在過渡區(qū)線寬與Langmuir膜重疊的比COVASP

1、圖5：（A）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中，表面壓力對DPPC中CH2的不對稱振動頻率的依賴性；（B）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中，表面壓力對DPPC中CH2的對稱振動頻率的依賴性，（C）在COVASP-LB實驗氟化鈣基板上和在IRRAS實驗中的水表面上，表面壓力對半寬度DPPC中CH2對稱伸縮的依賴性（C）疇結構的DPPC COVASP薄膜的熒光顯微：域形成的研究螢光配合上述的紅外測量，通過對單分子層之間的凝聚和擴大地區(qū)差別的探針分布的直接觀察，包含有一絲熒光標記的脂質(zhì)列入允許的壓縮對膜的橫向結構的影響評價，我們以前曾表明，轉移到玻璃或云

2、母片上不會改變薄膜的微觀結構和對界面DPPC如螢光或原子力顯微鏡研究。圖6：（A）DPPC單分子層的壓縮 - A等溫線，未擾動的（實線），轉移到玻璃片時獲得的（虛線）（B）含1（摩爾）NBD-PC的DPPC薄膜纖維圖像，左邊是恒壓下轉移到玻璃支架上的；右邊是壓縮到目標壓力中央指示的規(guī)模時，在同一條件下轉移到玻璃片上的。右邊的圖像由同一條件下單組含有NBD-PC的DPPC的圖像組成。所有實驗都在以下條件下進行，5mm Tris，PH=7,和150mmNaCl。 圖6a比較了24下分別由非干擾界面和同時提取但放到LB玻璃片上的含1%（摩爾）NBD-PC的DPPC的 - A等溫線，在圖6a中的兩個等

3、溫線都非常相似，包括在75-78 Å2/molecule間的起始壓力以及在12 mN/m條件下一個由液體擴大到液體濃縮的顯著的過渡平衡。由于與COVASP移送紅外測量，以氟化鈣的膜，它是安全的玻璃上得出結論，該膜萃取片并沒有顯著改變等溫線的主要特點，連續(xù)壓縮驅動重組的脂質(zhì)分子在壓縮過程中與該界面保持一致。圖6b介紹的是含有1%NBD-PC的DPPC膜轉移到玻璃片上的顯微圖像。這些數(shù)據(jù)比較了兩個支持的DPPC類型膜的微觀結構。左邊的幀對應于從壓縮和傳輸過程中保持恒定的壓力定義的表面薄膜轉移制備的薄膜顯微圖像。因此，這些圖片的每一個，是從一個不同的DPPCfilm，壓縮到指定的壓力，然后

4、轉移到一個玻璃支撐，形成十分均勻結構的LB膜作為在顯微鏡下觀察到的。這是用于在literature25準備支持脂質(zhì)膜的傳統(tǒng)的方式。另一方面，在圖6b中右側所示的圖像已組成，由重疊的轉移后，這是與收購的壓縮等溫線同時準備了singlesupported膜拍攝的照片。圖7：在恒定壓力下或不斷改變的壓力下的LB膜，或直接觀察現(xiàn)實中水氣界面膜計算出的DPPC膜的冷凝曲線。陰影區(qū)占總面積的平均百分比是表面壓力的的表現(xiàn)。在25下，含有1（摩爾）nbd PC的薄膜總是不斷的形成并壓縮，數(shù)據(jù)點代表平均在每個壓力后獲五幀的均值和標準差。因此，轉移到墊片上的膜各個部分的表面壓力沿著轉移路線是不斷變化的。這個在顯微

5、鏡下的觀察揭示了LB膜沿軸轉移不同，是逐漸改變著形態(tài)的。圖6B型面壓力刻度表示相應的由不同的膜（右?guī)┗蛟谄涮崛r間的膜片段（圖片左）的表面壓力。因此，在壓縮過程中提取的膜，可以用電腦獲得的傳輸過程中位置和表面壓力的數(shù)據(jù)來校準，以確定每個膜片段表面壓力的轉移。膜在壓縮過程中的結構轉移，說明沿轉移軸取樣等溫線眼線發(fā)生DPPC單膜和脂質(zhì)的核濃縮領域的增長，壓縮。與此相反，圖像采樣垂直方向的轉移生產(chǎn)線生產(chǎn)的電影畫面的速度相同壓力，因此可以被平均或比較，分析在任何定性或定量的形式給出表面壓力的膜結構。而常規(guī)LB技術要求編制和許多不同的膜轉移到分析在幾個定義的壓力給定的界面系統(tǒng)結構，本（COVASP）-

6、 LB膜允許在一個單一的完整的等溫線的結構特征觀察實驗中，隨著采樣任何沿等溫線所需的部分給予表面壓力的可能性。 圖7比較完整的壓縮驅動的冷凝計算恒壓LB或從任一曲線COVASP-LBDPPC/NBD-PC膜，請注意，從COVASP- LB膜凝結曲線可以很容易地準備以多點取樣，與剛才在許多不同位置沿傳輸線的同一膜所需的，正如從圖像質(zhì)量上推斷，這個膜是10-20的濃縮時，同時轉讓時相比，分析了不同的獨立不變的壓力。此外，觀察在COVASP- LB膜高密度點方便的LC- LE的過渡近10 mN/m。根據(jù)從COVASP- LB膜凝結獲得的數(shù)據(jù)點也包括橫向誤差線，這表明在表

7、面壓力分配錯誤幀到任何特定的凝結。由于壓力不斷變沿傳輸線中的每一個定量分析框架包括凝結在一個范圍內(nèi)的壓力，這同樣是沿等溫線范圍內(nèi)的信息。有趣的是，凝結曲線從COVASP- LBfilms獲得合理與從記錄到在氣液界面的單分子層，直接壓縮圖像計算一（參見圖7黑點）。這些結果證實，凝結程度更為敏感的時期存在的平衡比前轉讓的轉讓過程本身，而且有效地捕捉COVASPLB過程定性和定量的壓力相關的功能在發(fā)生界面膜的支持。（D）初步生物應用的COVASP磅紅外：單層到多層躍遷Four-Component Lung Surfactant模型。肺表面活性物質(zhì)，脂類，蛋白質(zhì)復合體在空氣位于/哺乳動物的肺

8、泡里，在體內(nèi)的功能，以防止在呼氣表面張力降低到接近零值肺泡塌陷。在以前的研究中，壓縮后5,6,8,19,26,27超分子結構變化進行觀察，模仿電影中的肺泡襯里層。阿四分量模型DPPC/ DPPG，膽固醇表面活性劑膜，肺表面活性蛋白SP的具體- C的（DPPC/DPPG摩爾比4:1，膽固醇，7 mol時，SP的- C中，用4 mol）表現(xiàn)出生物有關從膜表面的可逆轉換到相關的高度壓縮后，在多層膜表面的壓力。在我們以前的研究中，19對LB膜原子力顯微鏡測量驗證了多層膜的形成，而IRRAS是用來評價的結構和SP的- C的方向。一種是在一COVASP磅實驗系統(tǒng)等溫線顯示在圖8插頁，并

9、揭示在低壓力的普遍擴大了膜一個近54Mn/m的水平地區(qū)開始，形成了多層發(fā)病的指標。事先對process19可逆性的研究表明，在影片中排除有毒物質(zhì)進入單層respreads擴大后薄膜。COVASP磅紅外范圍超過23-56分鐘/米幾面壓力譜如圖8所示。優(yōu)異的光譜質(zhì)量許可證于16時55 cm - 1處，除了磷脂酰胺I帶的模式（圖8為標記）檢測先前提到。幾個負責調(diào)查的多層膜的形成有關的光譜參數(shù)是在繪制圖9和10。在圖9A，壓力誘導的甲基對稱伸縮強度的變化顯示了一個清晰的54mN/m發(fā)病壓力/在與水平線附近，在等溫線（圖8，外型出色的插圖協(xié)議大幅增加，）。類似的行為是表現(xiàn)出了亞甲基的不對稱伸縮振動和lipidCdOstretch（未顯示）。此外，對稱CH2的伸縮頻