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文檔簡介

1、 實驗一實驗一 動物細胞制片技術及動物細胞制片技術及減數(shù)分裂觀察減數(shù)分裂觀察一、實驗目的一、實驗目的 1、了解動物生殖細胞的形成過程,觀察、了解動物生殖細胞的形成過程,觀察減數(shù)分裂過程中染色體的動態(tài)變化;減數(shù)分裂過程中染色體的動態(tài)變化; 2、學習并掌握制片和染色技術。、學習并掌握制片和染色技術。 二、實驗原理二、實驗原理 減數(shù)分裂是一種特殊方式的細胞分裂,僅在減數(shù)分裂是一種特殊方式的細胞分裂,僅在配子形成過程中發(fā)生。這一過程的特點:配子形成過程中發(fā)生。這一過程的特點: 1、連續(xù)進行兩次核分裂,而染色體只復制一次,、連續(xù)進行兩次核分裂,而染色體只復制一次,結(jié)果形成四個核,每個核只含單倍體數(shù)的染色

2、體,結(jié)果形成四個核,每個核只含單倍體數(shù)的染色體,即染色體數(shù)減少一半,所以稱為減數(shù)分裂;即染色體數(shù)減少一半,所以稱為減數(shù)分裂; 2、前期特別長,而且變化復雜,包括同源染色、前期特別長,而且變化復雜,包括同源染色體的配對、交換與分離。體的配對、交換與分離。 整個減數(shù)分裂過程可分為下列幾個時期:整個減數(shù)分裂過程可分為下列幾個時期:減數(shù)第一次分裂減數(shù)第一次分裂前期前期 細線期細線期:第一次分裂開始,染色質(zhì)濃縮為幾第一次分裂開始,染色質(zhì)濃縮為幾條細而長的細線。每一條染色體已復制為二條細而長的細線。每一條染色體已復制為二個單體,但在顯微鏡下仍看不出染色體的雙個單體,但在顯微鏡下仍看不出染色體的雙重性。(重

3、性。(減數(shù)減數(shù)I前期前期-細線期細線期)偶線期偶線期:染色體形態(tài)與細線期沒有多大差別,:染色體形態(tài)與細線期沒有多大差別,同源染色體開始同源染色體開始配對配對(聯(lián)會聯(lián)會),出現(xiàn)聯(lián)會復合體,出現(xiàn)聯(lián)會復合體。(減數(shù)(減數(shù)前期前期-偶線期)偶線期)粗線期粗線期:同源染色體配對完畢,稱雙價體,:同源染色體配對完畢,稱雙價體,每個雙價體含有四個染色每個雙價體含有四個染色單體單體(四分體四分體) 。染。染色體繼續(xù)變短變粗。(減數(shù)色體繼續(xù)變短變粗。(減數(shù)前期前期-粗線期)粗線期)雙線期雙線期:配對的同源染色體開始分開。由于:配對的同源染色體開始分開。由于非姊妹染色單體間發(fā)生過交換,因此有交叉非姊妹染色單體間發(fā)

4、生過交換,因此有交叉現(xiàn)象。交叉數(shù)減少,交叉向染色體端部移動現(xiàn)象。交叉數(shù)減少,交叉向染色體端部移動(交叉端化交叉端化),染色體螺旋化程度加深。(減數(shù),染色體螺旋化程度加深。(減數(shù)前期前期-雙線期)雙線期) 濃縮期濃縮期:又稱終變期,仍為:又稱終變期,仍為n個雙價體,染個雙價體,染色體變得更短粗。核仁核膜消失色體變得更短粗。核仁核膜消失。(減數(shù)。(減數(shù)前前期期-濃縮期)濃縮期)中期中期 :各個雙價體排列在赤道板上,紡錘體:各個雙價體排列在赤道板上,紡錘體形成,兩個同源染色體上的著絲粒逐漸遠離。形成,兩個同源染色體上的著絲粒逐漸遠離。雙價體開始分離。染色體仍雙價體開始分離。染色體仍為為2n,每一染色

5、每一染色體含有兩個染色單體。(減數(shù)體含有兩個染色單體。(減數(shù)-中期)中期)后期后期: 兩條同源染色體分開,分別移向兩極。兩條同源染色體分開,分別移向兩極。每一條染色體有一著絲粒,帶著兩個染色單每一條染色體有一著絲粒,帶著兩個染色單體。每一極得到體。每一極得到n條染色體。染色體數(shù)目減半。條染色體。染色體數(shù)目減半。(減數(shù)(減數(shù)-后期)后期)末期末期:染色體解旋,又呈絲狀,核膜形成,:染色體解旋,又呈絲狀,核膜形成,胞質(zhì)分裂,成為二個子細胞。(減數(shù)胞質(zhì)分裂,成為二個子細胞。(減數(shù)-末期)末期)間期間期:在減數(shù)第二次分裂開始以前,兩個:在減數(shù)第二次分裂開始以前,兩個子細胞進入間期。但有的植物如延齡草和

6、子細胞進入間期。但有的植物如延齡草和大多數(shù)動物不經(jīng)過末期和間期,直接進入大多數(shù)動物不經(jīng)過末期和間期,直接進入減數(shù)第二次分裂的晚前期。(間期)減數(shù)第二次分裂的晚前期。(間期)前期前期 : 染色體縮短變粗,染色體開始清染色體縮短變粗,染色體開始清晰起來。每個染色體含有一個著絲粒和縱向晰起來。每個染色體含有一個著絲粒和縱向排列的兩條染色單體。(減數(shù)排列的兩條染色單體。(減數(shù)-前期)前期)中期中期: 染色體排列在赤道面上,每個染色染色體排列在赤道面上,每個染色體有一個著絲粒,兩條染色單體開始分離。體有一個著絲粒,兩條染色單體開始分離。此時細胞的染色體數(shù)此時細胞的染色體數(shù)為為n,每條染色體有兩每條染色體

7、有兩條染色單體。(減數(shù)條染色單體。(減數(shù)-中期)中期)減數(shù)第二次分裂減數(shù)第二次分裂后期后期: 兩條染色單體分離,移向兩極,每極含兩條染色單體分離,移向兩極,每極含n條染色體。(減數(shù)條染色體。(減數(shù)-后期)后期)末期末期: 染色體逐漸解螺旋,變?yōu)榧毥z狀,核膜染色體逐漸解螺旋,變?yōu)榧毥z狀,核膜重建,核仁重新形成。胞質(zhì)分裂,各成為兩重建,核仁重新形成。胞質(zhì)分裂,各成為兩個子細胞。(減數(shù)個子細胞。(減數(shù)-末期)末期) 減數(shù)分裂模式圖減數(shù)分裂模式圖 減數(shù)分裂結(jié)果:減數(shù)分裂結(jié)果: 一個細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個子細胞,一個細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個子細胞,每個子細胞中有每個子細胞中有n個染色體。因為個染色體。因為

8、細胞分細胞分裂兩次,染色體只復制一次。裂兩次,染色體只復制一次。三、實驗材料三、實驗材料 短角斑腿蝗短角斑腿蝗(Catantops brachycerus)精巢精巢四、實驗儀器和試劑四、實驗儀器和試劑 儀器:冰箱,顯微鏡儀器:冰箱,顯微鏡 試劑:試劑: Carnoy固定固定液液 ,1N HCL ,70%乙醇乙醇 , 改良苯酚品紅染液改良苯酚品紅染液 五、實驗步驟五、實驗步驟 1、采集蝗蟲、采集蝗蟲: 隨蝗蟲物種的不同,采集時間有變化。隨蝗蟲物種的不同,采集時間有變化。 采集方法可用手抓或用網(wǎng)捕捉。如短角斑腿蝗喜溫采集方法可用手抓或用網(wǎng)捕捉。如短角斑腿蝗喜溫暖,可在十月左右,在晴天陽光下的草地用

9、掃網(wǎng)暖,可在十月左右,在晴天陽光下的草地用掃網(wǎng)捕捉。捕捉。 2、取材固定、取材固定: 用鑷子夾住雄蟲尾部,向外拉??梢姷揭粓F黃色組用鑷子夾住雄蟲尾部,向外拉??梢姷揭粓F黃色組織塊,這就是蝗蟲的精巢。剔除精巢上的其他組織塊,這就是蝗蟲的精巢。剔除精巢上的其他組織,將其放到織,將其放到 Carnoy 固定液中固定固定液中固定1.5-2小時,再小時,再放入放入70%酒精溶液中。酒精溶液中。 3、剝曲精細管、剝曲精細管: 切取較粗端,約占全長的切取較粗端,約占全長的1/3-1/2(粗端遠離輸精管粗端遠離輸精管,細胞分裂旺盛,細端近輸精細胞分裂旺盛,細端近輸精管管,多已經(jīng)生成精子多已經(jīng)生成精子),棄細端

10、,蒸餾水沖洗,吸,棄細端,蒸餾水沖洗,吸干水分。干水分。 4、1M HCL解離解離2-5分鐘,蒸餾水多次沖洗分鐘,蒸餾水多次沖洗(因為因為HCL影響染色影響染色)。 5、將材料放在載片上,滴一滴改良苯酚品紅,染、將材料放在載片上,滴一滴改良苯酚品紅,染15-20分鐘。分鐘。 6、壓片:在材料上加蓋玻片,吸去多余染液,上、壓片:在材料上加蓋玻片,吸去多余染液,上覆吸水紙,用拇指壓蓋玻片。覆吸水紙,用拇指壓蓋玻片。 7、鏡下觀察。、鏡下觀察。 六六.實驗結(jié)果實驗結(jié)果 繪制觀察到的減數(shù)分裂各時期、尤繪制觀察到的減數(shù)分裂各時期、尤其是前期其是前期各個時期染色體的變化圖。各個時期染色體的變化圖。 七七

11、.實驗分析與討論實驗分析與討論 1、分析此次實驗成敗的原因。、分析此次實驗成敗的原因。 2、本次實驗有哪些地方可以改進?、本次實驗有哪些地方可以改進? 八八.思考題思考題 1、減數(shù)分裂的遺傳學意義。、減數(shù)分裂的遺傳學意義。 2、減數(shù)的機理是什么?、減數(shù)的機理是什么? 3、交叉、交叉和交換的關系。和交換的關系。 九九.參考文獻參考文獻1.劉祖洞劉祖洞 ,江紹慧江紹慧 ,遺傳學遺傳學,人民教育出版人民教育出版社社 ,北京北京2.遺傳學實驗遺傳學實驗 高等教育出版社高等教育出版社3.遺傳學實驗方法和技術遺傳學實驗方法和技術 高等教育出版社高等教育出版社附圖附圖減數(shù)減數(shù)前期前期-細線期細線期減數(shù)減數(shù)前期前期-偶線期偶線期減數(shù)減數(shù)前期前期-粗線期粗線期減數(shù)減數(shù)前期前期-雙線期雙線期減數(shù)減數(shù)前期前期-濃縮期濃縮期(終變期終變期)減數(shù)減數(shù)-中期

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