分光光度法測(cè)定夏枯草中總黃酮的含量

1、分光光度法測(cè)定夏枯草中總黃酮的含量 作者：鄧斌，蔣剛彪，黃紅英，陳六平 【摘要】 目的研究可見光及紫外光分光光度法測(cè)定夏枯草中總黃酮含量的方法。方法可見光分光光度法是以蘆丁為參照品,硝酸鋁作顯色劑，在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定總黃酮含量；紫外光分光光度法是以蘆丁為參照品，在357nm波長(zhǎng)處測(cè)定總黃酮含 作者：鄧斌，蔣剛彪，黃紅英，陳六平【摘要】 目的研究可見光及紫外光分光光度法測(cè)定夏枯草中總黃酮含量的方法。方法可見光分光光度法是以蘆丁為參照品,硝酸鋁作顯色劑，在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定總黃酮含量；紫外光分光光度法是以蘆丁為參照品，在357nm波長(zhǎng)處測(cè)定總黃酮含量。結(jié)果可見光法平均回收率為97.76%

2、，紫外光法為99.10%，前者的RSD值是1.02%，后者的RSD值是0.88%。結(jié)論紫外分光光度法具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)，是一種較理想的測(cè)定夏枯草中總黃酮含量的方法。 【關(guān)鍵詞】 夏枯草；總黃酮；分光光度法Abstract：ObjectiveTo determine the total flavone content in Prunella vulgaris L. by VIS and UV Spectrophotometry.MethodsThe control sample of VIS Spectrophotometry was rutin,the revealing age

3、nt was Al(NO3)3 and the analyzed wavelength was 510 nm.The control sample of UV Spectrophotometry was rutin and the analyzed wavelength was 357 nm.ResultsThe average recoveries of VIS and UV Spectrophotometry were 97.76% and 99.10%,the RSD were 1.02% and 0.88% respectively. ConclusionUV spectrophoto

4、metry is simple, rapid, accurate, economical and is suitable for content determination of total flavones in Prunella vulgaris L.Key words：Prunella vulgaris L.; Total flavones; Spectrophotometry 中藥夏枯草為唇形科夏枯草屬植物夏枯草Prunella vulgaris L.的干燥果穗，全國(guó)大部分地區(qū)均有分布，易栽培，資源豐富。主要含有三萜及其苷類、苯丙素類、甾醇及其苷類、黃酮類、香豆素、有機(jī)酸、揮發(fā)油及其糖

5、類等。全草均可入藥，其味辛、微苦，性微寒，具有清火、明目、散結(jié)、消腫之功效。常用于治療頭痛、眩暈、瘰疬、癭瘤、乳癰腫痛、甲狀腺腫大、淋巴結(jié)結(jié)核、乳腺增生癥等疾病1。目前，有關(guān)植物中黃酮類物質(zhì)的測(cè)定方法主要有分光光度法和高效液相色譜法等24，其測(cè)定夏枯草總黃酮含量的方法還未見報(bào)道。本文分別采用可見光和紫外光分光光度法測(cè)定夏枯草中總黃酮的含量，并對(duì)兩種方法進(jìn)行了比較，擬尋找出一種準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便的測(cè)定夏枯草中總黃酮含量的方法，為合理科學(xué)開發(fā)這一寶貴的中藥資源，深入研究其確切的藥理作用提供可靠的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 器材與方法1.1 材料1.1.1 試劑與原料無水甲醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁等試劑均為分

6、析純；蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：0080-9705)；夏枯草藥材購(gòu)于廣州市藥材公司（由廣東藥學(xué)院生藥研究室鑒定），經(jīng)粉碎后過60目篩，放入6080烘箱中干燥12h后，稍加冷卻，放入干燥器中備用。1.1.2 儀器與設(shè)備上海惠普6010型紫外-可見分光光度計(jì)；上海二分7230G可見光分光光度計(jì)；北京賽多利斯電子分析天平；索氏提取器；F120型粉碎機(jī)；RE52286A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等。1.2 方法1.2.1 藥液的制備精確稱取夏枯草干粉2.500 0 g置于索氏提取器中，石油醚回流以除去試樣中的脂類及色素，至提取管中呈無色。將石油醚提取后的殘?jiān)?00 ml無水甲醇，抽提至無色。

7、提取液全部轉(zhuǎn)移到250 ml容量瓶中，用無水甲醇定容作為實(shí)驗(yàn)用液，待測(cè)。1.2.2 可見光分光光度法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制5精確稱取經(jīng)120下干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品10.0 mg，用無水甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中，用無水甲醇定容，搖勻，即得蘆丁對(duì)照品溶液(每毫升溶液含蘆丁對(duì)照品0.1 mg)。 準(zhǔn)確吸取0.1mg/ml的蘆丁對(duì)照品溶液0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00，7.00，8.00 ml，分別置于25 ml容量瓶中，各加甲醇至10 ml，分別加5%亞硝酸鈉溶液1.00 ml，搖勻，放置6 min后分別加10%硝酸鋁溶液1.00 ml，搖勻，放

8、置6 min，再分別加1%氫氧化鈉溶液10.00 ml，并用甲醇定容至刻度，搖勻，放置15 min后，以無水甲醇溶液為空白液，在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)各溶液的吸光度，得回歸方程為：A=0.020 93C0.012 1A為吸光度，C為濃度(mg/L），相關(guān)系數(shù)r=0.999 6。表明蘆丁對(duì)照品溶液濃度處于232 mg/L范圍內(nèi)時(shí)，吸光度與其濃度間呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。1.2.3 可見光分光光度法回收率實(shí)驗(yàn)精確稱取6份已知總黃酮含量的夏枯草粉末2.500 g，加入一定量的蘆丁對(duì)照品，按照“1.2.1”項(xiàng)所述制得實(shí)驗(yàn)液，按照“1.2.2”項(xiàng)所述顯色并測(cè)定吸光度，由回歸方程計(jì)算總黃酮含量，按下式計(jì)算回收率。 回收率（%）=混合后實(shí)測(cè)總黃酮含量樣品