柴葛顆粒劑的降溫作用與免疫調(diào)節(jié)功能

1、    柴葛顆粒劑的降溫作用與免疫調(diào)節(jié)功能         摘要：為了探討由柴胡、葛根、麻黃、杏仁、石膏、甘草等組成的，用于治療上感高熱之證，具有衛(wèi)氣兩清作用的中藥復(fù)方柴葛顆粒的降溫及調(diào)節(jié)免疫作用，采用腹腔巨噬細(xì)胞功能測定、免疫功能測定等方法觀察了柴葛顆粒對傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)菌苗及內(nèi)毒素誘發(fā)家兔體溫升高的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，在三聯(lián)菌苗試驗中，柴葛顆粒6.0g/kg劑量組解熱作用優(yōu)于銀黃口服液組(P0.01)，在內(nèi)毒素致熱實驗中，以4.0g/kg劑量組的效果最好。柴葛顆粒3

2、個劑量組(4.0g/kg、2.0g/kg、1.0g/kg)均能增加小鼠吞噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，并呈量效關(guān)系。惡葛顆粒能增加小鼠脾重、E花結(jié)數(shù)，能增加小鼠胸腺質(zhì)量，對氫化潑尼松(PDS)免疫小鼠的脾及胸腺萎縮有一定的對抗作用，柴葛顆粒不能提高正常小鼠及PDS免疫抑制小鼠的空斑形成細(xì)胞(PEC)值和IgG、IgM含量?？梢姴窀痤w粒具有解熱作用，能提高動物T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫功能，對抗體分泌細(xì)胞及抗體水平影響不大。主題詞：柴葛顆粒/藥理學(xué)；呼吸道感染/中藥療法；發(fā)熱/中藥療法；體溫調(diào)節(jié)/藥物作用；免疫，細(xì)胞/藥物作用中分類號：R511.7文獻(xiàn)標(biāo)識碼：AAntipyretic Effect a

3、nd Immunoregulatory Function of Caige GranuleZHANG ZhonghaiWANG ChanghaiWU Shaohua(Dept. of TCM,Xijing Hospital,Fourth Military Medeical University,Xi'an 710032,China);CHEN XiaoliZHANG DengwuWANG Shengchun(Dept. of Pharmacy,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,Chin

4、a)Abstract:To investigate the antipyretic effect and immunoregulatory function of Caige Granule(CG),influences of CG on rabbits with fever induced by typhoid paratyphoid A and B triple vaccine and endotoxin were observed,and phatocytic function of celiac macrophage and immunologic function in mice w

5、ere detected.Results showed that effect of CG in large dosage was much bettter than Yinhuang Oral Liquid(P0.01).CG in low,moderate and large dosages all increased phagocytic percentage and phagocytic index in mice,which showed a does_effect relationship. CG markedly increased the spleen and thymus w

6、eight and the number of E rosettes in mice,and counteracted the atrophy of spleen and thymus inimmunosuppressive mice induced by prednisolone.However,CG couldn't increase the plaque forming cells and the content of IgG and IgM in normal and immunosuppressive mice.It is indicated that CG exerts a

7、n antipyretic effect and can improve the T lymphocyte mediated immunity in animals but shows little effect on antibody_secreting cell and antibody level.Key words: CAIGE GRANULE/pharmocology;RESPIRATORY TRACT INFECTIONS/TCD therapy;FEVER/TCD therapy;BODY TEMPERATURE REGULATION/drug effects;IMMUNITY，

8、CELLULAR/drug effects發(fā)熱為內(nèi)、兒科常見癥候之一，多見于上呼吸道感染等病。柴葛顆粒(簡稱柴葛)用于治療上感高熱取得較好療效1。為了揭示該藥降溫機制，我們對其降溫與免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了實驗研究。1材料與方法1.1材料1.1.1藥物柴葛顆粒，第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院臨床藥理基地提供，批號：9401229，由柴胡、葛根、麻黃、杏仁、石膏、甘草等組成；銀黃口服液，魯南制藥廠生產(chǎn)，批號：930614-8；阿斯匹林，西北第二合成藥廠生產(chǎn)，批號：910713-33；黃芪甲甙，衛(wèi)生部藥品鑒定所提供；氫化潑尼松(PDS)，上海第九制藥廠生產(chǎn)，批號：926301。1.1.2菌種傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)

9、菌，蘭州生物制品研究所生產(chǎn)，批號：94202；流感病毒株A3/京防1/86，流感病毒亞甲型鼠肺適應(yīng)株Fm100，均為北京病毒研究所提供；內(nèi)毒素，福建省藥檢所標(biāo)準(zhǔn)參標(biāo)物質(zhì)。1.1.3動物昆明種Balb/c小鼠，雌雄兼用，體重1820g。純種大耳白家兔、綿羊、豚鼠、公雞均由第四軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心提供。1.2方法1.2.1降溫實驗取家兔60只，雄性按表1、表2隨機分成6組，實驗前測試正常體溫3次，隔15min測體溫1次，波動不超過0.2者供實驗用。將實驗用家兔60只按表1、表2的分組給藥劑量分別灌胃給藥。給藥后各組家兔耳緣靜脈注射傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)菌苗0.9mL/kg，內(nèi)毒素250ng/kg(

10、2500U/kg)，每隔1h測肛溫1次，并記錄。表1柴葛顆粒對傷寒菌苗誘導(dǎo)家兔體溫的影響組別w劑量/(g.kg-1)t正常/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)t注射后升高/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)0.5h1h2h3h4h5h6h蒸餾水組10mL/

11、kg39.28±0.230.58±0.341.38±0.321.52±0.272.06±0.241.75±0.171.28±0.280.74±0.22銀黃組6.67mL/kg39.07±0.230.44±0.291.08±0.291.64±0.251.55±0.181.10±0.221.10±0.220.61±0.25阿斯匹林組0.339.15±0.230.25±0.180.52±0.35*1.21

12、7;0.460.98±0.49*0.73±0.44*0.73±0.44*0.36±0.30柴葛大劑量組6.039.10±0.400.52±0.261.22±0.221.18±0.340.82±0.35*1.19±0.36*0.40±0.400.16±0.14柴葛中劑量組3.039.29±0.200.31±0.280.85±0.341.02±0.491.27±0.731.19±0.46*0.94±0.450.

13、65±0.40柴葛小劑量組2.039.50±0.250.64±0.351.33±0.661.24±0.451.45±0.771.29±0.690.97±0.620.64±0.48*與蒸餾水組比較P0.05，*P0.01；與阿斯匹林組比較P0.05，P0.01；各組實驗動物數(shù)均為10只表2柴葛對內(nèi)毒素所致家兔體溫的影響組別w劑量/(g.kg-1)t正常/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/2010032318271143

14、5" 14 17>±s)t注射后升高/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)0.5h1h2h3h4h5h6h蒸餾水組10mL/kg39.64±0.170.47±0.181.01±0.241.28±0.351.59±0.231.32±0.280.85±0.240.54±0.25柴葛大劑量組4.039.68±0.210

15、.27±0.290.61±0.340.76±0.30*0.80±0.33*0.48±0.25*0.33±0.18*0.23±0.19*柴葛中劑量組2.039.65±0.190.23±0.090.92±0.361.03±0.361.13±0.32*0.70±0.24*0.35±0.22*0.30±0.24柴葛小劑量組1.039.74±0.130.33±0.241.17±0.330.69±0.45*0.90&#

16、177;0.37*0.67±0.29*0.46±0.27*0.28±0.19阿斯匹林組0.339.68±0.170.23±0.090.50±0.26*0.66±0.29*1.05±0.25*0.73±0.34*0.40±0.29*0.23±0.24*與蒸餾水組比較P0.05，*P0.01；各組實驗動物數(shù)均為10只 1.2.2腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能測定昆明小鼠50只，按表3分組及給藥劑量，每日給藥1次，連續(xù)灌胃5d，末次給藥后ip2.5%的綿羊紅細(xì)胞(SRBC)懸液0.5mL/只，2h后脫

17、頸處死，按文獻(xiàn)2操作測定，求吞噬細(xì)胞的百分率和吞噬指數(shù)。表3柴葛對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響組別w劑量/(g.kg-1)p吞噬/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)%N吞噬指數(shù)/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)生理鹽水組20mL/kg31.3±

18、;2.860.46±0.04柴葛大劑量4.066.8±4.55*1.30±0.16*柴葛中劑量2.063.0±6.57*1.22±0.20*柴葛小劑量1.054.5±3.82*1.10±0.20*黃芪甲甙組0.0169.3±4.75*1.52±0.24*     *與生理鹽水組比較P0.05，*P0.01；各組實驗動物數(shù)均為10只     1.2.3免疫臟器指數(shù)的測定Balb/c小鼠100只，按表4分組及給藥劑量，用5%的SR

19、BC免疫小鼠，腹腔注射0.5mL/只，免疫3d后重復(fù)1次。每日給藥1次，共灌胃7d，免疫抑制組于免疫SRBC后皮下注射PDS25mg/kg，隔日1次，共4次，給藥方法同前。連續(xù)給藥7d后，小鼠眼眶取血，活殺取脾、胸腺稱濕重，結(jié)果均以脾和胸腺指數(shù)表示。表4柴葛對小鼠脾臟、胸腺指數(shù)的影響組別w劑量/(g.kg-1)脾臟指數(shù)/(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)(mg.g-1)胸腺指數(shù)/(<"z0401 (850 b

20、ytes)" src="/med/cano/201003/20100323182711435" 14 17>±s)(mg.g-1)生理鹽水組20mL/kg6.48±0.432.22±0.39柴葛大劑量4.08.69±0.35*2.38±0.51柴葛中劑量2.010.10±3.36*2.67±0.45柴葛小劑量1.08.48±1.52*2.66±0.49黃芪甲甙0.018.67±1.53*3.09±0.75生理鹽水+PDS0.0251.29±

21、0.240.72±0.26柴葛大劑量+PDS4.0+0.0252.83±0.392.59±0.33柴葛中劑量+PDS2.0+0.0252.82±0.562.04±0.74柴葛小劑量+PDS1.0+0.0251.47±0.920.74±0.36黃芪甲甙+PDS0.01+0.0254.10±1.382.40±0.32     *與生理鹽水組比較P0.05，*P0.01；與生理鹽水+PDS組比較P0.05，P0.01；各組實驗動物數(shù)均為10只 1.2.4脾臟抗體生成細(xì)胞(

22、PFC)及E花結(jié)的測定取以上各組小鼠脾臟加Gey's液碾勻，稀釋至8×109/L的細(xì)胞懸液，按文獻(xiàn)3方法，鏡下計算玫瑰E花結(jié)形成數(shù)；按QHS法4操作，脾細(xì)胞懸液稀釋至5×109/L，測定溶血空斑吸收值D(413nm)PFC。1.2.5血清溶血素IgG、IgM含量的測定取以上各組小鼠血清10L，分2管，每管加Gey's液4mL,按文獻(xiàn)5操作，紫外分光光度儀540nm波長下測得溶血空斑D(540nm)值，計算IgG(HC)及IgM(HC)含量。2結(jié)果2.1對家兔的解熱作用對照組家兔注射菌苗及內(nèi)毒素0.5h后體溫開始上升，3h達(dá)高峰，隨后逐漸下降；阿斯匹林組家兔體

23、溫下降明顯(P0.05)，銀黃組有降溫作用，但作用強度不及阿斯匹林組，柴葛3個劑量組降溫作用依次為6.0g/kg、3.0g/kg、2.0g/kg，柴葛6.0g/kg降溫作用與阿斯匹林近似(P0.05)，見表1、2。2.2對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響從表3可見，柴葛大、中、小劑量組都能提高小鼠的吞噬百分率和吞噬指數(shù)(與生理鹽水組比較P0.01)，劑量組之間呈量效關(guān)系，與黃芪甲甙比較，差異不顯著(P0.05)，說明柴葛能提高動物機體腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。2.3對小鼠免疫臟器指數(shù)的影響表4結(jié)果表明，柴葛3個劑量組均能增加SRBC致敏小鼠脾臟指數(shù)(與生理鹽水組比較P0.05)，與黃芪甲甙作用相似

24、；胸腺指數(shù)高于鹽水組，但無統(tǒng)計學(xué)意義，略低于陽性對照組，對PDS免疫小鼠的脾、胸腺萎縮具有一定的保護作用(大、中劑量組與PDS組相比P0.05)。2.4對小鼠脾臟抗體生成細(xì)胞(PFC)與脾淋巴細(xì)胞E花結(jié)的影響表5顯示，柴葛3個劑量組可降低SRBC免疫小鼠的PFC(與鹽水組比較P0.01)。用PDS免疫小鼠的PFC明顯低于鹽水對照組，聯(lián)合用柴葛及黃芪甲甙后，可進(jìn)一步降低PFC(與PDS組比較P0.05)。表5柴葛對小鼠血清溶血素IgG、IgM含量及脾臟抗體生成細(xì)胞、淋巴細(xì)胞E花結(jié)的影響(<"z0401 (850 bytes)" src="/med/cano/2

25、01003/20100323182711435" 14 17>±s)組別w劑量/(g.kg-1)HCIgG/(mg.kg-1)HCIgM/(mg.kg-1)D(413nm)PFCpE玫瑰花結(jié)形成/%生理鹽水組20mL/kg250.0±66.41202.2±31.41.89±0.219.8±6.36柴葛大劑量4.0201.4±41.8*1030.6±108.0*1.47±0.11*45.8±14.6*柴葛中劑量2.0125.1±23.0*841.8±241.6*1.27&

26、#177;0.25*49.8±24.4*柴葛小劑量1.0151.6±44.4*964.4±179.8*1.14±0.39*50.0±10.3*黃芪甲甙0.01467.4±84.0*1093.5±139.5*1.46±0.37*54.3±15.1*生理鹽水+PDS0.025+20mL/kg195.6±73.5875.4±106.71.53±0.442.4±1.0柴葛大劑量+PDS4.0+0.025190.2±38.4798.8±295.81.07&

27、#177;0.1223.8±2.7柴葛中劑量+PDS2.0+0.025215.4±42.7828.9±256.31.07±0.1222.0±0.8柴葛小劑量+PDS1.0+0.025159.6±56.3665.0±311.01.25±0.1720.1±5.7黃芪甲甙+PDS0.01+0.025451.7±135.61007.9±106.71.02±0.3615.8±18.0     *與鹽水組比較P0.05，*P0.01；與生

28、理鹽水+PDS組比較P0.05，P0.01；各組實驗動物數(shù)均為10只 柴葛3個劑量組的E花結(jié)形成數(shù)均高于鹽水組(P0.01)，與黃芪甲甙作用相似，對PDS免疫小鼠的E花結(jié)形成有拮抗作用，使E花結(jié)數(shù)明顯的高于鹽水組(P0.01)，并高于黃芪甲甙加PDS免疫抑制組。2.5對小鼠血清溶血素IgG、IgM含量的影響表5結(jié)果表明，柴葛可降低SRBC致敏小鼠的IgG、IgM含量(與鹽水組比較P0.01)。PDS可明顯抑制溶血素抗體的產(chǎn)生，聯(lián)合用藥后，柴葛3個劑量組的IgG和IgM含量都低于PDS組，但無統(tǒng)計學(xué)意義。說明柴葛對小鼠抗體水平?jīng)]有增強作用，不能對抗PDS免疫抑制作用，有加重PDS免疫抑制作用的趨勢。3討論柴葛顆粒是中藥復(fù)方制劑。方中柴胡和解退熱，葛根發(fā)表解肌、清熱生津，二者共為主藥；麻黃發(fā)汗解表、利水平喘，使邪從表從下而去，石膏辛甘清熱生津，兩藥共為臣藥，實取麻杏石甘湯清熱生津之意；甘草解毒、和中，既