在過渡區(qū)線寬與Langmuir膜重疊的比COVASP

1、圖5：（A）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中，表面壓力對DPPC中CH2的不對稱振動頻率的依賴性；（B）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中，表面壓力對DPPC中CH2的對稱振動頻率的依賴性，（C）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中的水表面上，表面壓力對半寬度DPPC中CH2對稱伸縮的依賴性（C）疇結(jié)構(gòu)的DPPC COVASP薄膜的熒光顯微：域形成的研究螢光配合上述的紅外測量，通過對單分子層之間的凝聚和擴(kuò)大地區(qū)差別的探針分布的直接觀察，包含有一絲熒光標(biāo)記的脂質(zhì)列入允許的壓縮對膜的橫向結(jié)構(gòu)的影響評價，我們以前曾表明，轉(zhuǎn)移到玻璃或云

2、母片上不會改變薄膜的微觀結(jié)構(gòu)和對界面DPPC如螢光或原子力顯微鏡研究。圖6：（A）DPPC單分子層的壓縮 - A等溫線，未擾動的（實線），轉(zhuǎn)移到玻璃片時獲得的（虛線）（B）含1（摩爾）NBD-PC的DPPC薄膜纖維圖像，左邊是恒壓下轉(zhuǎn)移到玻璃支架上的；右邊是壓縮到目標(biāo)壓力中央指示的規(guī)模時，在同一條件下轉(zhuǎn)移到玻璃片上的。右邊的圖像由同一條件下單組含有NBD-PC的DPPC的圖像組成。所有實驗都在以下條件下進(jìn)行，5mm Tris，PH=7,和150mmNaCl。 圖6a比較了24下分別由非干擾界面和同時提取但放到LB玻璃片上的含1%（摩爾）NBD-PC的DPPC的 - A等溫線，在圖6a中的兩個等

3、溫線都非常相似，包括在75-78 Å2/molecule間的起始壓力以及在12 mN/m條件下一個由液體擴(kuò)大到液體濃縮的顯著的過渡平衡。由于與COVASP移送紅外測量，以氟化鈣的膜，它是安全的玻璃上得出結(jié)論，該膜萃取片并沒有顯著改變等溫線的主要特點，連續(xù)壓縮驅(qū)動重組的脂質(zhì)分子在壓縮過程中與該界面保持一致。圖6b介紹的是含有1%NBD-PC的DPPC膜轉(zhuǎn)移到玻璃片上的顯微圖像。這些數(shù)據(jù)比較了兩個支持的DPPC類型膜的微觀結(jié)構(gòu)。左邊的幀對應(yīng)于從壓縮和傳輸過程中保持恒定的壓力定義的表面薄膜轉(zhuǎn)移制備的薄膜顯微圖像。因此，這些圖片的每一個，是從一個不同的DPPCfilm，壓縮到指定的壓力，然后

4、轉(zhuǎn)移到一個玻璃支撐，形成十分均勻結(jié)構(gòu)的LB膜作為在顯微鏡下觀察到的。這是用于在literature25準(zhǔn)備支持脂質(zhì)膜的傳統(tǒng)的方式。另一方面，在圖6b中右側(cè)所示的圖像已組成，由重疊的轉(zhuǎn)移后，這是與收購的壓縮等溫線同時準(zhǔn)備了singlesupported膜拍攝的照片。圖7：在恒定壓力下或不斷改變的壓力下的LB膜，或直接觀察現(xiàn)實中水氣界面膜計算出的DPPC膜的冷凝曲線。陰影區(qū)占總面積的平均百分比是表面壓力的的表現(xiàn)。在25下，含有1（摩爾）nbd PC的薄膜總是不斷的形成并壓縮，數(shù)據(jù)點代表平均在每個壓力后獲五幀的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。因此，轉(zhuǎn)移到墊片上的膜各個部分的表面壓力沿著轉(zhuǎn)移路線是不斷變化的。這個在顯微

5、鏡下的觀察揭示了LB膜沿軸轉(zhuǎn)移不同，是逐漸改變著形態(tài)的。圖6B型面壓力刻度表示相應(yīng)的由不同的膜（右?guī)┗蛟谄涮崛r間的膜片段（圖片左）的表面壓力。因此，在壓縮過程中提取的膜，可以用電腦獲得的傳輸過程中位置和表面壓力的數(shù)據(jù)來校準(zhǔn)，以確定每個膜片段表面壓力的轉(zhuǎn)移。膜在壓縮過程中的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)移，說明沿轉(zhuǎn)移軸取樣等溫線眼線發(fā)生DPPC單膜和脂質(zhì)的核濃縮領(lǐng)域的增長，壓縮。與此相反，圖像采樣垂直方向的轉(zhuǎn)移生產(chǎn)線生產(chǎn)的電影畫面的速度相同壓力，因此可以被平均或比較，分析在任何定性或定量的形式給出表面壓力的膜結(jié)構(gòu)。而常規(guī)LB技術(shù)要求編制和許多不同的膜轉(zhuǎn)移到分析在幾個定義的壓力給定的界面系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，本（COVASP）-

6、 LB膜允許在一個單一的完整的等溫線的結(jié)構(gòu)特征觀察實驗中，隨著采樣任何沿等溫線所需的部分給予表面壓力的可能性。 圖7比較完整的壓縮驅(qū)動的冷凝計算恒壓LB或從任一曲線COVASP-LBDPPC/NBD-PC膜，請注意，從COVASP- LB膜凝結(jié)曲線可以很容易地準(zhǔn)備以多點取樣，與剛才在許多不同位置沿傳輸線的同一膜所需的，正如從圖像質(zhì)量上推斷，這個膜是10-20的濃縮時，同時轉(zhuǎn)讓時相比，分析了不同的獨立不變的壓力。此外，觀察在COVASP- LB膜高密度點方便的LC- LE的過渡近10 mN/m。根據(jù)從COVASP- LB膜凝結(jié)獲得的數(shù)據(jù)點也包括橫向誤差線，這表明在表

7、面壓力分配錯誤幀到任何特定的凝結(jié)。由于壓力不斷變沿傳輸線中的每一個定量分析框架包括凝結(jié)在一個范圍內(nèi)的壓力，這同樣是沿等溫線范圍內(nèi)的信息。有趣的是，凝結(jié)曲線從COVASP- LBfilms獲得合理與從記錄到在氣液界面的單分子層，直接壓縮圖像計算一（參見圖7黑點）。這些結(jié)果證實，凝結(jié)程度更為敏感的時期存在的平衡比前轉(zhuǎn)讓的轉(zhuǎn)讓過程本身，而且有效地捕捉COVASPLB過程定性和定量的壓力相關(guān)的功能在發(fā)生界面膜的支持。（D）初步生物應(yīng)用的COVASP磅紅外：單層到多層躍遷Four-Component Lung Surfactant模型。肺表面活性物質(zhì)，脂類，蛋白質(zhì)復(fù)合體在空氣位于/哺乳動物的肺

8、泡里，在體內(nèi)的功能，以防止在呼氣表面張力降低到接近零值肺泡塌陷。在以前的研究中，壓縮后5,6,8,19,26,27超分子結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行觀察，模仿電影中的肺泡襯里層。阿四分量模型DPPC/ DPPG，膽固醇表面活性劑膜，肺表面活性蛋白SP的具體- C的（DPPC/DPPG摩爾比4:1，膽固醇，7 mol時，SP的- C中，用4 mol）表現(xiàn)出生物有關(guān)從膜表面的可逆轉(zhuǎn)換到相關(guān)的高度壓縮后，在多層膜表面的壓力。在我們以前的研究中，19對LB膜原子力顯微鏡測量驗證了多層膜的形成，而IRRAS是用來評價的結(jié)構(gòu)和SP的- C的方向。一種是在一COVASP磅實驗系統(tǒng)等溫線顯示在圖8插頁，并

9、揭示在低壓力的普遍擴(kuò)大了膜一個近54Mn/m的水平地區(qū)開始，形成了多層發(fā)病的指標(biāo)。事先對process19可逆性的研究表明，在影片中排除有毒物質(zhì)進(jìn)入單層respreads擴(kuò)大后薄膜。COVASP磅紅外范圍超過23-56分鐘/米幾面壓力譜如圖8所示。優(yōu)異的光譜質(zhì)量許可證于16時55 cm - 1處，除了磷脂酰胺I帶的模式（圖8為標(biāo)記）檢測先前提到。幾個負(fù)責(zé)調(diào)查的多層膜的形成有關(guān)的光譜參數(shù)是在繪制圖9和10。在圖9A，壓力誘導(dǎo)的甲基對稱伸縮強(qiáng)度的變化顯示了一個清晰的54mN/m發(fā)病壓力/在與水平線附近，在等溫線（圖8，外型出色的插圖協(xié)議大幅增加，）。類似的行為是表現(xiàn)出了亞甲基的不對稱伸縮振動和lipidCdOstretch（未顯示）。此外，對稱CH2的伸縮頻