.0 100 9.39 9.6 100 0.35 8.2 100 7.21       巴比妥鈉鹽相對(duì)分子質(zhì)量 =206.18 ； 0.04 mol/L 溶液為 8.25 g/L   （六） Tris - 鹽酸緩沖液（ 25 ） 50 mL

14、0.1 mol/L 三羥甲基氨基甲烷（ Tris ）溶液與 x mL 0.1 mol/L 鹽酸混勻后，加水稀釋至 100 mL 。   pH X （ mL ） pH X （ mL ） 7.10 45.7 8.10 26.2 7.20 44.7 8.20 22.9 7.30 43.4 8.30 19.9 7.40 42.0 8.40 17.2 7.50 40.3 8.50 14.7 7.60 38.5 8.60 12.4 7.70 36.6 8.70 10.3 7.80 34.5 8.80 8.5 7.90 32.0 8.90 7.0 8.00 29.2       羥甲基氨基甲烷（ Tris ）相對(duì)分子質(zhì)量 =121.14 ； 0.1 mol/L 溶液為 12.114 g/L 。 Tris 溶液可從空氣中吸收二氧化碳，使用時(shí)注意將瓶蓋嚴(yán)。     （七）碳酸鈉 - 碳酸氫鈉緩沖液（ 0.1 mol/L ）   PH 0.1 mol/LNa 2 CO 3 （ mL ） 0.1 mol/LNaHCO 3 （ mL ） 20 37 9.16 8.77 1 9 9.40 9.12 2 8 9.51 9.40 3 7 9.7