NCBI在線BLAST使用方法與結(jié)果詳解

1、NCBI在線BLAST使用方法與結(jié)果詳解BLASTBasic Local Alignment Search Tool是一套在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)或DNA數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行相似性比較的分析工具。BLAST程序能迅速與公開(kāi)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行相似性序列比較。BLAST結(jié)果中的得分是對(duì)一種對(duì)相似性的統(tǒng)計(jì)說(shuō)明。BLAST 采用一種局部的算法獲得兩個(gè)序列中具有相似性的序列。Blast中常用的程序介紹：1、BLASTP是蛋白序列到蛋白庫(kù)中的一種查詢(xún)。庫(kù)中存在的每條已知序列將逐一地同每條所查序列作一對(duì)一的序列比對(duì)。2、BLASTX是核酸序列到蛋白庫(kù)中的一種查詢(xún)。先將核酸序列翻譯成蛋白序列一條核酸序列會(huì)被翻譯成可能的六條蛋白，再對(duì)每

2、一條作一對(duì)一的蛋白序列比對(duì)。3、BLASTN是核酸序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。庫(kù)中存在的每條已知序列都將同所查序列作一對(duì)一地核酸序列比對(duì)。4、TBLASTN是蛋白序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。與BLASTX相反，它是將庫(kù)中的核酸序列翻譯成蛋白序列，再同所查序列作蛋白與蛋白的比對(duì)。5、TBLASTX是核酸序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。此種查詢(xún)將庫(kù)中的核酸序列和所查的核酸序列都翻譯成蛋白每條核酸序列會(huì)產(chǎn)生6條可能的蛋白序列，這樣每次比對(duì)會(huì)產(chǎn)生36種比對(duì)陣列。NCBI的在線BLAST： 下面是具體操作方法1，進(jìn)入在線BLAST界面，可以選擇blast特定的物種如人，小鼠，水稻等，也可以選擇blast所有的核酸

3、或蛋白序列。不同的blast程序上面已經(jīng)有了介紹。這里以常用的核酸庫(kù)作為例子。2，粘貼fasta格式的序列。選擇一個(gè)要比對(duì)的數(shù)據(jù)庫(kù)。關(guān)于數(shù)據(jù)庫(kù)的說(shuō)明請(qǐng)看NCBI在線blast數(shù)據(jù)庫(kù)的簡(jiǎn)要說(shuō)明。一般的話(huà)參數(shù)默認(rèn)。3，blast參數(shù)的設(shè)置。注意顯示的最大的結(jié)果數(shù)跟E值，E值是比較重要的。篩選的標(biāo)準(zhǔn)。最后會(huì)說(shuō)明一下。4，注意一下你輸入的序列長(zhǎng)度。注意一下比對(duì)的數(shù)據(jù)庫(kù)的說(shuō)明。5，blast結(jié)果的圖形顯示。沒(méi)啥好說(shuō)的。6，blast結(jié)果的描述區(qū)域。注意分值與E值。分值越大越靠前了，E值越小也是這樣。7，blast結(jié)果的詳細(xì)比對(duì)結(jié)果。注意比對(duì)到的序列長(zhǎng)度。評(píng)價(jià)一個(gè)blast結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)主要有三項(xiàng)，E值Expect)，一致性(Identities)，缺失或插入Gaps。加上長(zhǎng)度的話(huà)，就有四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)了。如圖中顯示，比對(duì)到的序列長(zhǎng)度為1405，看Identities這一值，才匹配到1344bp,而輸入的序列長(zhǎng)度也是為1344bp看上面的圖，就說(shuō)明比對(duì)到的序列要長(zhǎng)一點(diǎn)。由Qurey起始1和Sbjct(起始35)的起始位置可知，5'端是是多了一段的。有時(shí)也要注意3'端的。附：E值Expect)：表示隨機(jī)匹配的可能性，E值越大，隨機(jī)匹配的可能性也越大。E值接近零或?yàn)榱銜r(shí)，具本上就是完全匹配了。一致性(Identities)：或相似