鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備工藝和體外釋放研究

1、鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備工藝和體外釋放研究劉欣，薛紅梅，王建明*，高月娟(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江 哈爾濱 150040）摘要：目的 用丙烯酸樹脂水分散體包衣技術(shù)制備pH敏感-時(shí)間控釋型鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片，評(píng)價(jià)其體外釋藥特性。方法 采用滾轉(zhuǎn)包衣機(jī)多層薄膜包衣技術(shù)制備結(jié)腸定位包衣片，以羥丙甲纖維素HPMC作為隔離層，pH敏感型丙烯酸樹脂Eudragit L30D-55與Eudragit S100混合包衣液作為腸溶層，滲透型丙烯酸樹脂Eudragit RL30D和EudragitRS30D混合液作為緩釋層，以檸檬酸三乙酯作為增塑劑，滑石粉作為抗粘劑，通過正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行處方優(yōu)化

2、，研究包衣片在模擬人體胃腸道環(huán)境中的釋藥速率。結(jié)果 最佳包衣處方：隔離層增重1.2%；腸溶層組成Eudragit L30D-55：S100（1：5），包衣增重4%；緩釋層組成（1：1），包衣增重2%。包衣片在0.1moL·L-1鹽酸溶液中2小時(shí)無藥物釋放，在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中3小時(shí)藥物釋放低于10%，在pH7.8的磷酸鹽緩沖液中呈緩慢釋放，12小時(shí)內(nèi)藥物釋放量在70%左右，累積釋藥百分率高于標(biāo)示量的80%。結(jié)論 水分散體包衣技術(shù)制備結(jié)腸定位包衣片工藝合理可行，有良好的開發(fā)和應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞：鹽酸小檗堿；結(jié)腸定位包衣片；丙烯酸樹脂水分散體 Study on the prepar

3、ation of colon-specific delivery system for pH and time-controlled coated tablets of berberine hydrochloride and its in vitro releaseLIU Xin, XUE Hong-Mei ,WANG Jian-Ming, GAO Yue-Juan(Academy of Traditional Chinese Medicine, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)Abstract

4、: Objective To prepare a colon-specific delivery system for pH-dependent and time-contolled coated tablets of berberine hydrochloride with acrylic resin water dispersion coating technique , and the drug release in vitro was evaluated. Methods The berberine hydrochloride colon-specific targeting coat

5、ed tablets were prepared by a sugar coater, with multi-layer coating technology, using HPMC as sealing-coat layer, Eudragit L30D-55/S100 as enteric-dissolved layer, and Eudragit RL30D/RS30D as sustained-release layer, using triethyl citrate as plasticizer and talc powder as antisticking agent. An op

6、timal prescription was obtained by orthogonal design. The drug dissolusion rate in vitro was studied in simulating gastrointestinal circumstances. Results The result of orthogonal experiment showed that combination of Eudragit L30D-55/S100 was 1:5, coating weight was 4%; combination of Eudragit RL30

7、D/RS was 1:1, coating weight was 2%, were the optimal formulation. There was no drug released in 0.1moL·L-1 hydrochloric acid solution for 2 hours. In pH6.8 phosphate buffer, dissolution rate was less than 10% for 3 hours. In pH7.8 phosphate buffer, the coated tablets showed sustained-release b

8、ehavior, ahout 70% of the drug would be released to colon region for 12 hours. The accumulated dissolution rate was 80%. Conclusion The preparation procedure of pH-dependent and time-contolled coated tablets with acrylic resin water dispersion coating technique was feasible and practical. The colon-

9、specific targeting system has extensive potential development and clinical application.Key words : berberine hydrochloride; colon-specific coated tablets; acrylic resin water dispersion 潰瘍性結(jié)腸炎是一種以結(jié)腸粘膜彌漫性炎癥和潰瘍形成為病理特點(diǎn)的消化道疾病，癥狀表現(xiàn)為腹痛、腹瀉以及粘液膿血便等，持久不愈或反復(fù)發(fā)作，病變部位主要累及直腸、乙狀結(jié)腸，也可波及升結(jié)腸或全結(jié)腸，并發(fā)結(jié)腸癌的危險(xiǎn)性較高。鹽酸小檗堿為中國(guó)藥

10、典收載的常用抗菌藥，在治療腸炎方面療效顯著，副作用小。但是，傳統(tǒng)的鹽酸小檗堿片劑或膠囊口服后，在胃內(nèi)崩解，藥物成分大多數(shù)被胃酸降解，而普通腸溶制劑藥物主要在小腸內(nèi)釋放，大部分藥物經(jīng)小腸吸收入血，并且因首過效應(yīng)使藥物代謝失活，都會(huì)使到達(dá)結(jié)腸段的藥物濃度降低，治療效果不理想。直腸給藥個(gè)體差異較大，藥物分布不均勻，僅限于直腸和乙狀結(jié)腸，達(dá)不到橫結(jié)腸和升結(jié)腸，且使用不便。如果采用結(jié)腸靶向給藥可使藥物集中在結(jié)腸內(nèi)釋放，藥物分布均勻，且結(jié)腸段血流量少，物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)速度緩慢，藥物在結(jié)腸滯留時(shí)間較長(zhǎng)，有利于臨床治療。本文以鹽酸小檗堿為模型藥物，采用Eudragit（優(yōu)特奇）水分散體包衣材料，根據(jù)pH敏感-時(shí)間控釋

11、雙重機(jī)理，制備結(jié)腸定位包衣片，使藥物主要在結(jié)腸段恒速釋放，提高結(jié)腸病變部位的藥物濃度，發(fā)揮藥物最佳療效，為中藥新型結(jié)腸靶向給藥系統(tǒng)的研究積累實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。1實(shí)驗(yàn)材料11 儀器 Spectrum 756pc型紫外可見分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）；DP-120型單沖壓片機(jī)（丹東市制藥設(shè)備廠）；LB881C型六管崩解儀（上海分析儀器廠）；YD-20型智能片劑硬度儀（天大天發(fā)科技有限公司）；BY300A小型包衣機(jī)（上海黃海藥檢儀器有限公司）；BT01-100型蘭格蠕動(dòng)泵（保定蘭格恒流泵有限公司）；GREEN空氣壓縮機(jī)（臺(tái)灣得力特氣動(dòng)工具有限公司）；R1003 型噴槍：工作氣壓 2.03.5 bar(

12、TAI ZHOU ROMCPENG AIR TOOLS CO.LIT)；GZX-9146MBE型數(shù)顯式電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）； D-800LS型智能藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；AG-135型電子分析天平（瑞士METTLER-TOLEPO公司）；JB50-D型増力電動(dòng)攪拌機(jī)（上海標(biāo)本模型廠）；FE20/EL20型實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。1.2 材料 鹽酸小檗堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；鹽酸小檗堿原料藥（哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司提供）；藥用淀粉（哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司提供）；蔗糖（藥用規(guī)格）；羧甲基纖維素鈉CMC-Na（沈陽市新西試劑

13、廠）；低取代羥丙基纖維素L-HPC（哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司提供）藥用滑石粉（哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司提供）；羥丙甲纖維素HPMC 6cp（Colorcon Coating Technology Limited）；聚乙二醇PEG4000（北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司）；腸溶型丙烯酸樹脂Eudragit S100固體粉末（德國(guó)羅姆公司,Lot NO. B050805074）；腸溶型丙烯酸樹脂Eudragit：L-30D-55分散體（德國(guó)羅姆公司,Lot NO.B060514206）；滲透型丙烯酸樹脂Eudragit：RL30D分散體（德國(guó)羅姆公司,Lot NO.G060216036），RS30D分

14、散體（德國(guó)羅姆公司,Lot NO.G050918133）；檸檬酸三乙酯TEC（上海申寶香料有限公司）；其他試劑均為分析純。2.方法與結(jié)果2.1 片芯處方與工藝研究經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)，通過對(duì)多種填充劑、崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑的初步篩選，以單因素考察的結(jié)果，選定淀粉和蔗糖為填充劑，低取代羥丙基纖維素為崩解劑，羧甲基纖維素鈉為粘合劑，滑石粉為潤(rùn)滑劑，采用濕法制粒。以崩解時(shí)限和硬度為指標(biāo)，調(diào)整處方中崩解劑、粘合劑的含量和壓片機(jī)的壓力，制備鹽酸小檗堿片芯。 片芯制備方法：將鹽酸小檗堿原料和輔料干燥后過100目篩，按處方量稱取鹽酸小檗堿原料、蔗糖、淀粉、低取代羥丙基纖維素混合均勻，加入適量5%羧甲基纖維素鈉水溶液作

15、為粘合劑制軟材，過30目篩制粒，60干燥1h，干顆粒外加適量滑石粉，過24目篩整粒，選用直徑為8mm的淺凹沖模壓片。壓片時(shí)保持硬度在(25.4±3.8) N/cm2范圍內(nèi)，主藥含量為100mg，理論片重150mg/片。以上述試驗(yàn)優(yōu)化的片芯處方，連續(xù)制備3批樣品，每批10片，考察樣品批內(nèi)、批間片芯外觀與崩解特性的均一性及制劑工藝的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，制得的片芯外觀光潔，具有適宜的硬度，符合包衣片芯的要求，且批內(nèi)、批間重現(xiàn)性良好，體外崩解時(shí)限為(5.9±0.3) min ,RSD為1.61% ,證明工藝穩(wěn)定性良好。2.2包衣液處方與包衣工藝研究目前，大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)腸靶向給藥系

16、統(tǒng)（OCDDS）主要基于3種釋藥機(jī)制：pH敏感型、時(shí)間控釋型和酶觸發(fā)型。pH敏感型和時(shí)間控釋型結(jié)腸靶向制劑的研究比較成熟，已分別有產(chǎn)品上市，但是在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，由于消化道內(nèi)pH的多樣性和胃腸道排空時(shí)間存在較大的個(gè)體差異，僅依靠pH或時(shí)間控釋的單一釋藥機(jī)制，很難實(shí)現(xiàn)精確的結(jié)腸定位，影響制劑療效。因此，本文將pH敏感和時(shí)間控釋兩種原理聯(lián)合運(yùn)用，利用多層包衣法，由內(nèi)至外主要分為：隔離層、腸溶層和緩釋層。以腸溶型和滲透型丙烯酸樹脂為主要包衣材料，制備pH敏感-時(shí)間控釋OCDDS，從而提高結(jié)腸定位釋藥的可靠性。2.2.1滾轉(zhuǎn)包衣基本工藝參數(shù)：熱風(fēng)干燥溫度：4550。適當(dāng)升高干燥溫度，可有效提高水分散體

17、包衣效率，衣膜形成迅速，外觀致密光潔，減少粘連現(xiàn)象。噴霧速度和霧滴大小：蠕動(dòng)泵供液速度以約0.3ml/min為宜，調(diào)整霧化壓力為4kg/cm2和噴口狀態(tài)以便獲得相對(duì)盡量細(xì)小的霧滴。噴霧速度過快、霧滴過大則片芯表面濕潤(rùn)過度，水分散體包衣液在短時(shí)間內(nèi)未能充分干燥，容易發(fā)生片芯粘連現(xiàn)象，甚至產(chǎn)品包衣不完整。轉(zhuǎn)速及物料滾動(dòng)狀態(tài)：轉(zhuǎn)速對(duì)片芯滾動(dòng)狀態(tài)影響較大，試驗(yàn)得出適宜轉(zhuǎn)速為50r/mim。由于包衣鍋內(nèi)壁光滑，不利于物料在其中的均勻滾動(dòng)，易導(dǎo)致片芯滑動(dòng)，影響包衣。通過采用包衣鍋內(nèi)置擋板（焊接4根鐵條），使片芯在滾動(dòng)時(shí)摩擦力增大，呈現(xiàn)理想的均勻滾動(dòng)狀態(tài)。 槍-床距離：主要影響包衣液噴霧扇面的大小，經(jīng)測(cè)試確

18、定槍-床距離為15cm左右。包衣液有效利用率：35%40%左右。2.2.2包衣液的配制 隔離層的配制：取3%HPMC為包衣材料，加入一定比例PEG4000作為增塑劑，溶于95%乙醇中，混合均勻，水浴加熱使溶解。 腸溶層的配制：首先制備Eudragit S100水分散體（取處方量S100粉末，在不斷攪拌下加入水中，滴加稀氨水，攪拌 60min,再滴加TEC作為增塑劑，繼續(xù)攪拌60min,即得均勻穩(wěn)定的水分散體。），再將TEC和滑石粉加入適量水中，攪拌均勻，然后按比例加入Eudragit S100分散體和Eudragit L-30D-55分散體，攪拌60min,過80目篩，即得腸溶層水分散體包衣液

19、。 緩釋層的配制：將TEC和滑石粉加入適量水中，攪拌均勻，然后按比例加入Eudragit RL30D分散體和Eudragit RS30D分散體，攪拌60min, 過80目篩，即得緩釋層水分散體包衣液。2.2.3包衣方法將片芯置于傾角為45°的包衣鍋內(nèi)，用熱空氣將篩去細(xì)粉的片芯預(yù)熱至3540，轉(zhuǎn)速為50r/mim，使片芯充分打磨10min，使邊緣光滑以利于包衣，選取合格片芯稱重，進(jìn)行包衣。打開空氣壓縮機(jī)使達(dá)到霧化壓力，蠕動(dòng)泵恒速輸送包衣液，吹風(fēng)機(jī)進(jìn)風(fēng)（4550），調(diào)整好噴槍角度、進(jìn)風(fēng)位置和流速，使包衣液均勻地噴散到片芯的表面,控制包衣鍋的轉(zhuǎn)速并打開噴槍開始進(jìn)行包衣,初始階段噴霧速度應(yīng)較

20、小以免水分滲入片芯,當(dāng)片芯表面有薄膜形成后增大噴霧速度,若發(fā)現(xiàn)片芯較潮,應(yīng)停止噴霧,干燥數(shù)分鐘后再進(jìn)行噴霧包衣，以便達(dá)到最佳包衣效果。 為防止片芯粘連，首先包隔離層；再包Eudragit L-30D-55和Eudragit S100混合液，作為腸溶層；最外層包Eudragit RL30D和RS30D混合液，作為緩釋層。包衣過程中用磁力攪拌器不斷攪拌包衣液，以免滑石粉沉淀導(dǎo)致噴槍堵塞。包衣片以衣膜完整均勻，片面平滑有光澤，邊、角均勻覆蓋，不粘片為宜。包衣結(jié)束后，將包衣片置于40的烘箱中熱處理68h，使包衣膜融合完整。稱重，計(jì)算包衣百分增重（%），作為主要的包衣控制指標(biāo)。包衣增重（%）= 包衣后重

21、量包衣前重量 ×100% 包衣前重量2.2.4包衣液處方的優(yōu)化經(jīng)預(yù)試驗(yàn)，通過單因素考察結(jié)果，確定檸檬酸三乙酯（TEC）作為包衣液的增塑劑、滑石粉作為包衣液的抗粘劑，用量分別占聚合物量的20%和50% 。采用L9（34）正交設(shè)計(jì)方案優(yōu)化包衣處方，進(jìn)行四因素三水平實(shí)驗(yàn)，分別考察腸溶層Eudragit L-30D-55與Eudragit S100的比例(A)、腸溶層增重(B)、緩釋層Eudragit RL30D和RS30D的比例(C)和緩釋層增重(D)對(duì)包衣片釋藥行為的影響。將9個(gè)處方的包衣片分別在0.1moL· L-1鹽酸溶液和pH6.8、pH7.8的磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行釋放度試

22、驗(yàn)，以釋放時(shí)滯（Tlag）和累積釋藥百分率（Dissolution rate）為考察指標(biāo)， 綜合評(píng)價(jià)包衣片的體外耐酸性能和在磷酸鹽緩沖液中的釋藥速率 ，篩選出理想的包衣液處方。因素與水平見表1-1和表1-2Tab.1-1 Factors and levels of the orthogonal experiment designFactorsLevlesL-30D-55:S100(A)pH-sensitive layer (B)RL30D:RS30D (C)Time-laglayer(D) 11：2 3%1：1 2% 2 1：3 4% 1：2 3% 3 1：5 5% 1：4 4%Tab. 1-

23、2 Scheme and results of the orthogonal designExperimentFactorsResultsNO. A B C DTlag (h)Dissolution rate (%) 11：2 3%1：1 2% 4.6 42.16 21：2 4% 1：2 3% 5.7 15.74 31：2 5% 1：4 4% 6.8 5.66 41：3 3% 1：2 4% 5.6 16.23 51：3 4% 1：4 2% 5.2 33.73 61：3 5%1：1 3% 4.9 17.28 71：5 3% 1：4 3% 5.4 24.38 81：5 4%1：1 4% 4.5 6

24、8.86 91：5 5% 1：2 2% 4.777.2463.5682.77 128.3148.99Yj=297.14 67.24 118.33 105.07 57.4 166.34 96.0463.77 90.75 Rj 34.26 11.85 21.51 30.53由累積釋藥百分率計(jì)算得各水平極差值表明，影響鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片在胃酸中的穩(wěn)定性和釋藥速率的因素主次從大到小為：腸溶層Eudragit L/S的比例，緩釋包衣層增重，緩釋層Eudragit RL/RS30D的比例，腸溶層Eudragit L/S的比例。最佳包衣處方為：A3B2C1D1，即腸溶層組成Eudragit L30D-

25、55：S100（1：5），包衣增重4%；緩釋層組成（1：1），包衣增重2%。按照最佳處方進(jìn)行包衣工藝驗(yàn)證，所得結(jié)腸定位包衣片的體外釋藥時(shí)滯為4.6小時(shí)，累積釋藥百分率為85.56%。 2.3包衣片體外分析方法的建立2.3.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇和專屬性研究精密稱取干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品2mg，4份，置于100mL量瓶中，分別用水、0.1moL·L-1鹽酸溶液、pH6.8和pH7.8的磷酸鹽緩沖液配制成濃度為20g·mL-1的對(duì)照品溶液，按中國(guó)藥典2005年版二部附錄A中紫外分光光度法規(guī)定，在200600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿在水、0.1moL

26、3;L-1鹽酸溶液、pH6.8和pH7.8的磷酸鹽緩沖液中的最大吸收波長(zhǎng)均為263 nm。輔料對(duì)主藥測(cè)定的干擾試驗(yàn)：將包衣片所用輔料按處方組成混合 ，用上述溶出介質(zhì)分別配制成相應(yīng)比例的空白輔料溶液，搖勻，0.45m微孔濾膜過濾后在200600 nm范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描。結(jié)果表明，包衣片所用輔料在263 nm波長(zhǎng)處無吸收干擾，故選擇263 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。2.3.2包衣片含藥量測(cè)定對(duì)照品溶液的制備： 精密稱取干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品1mg ，置50mL量瓶中，加純凈水溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。線性關(guān)系考察：精密吸取鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液1mL，2mL，3mL，4mL，5mL置于10mL量

27、瓶中，加純凈水稀釋至刻度。以純凈水作空白對(duì)照，在最大吸收波長(zhǎng)263nm處測(cè)定吸收度，以鹽酸小檗堿的濃度C (mg·mL-1)對(duì)吸收度A進(jìn)行線性回歸，其回歸方程為: A = 68.4000C + 0.2060 r= 0.99962鹽酸小檗堿在210g·mL-1之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。精密度試驗(yàn)：取鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液3mL，置于10mL量瓶中，加純凈水稀釋至刻度。以純凈水作空白對(duì)照，在最大吸收波長(zhǎng)263nm處于日內(nèi)不同時(shí)間分別測(cè)定吸收度5次，RSD=0.93%；連續(xù)5天配制相同的鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液，在最大吸收波長(zhǎng)263nm處于不同日間測(cè)定吸收度，RSD=1.37%，結(jié)果表明

28、該定量分析方法具有較好的日內(nèi)和日間精密度。重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批包衣片樣品5份，研磨成細(xì)粉，每份精密稱取10mg，加純凈水溶解，超聲提取30min后，定容于250mL量瓶中。精密吸取1mL置于10mL量瓶中,0.45m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，測(cè)定吸收度，計(jì)算鹽酸小檗堿含量。RSD=1.45%，重現(xiàn)性良好。穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一批包衣片樣品，研磨成細(xì)粉，精密稱取10mg，加純凈水溶解，超聲提取30min后，定容于100mL量瓶中。精密吸取1mL置于10mL量瓶中,0.45m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，分別于0，4，8，12，24,48h測(cè)定吸收度，RSD=1.52%，表明供試品溶液在48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

29、加樣回收率試驗(yàn)： 分別取包衣片樣品5份，研磨成細(xì)粉，每份精密稱取10mg，加入適量鹽酸小檗堿對(duì)照品，用純凈水溶解，超聲提取30min后，定容于100mL量瓶中。精密吸取1mL置于10mL量瓶中,0.45m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，測(cè)定吸收度，RSD=1.86%。含量測(cè)定方法：取鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片適量，研磨成細(xì)粉，精密稱取20mg，加純凈水溶解，超聲提取30min后，定容于250mL量瓶中。精密吸取1mL置于10mL量瓶中,0.45m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，測(cè)定吸收度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物含量。2.3.3包衣片體外釋藥 包衣片在不同pH溶出介質(zhì)中的崩解釋藥時(shí)滯和累積釋藥百分率是體外質(zhì)量控制的

30、重要指標(biāo)，我們模擬包衣片在消化道內(nèi)可能受到的pH值和胃腸道蠕動(dòng)強(qiáng)度的影響，考察在人工胃液中不同滯留時(shí)間、不同轉(zhuǎn)速條件下，對(duì)包衣片體外釋藥的影響。2.3.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品5mg三份，置于250mL量瓶中，分別用0.1moL·L-1鹽酸溶液、pH6.8和pH7.8的磷酸鹽緩沖液（PBS）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲(chǔ)備液備用。精密吸取儲(chǔ)備液1mL,置10mL量瓶中，分別用0.1moL·L-1鹽酸溶液、pH6.8和pH7.8的磷酸鹽緩沖液（PBS）稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。各標(biāo)準(zhǔn)品溶液經(jīng)0.45m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，以相應(yīng)的溶出

31、介質(zhì)作空白對(duì)照，在最大吸收波長(zhǎng)263nm處測(cè)定吸收度，以鹽酸小檗堿的濃度C (mg·mL-1)對(duì)吸收度A進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程如下：在0.1moL·L-1鹽酸溶液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線A=0.05725C + 0.00670 r= 0.99909在pH6.8磷酸鹽緩沖液（PBS）中的標(biāo)準(zhǔn)曲線A=0.07346C + 0.00659 r= 0.99979在pH7.8磷酸鹽緩沖液（PBS）中的標(biāo)準(zhǔn)曲線A=0.081176C + 0.00620 r= 0.99985結(jié)果表明，在210g·mL-1之間呈良好的線性關(guān)系。2.3.4.2釋放度測(cè)定 按中國(guó)藥典2005年版二部附錄X

32、D釋放度測(cè)定法第二法規(guī)定的槳法，評(píng)價(jià)包衣片的體外釋藥性能。分別取包衣片5片，置于各溶出杯中，溶出介質(zhì)體積750mL，轉(zhuǎn)速100r/min，溫度(37±0.5)。模擬包衣片在胃腸道中轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間的釋藥情況，進(jìn)行變換釋放介質(zhì)pH值的釋放實(shí)驗(yàn)。首先，在0.1moL·L-1鹽酸溶液（人工胃液）中釋放2h,第2小時(shí)取樣；然后在pH6.8的磷酸鹽緩沖液（人工腸液）中釋放3h，第5小時(shí)取樣；最后在pH7.8的磷酸鹽緩沖液（人工結(jié)腸液）中釋放10h,于第6，8，10，12，14小時(shí)取樣。每次取樣6mL，經(jīng)0.45m微孔濾膜過濾，分別加入0.1moL·L-1鹽酸溶液、pH6.8的磷酸鹽

33、緩沖液以及pH7.8的磷酸鹽緩沖液適當(dāng)稀釋，用相應(yīng)的溶出介質(zhì)作空白對(duì)照，測(cè)定不同取樣點(diǎn)溶出介質(zhì)中的藥物濃度，計(jì)算累積釋放百分率，同時(shí)補(bǔ)充相同溫度體積的新鮮介質(zhì)。 2.3.4.3人工胃液中不同滯留時(shí)間對(duì)包衣片釋放的影響溶出介質(zhì)：pH1.0的人工胃液，pH6.8的人工腸液，pH7.8的人工結(jié)腸液。測(cè)定條件：溶出介質(zhì)體積750mL，轉(zhuǎn)速100r/min，溫度(37±0.5)。取固定腸溶層和緩釋層處方比例及增重的包衣片3份，每份5片，分別在人工胃液中釋放1h,2h,3h后，再置于pH6.8的人工腸液中釋放3h, pH7.8的人工結(jié)腸液中釋放5h。結(jié)果見表1-3Tab. 3 Effect of

34、 gastric transit time on berberine hydrochloride release from coated tabletsgastrictransit time1h2h3hpH 1.0 artificial gastric juice Dissolution rate (%) 0.35 0.439 0.534pH 6.8 artificial intestinal juice 3h Dissolution rate (%) 8.3 8.75 9.46pH 7.8 artificial intestinal juice 5h Dissolution rate (%)

35、 22.8524.37 27.46結(jié)果表明，包衣片在人工胃液中的滯留時(shí)間長(zhǎng)短，對(duì)其在人工腸液和人工結(jié)腸液中的藥物釋放影響不大，說明胃排空時(shí)間對(duì)結(jié)腸定位包衣片的釋藥部位和累積釋放度沒有明顯的影響。2.3.4.4攪拌速率對(duì)包衣片釋放的影響 將A3B2C1D1方案的結(jié)腸定位包衣片按照釋放度試驗(yàn)方法，分別在50r/min，75r/min，100r/min的轉(zhuǎn)速下做釋放度試驗(yàn)，考察不同攪拌速度對(duì)包衣片累積釋放度的影響。Fig. 1-1 Effect of stirring rate of paddle on berberine hydrochloride release from coated tabl

36、ets結(jié)果顯示，50r/min時(shí)的釋藥速度較慢，而75r/min與100r/min相比，釋放曲線接近，累積釋放度的差異不顯著，說明轉(zhuǎn)速對(duì)包衣片的釋放速度有影響，隨著轉(zhuǎn)速的增加，包衣片的釋放速率有所增加。這是因?yàn)檗D(zhuǎn)速不同，造成溶出介質(zhì)的流速不同，影響其對(duì)包衣膜的溶蝕所致。但是，不同轉(zhuǎn)速下包衣片的釋藥時(shí)滯都在5小時(shí)左右，變化不大。表明胃腸道蠕動(dòng)強(qiáng)度對(duì)于結(jié)腸定位包衣片的釋藥部位和釋放時(shí)間影響比較小。3.討論3.1 水分散體包衣前,需要對(duì)片芯進(jìn)行隔離層包衣,主要優(yōu)點(diǎn)有:避免水分散體包衣時(shí)因水分滲入片芯，導(dǎo)致水敏感性藥物在包衣過程中水解；避免水溶性藥物隨水分蒸發(fā)而遷移入衣膜；提高片芯的表面平整性,減小孔

37、隙率,保證衣膜連續(xù)性；改善片芯表面疏水性,以利于水性包衣液的鋪展和衣膜形成；改善片芯脆碎度,避免包衣過程中的破碎現(xiàn)象。 羥丙甲纖維素HPMC為白色粉末，無臭無味，按粘度分為多種規(guī)格，其中低粘度HPMC是目前廣泛應(yīng)用、效果較好的一種包衣材料，特點(diǎn)是成膜性好，衣膜光亮有韌性，包衣時(shí)無粘連現(xiàn)象，衣膜不易與其他添加劑發(fā)生反應(yīng)，在熱、光、空氣中及一定濕度下較穩(wěn)定，有良好的隔離效果。3.2 本文應(yīng)用的腸溶層包衣材料為腸溶型丙烯酸樹脂Eudragit S100和EudragitL30D-55。Eudragit S100是甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯（1：2）的共聚物，固體產(chǎn)品是由相應(yīng)的乳液聚合物經(jīng)噴霧干燥所得，加水后可再分散成乳膠。水分散體配方中需要加入30%50%的增塑劑才能在適宜的溫度范圍（40左右）形成合適的包衣膜1。Eudragit S100屬于陰離子型丙烯酸聚合物，其結(jié)構(gòu)中含有羧基，在水中很容易與堿形成鹽而溶解，所以需要在pH>7的條件下溶解。Eudragit L30D-55為甲基丙烯酸/丙烯酸乙酯共聚物膠乳產(chǎn)品，是一種含量為30%的分散體，所形成的腸溶膜在pH5.5以上溶解。pH敏感膜的包