應(yīng)用繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及計算樣本濃度

1、應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計算樣本濃度整體思路：在ELISA實驗結(jié)束后，我們得到的是經(jīng)酶標(biāo)儀讀出的標(biāo)準(zhǔn)品以及樣本 的0D值。其中，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，我們可以利用標(biāo)準(zhǔn)品的0D值及其相對應(yīng)的 濃度，以O(shè)Dfi為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并用公式表示出來。 這樣，我們把樣本的0D值以X值代入，便可求出丫值，即樣本濃度。下面我們就一步步來實現(xiàn)這個目標(biāo)：1.首先，將數(shù)據(jù)整理好輸入 Excel，分別為經(jīng)酶標(biāo)儀讀出標(biāo)準(zhǔn)品的 0D值及其對應(yīng)的濃度值。2.拖動鼠標(biāo)選取完成的數(shù)據(jù)區(qū)，并點擊圖表向?qū)?，在圖表類型中選“XY散點圖，并選擇子圖表類型的“散點圖第一個沒有連線的。如下列圖所示。12345

2、6789101112131415161Y標(biāo)準(zhǔn)品3值 標(biāo)穂品痕度LE2 S510C11屯£ :里回宅?文件粽輯視圉插入Q胳式© 3© 數(shù)據(jù)Q窗口即幫勖Qp Aiobe PDFq _j丿交2 EU也3點擊“下一步，出現(xiàn)如下列圖界面。如是輸入是如本例橫向列表的就不用更改,如果是縱向列表就改選“列。21二5丈件嚟 詹®3扌卞準(zhǔn)品燈3j1718在做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過此曲線求樣本濃度時，因樣本 0D值是的，因 此，我們需要將0D值設(shè)為X。根據(jù)上圖我們可以看到，橫坐標(biāo) X值為0D值，縱 坐標(biāo)丫為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這正是我們想要的。4.有時需要我們手動選擇X值，這時可

3、以點擊“系列來更改，如下列圖2_31述.11 I12 'H1S1617ISJJBI 10(如果要對橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)進(jìn)行掉換，我們可以就點擊X值和丫值文本框右邊的小圖標(biāo)，結(jié)果如下列圖:里文件® 編輯翅 視圖電插入© 格式辺 工具Q ss ®掘口世峯助闔1Ac -(T)'£r6 11 tI" I ,123標(biāo)準(zhǔn)品0D值2- 8221.8550,459 0,3070,212o. lea4標(biāo)準(zhǔn)品派度10005002 B012562.5 31.2515. 625o.5A 2.S22B368卜Eh洋圖表向?qū)?步廉之2圖丟源致?lián)﨓血 asyfab

4、s. com. on出現(xiàn)上圖后，拖動鼠標(biāo)選取正確的數(shù)據(jù)區(qū)域以調(diào)整X或Y。5.調(diào)好之后，然后點擊“下一步出現(xiàn)圖表選項界面，如下列圖商龍件里1鋼輯QD I1SCK)樁式 工具的 魏據(jù)卸曾口電Id-JfhL-宀=皚一. ;=矗 2* 3221 1 F"B "I C DEFGH 1r i j闍茨佝5|涉UN 3；3r s i6r 7t 8 11 9 jupfnl12Lu141&16J7 .標(biāo)準(zhǔn)品濃用害疑題J 皿芫戰(zhàn)燮)6點擊“下一步，在彈出的窗口再點擊“完成現(xiàn)在一張帶標(biāo)準(zhǔn)值的完整散點 圖就已經(jīng)完成，如下列圖。7.到了這一步，散點圖便完成了。我們可能會問，曲線在哪里啊其實很簡

5、單，先點擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點記住一定要點選上 ，然后單擊右鍵，點 擊“添加趨勢線。如下列圖：8.彈出趨勢線類型選擇對話框，有線性，對數(shù)，多項等選項，如下列圖9. 在選擇之前，我們先對上圖做一下肉眼觀察，如果那些點能連成一條直線，或 接近直線，我們就選擇“線性，意思就是出來的趨勢線是一條直線，相應(yīng)的該 直線的方程就是y=ax+b的形式。不過，一般的ELISA都不會是所有的標(biāo)準(zhǔn)點呈 完全的線性關(guān)系的，也就是說不是一條完全的直線，這時我們可以選擇“多項式， 多項式后面還有“階數(shù)的選項，也就是說求出來的方程是幾次方，我們一般選“2階，即出來的方程為y=ax2+bx+c.選擇完畢后，彈出以下窗口10. 趨勢線也就是標(biāo)準(zhǔn)曲線在此便顯示出來了。接下來，我們需要將公式顯示出 來，以根據(jù)樣本的0D值計算其濃度值。在鼠標(biāo)點選該線一定要選中，選中后 出現(xiàn)下列圖的樣子即線由很多點標(biāo)識出來，單擊鼠標(biāo)右鍵，選擇趨勢線格式11. 我們在彈出的窗口中選擇“選項選項卡，出現(xiàn)下列圖，我們選擇顯示公式, 顯示R方，即相關(guān)系數(shù)，這時公式與 R方值便都顯示出來了。我們將樣本的0D值作為