環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定（試樣溶液的測(cè)定）

1、 試樣溶液的制備二標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的制備及衍生化三色譜參考條件四標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作五色譜分析六 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 目 錄 2 儀器與設(shè)備一 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 3 儀器與設(shè)備一儀 器規(guī) 格儀 器規(guī) 格氣相色譜儀帶氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）樣品粉碎機(jī)電子天平1mg、0.1mg微量注射器10L渦旋振蕩器1mL、10mL帶蓋離心管50mL離心機(jī)轉(zhuǎn)速4000r/min刻度移液管2mL、5mL、10mL恒溫水浴鍋冰箱14超聲波振蕩儀250mL容量瓶50mL 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 4 試樣溶液的制備 1.液體試樣處理 2.固體、半固體試樣處理 3.衍生化二 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資

2、源庫(kù) （1）普通液體試樣：搖勻稱(chēng)取25.0g試樣（如需要可過(guò)濾），用水定容至50mL備用。 1.液體試樣處理（1）普通液體試樣環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定5稱(chēng)取25.0g試樣定容至50mL普通液體試樣 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) （2）含二氧化碳的試樣：稱(chēng)取25.0g試樣于燒杯中，60水浴加熱30min以除二氧化碳，放冷，用水定容至50mL備用。1.液體試樣處理（2）含二氧化碳的試樣環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定6稱(chēng)取25.0g試樣60水浴加熱水浴加熱30min定容至50mL含二氧化碳的試樣 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) （3）含酒精的試樣：稱(chēng)取25.0g試樣于燒杯中，用氫氧化鈉溶液調(diào)至弱堿性pH78

3、，60水浴加熱30min以除酒精，放冷，用水定容至50mL備用。 1.液體試樣處理（3）含酒精的試樣環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定7稱(chēng)取25.0g試樣定容至50mL含酒精的試樣NaOH溶液調(diào)至弱堿至弱堿性性pH7860水浴加熱水浴加熱30min 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) （1）低脂、低蛋白樣品（果醬、果凍、水果罐頭、果丹類(lèi)、蜜餞涼果、濃縮果汁、面包、糕點(diǎn)、餅干、復(fù)合調(diào)味料、帶殼熟制堅(jiān)果和籽類(lèi)、腌漬的蔬菜等）2.固體、半固體試樣處理（1）低脂、低蛋白樣品環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定8環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定8稱(chēng)取3.00g5.00g打碎、混勻試樣于50mL離心管中加30mL水，振搖超聲提取20min，

4、混勻3000r/min離心10min過(guò)濾，用水分次洗滌殘?jiān)?，收集濾液定容至50mL低脂、低蛋白樣品 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) （2）高蛋白樣品（酸乳、雪糕、冰淇淋等奶制品及豆制品、腐乳等）：冰棒、雪糕、冰淇淋等分別放置于250mL燒杯中，待融化后攪勻稱(chēng)取。2.固體、半固體試樣處理（2）高蛋白樣品環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定9稱(chēng)取3.00g5.00g打碎、混勻試樣于50mL離心管中加30mL水，振搖超聲提取20min，混勻3000r/min離心10min過(guò)濾，用水分次洗滌殘?jiān)?，收集濾液定容至50mL高蛋白樣品加入2mL亞鐵氰化鉀溶液、2mL硫酸鋅溶液，混勻 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) （3）高

5、脂樣品（奶油制品、海魚(yú)罐頭、熟肉制品等）2.固體、半固體試樣處理（3）高脂樣品環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定10稱(chēng)取3.00g5.00g打碎、混勻試樣于50mL離心管中加25mL石油醚，振搖超聲提取3min，混勻1000r/min以上離心10min定容至50mL高脂樣品棄石油棄石油醚，用醚，用25mL石石油醚提油醚提取一次，取一次，棄石油棄石油醚醚60水浴水浴揮發(fā)去除石油醚殘?jiān)託堅(jiān)?0mL水，水，振搖振搖，超聲提取20min，混勻加入2mL亞鐵氰化鉀溶液、2mL硫酸鋅溶液，混勻3000r/min離心10min過(guò)濾，用水洗滌殘?jiān)?，收集濾液 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 3.衍生化環(huán)己氨基磺酸鈉含量

6、的測(cè)定11準(zhǔn)確加入準(zhǔn)確加入5.00mL正庚烷，加入正庚烷，加入2.5mL亞硝酸鈉溶液，亞硝酸鈉溶液，2.5mL硫硫酸溶液，蓋緊離心管蓋，搖勻酸溶液，蓋緊離心管蓋，搖勻準(zhǔn)確移取液體試樣溶液、固準(zhǔn)確移取液體試樣溶液、固體、半固體試樣溶液體、半固體試樣溶液10.0mL于于50mL帶蓋離心管中帶蓋離心管中離心管置試管架離心管置試管架上冰浴中上冰浴中5min在冰浴中放置在冰浴中放置30min，其間振搖其間振搖3次次5次次低溫離心（低溫離心（3000r/min）10min分分層或低溫靜置層或低溫靜置20min至澄清分層至澄清分層取上清液放置取上清液放置14冰冰箱保存以備進(jìn)樣用箱保存以備進(jìn)樣用蓋上蓋后置漩渦

7、混合器上振蓋上蓋后置漩渦混合器上振動(dòng)動(dòng)1min（或振搖（或振搖60次次80次）次）加入加入2.5g氯化鈉氯化鈉 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 12 標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的制備及衍生化三 1.標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的制備 2.標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的衍生化 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 1.標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的制備環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定130.02mg/mL0.05mg/mL0.10mg/mL0.20mg/mL0.50mg/mL0.01mg/mL準(zhǔn)確移取1.00mg/mL環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL、25.0mL于50mL容量瓶中，加水定容。配成標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度為0

8、.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL。臨用時(shí)配制。 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 2.標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的衍生化環(huán)己氨基磺酸鈉含量的測(cè)定14準(zhǔn)確加入準(zhǔn)確加入5.00mL正庚烷，加入正庚烷，加入2.5mL亞硝酸鈉溶液，亞硝酸鈉溶液，2.5mL硫硫酸溶液，蓋緊離心管蓋，搖勻酸溶液，蓋緊離心管蓋，搖勻準(zhǔn)確移取準(zhǔn)確移取系列標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0mL于于50mL帶蓋離心管中帶蓋離心管中離心管置試管架離心管置試管架上冰浴中上冰浴中5min在冰浴中放置在冰浴中放置30min，其間振搖其間振搖3次次5次次低溫離心（低溫離心（3000r/min

9、）10min分分層或低溫靜置層或低溫靜置20min至澄清分層至澄清分層取上清液放置取上清液放置14冰冰箱保存以備進(jìn)樣用箱保存以備進(jìn)樣用蓋上蓋后置漩渦混合器上振蓋上蓋后置漩渦混合器上振動(dòng)動(dòng)1min（或振搖（或振搖60次次80次）次）加入加入2.5g氯化鈉氯化鈉 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 15 色譜參考條件四（1）色譜柱：弱極性石英毛細(xì)管柱（內(nèi)涂5%苯基甲基聚硅氧烷，30m0.53mm1.0m），或等效柱。（2）進(jìn)樣口溫度：230。（3）升溫程序：初始柱溫55，保持3min，以10/min升溫至90，保持0.5min，20/min升溫至200，保持3min。（4）進(jìn)樣口：230。（5）進(jìn)樣量：

10、1L。（6）進(jìn)樣方式：不分流/分流進(jìn)樣，分流比1:5（分流比及方式可根據(jù)色譜儀器條件調(diào)整）。（7）載氣：高純氮?dú)猓魉?2.0mL/min，尾吹20mL/min。（8）氫氣：30 mL/min；空氣330 mL/min（載氣、氫氣、空氣流量大小可根據(jù)儀器條件進(jìn)行調(diào)整）。（9）檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），溫度260。 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 16 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作 分別吸取1L經(jīng)衍生化處理的標(biāo)準(zhǔn)系列各濃度溶液上清液，注入氣相色譜儀中，可測(cè)定不同濃度被測(cè)物的響應(yīng)值峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)，以環(huán)己醇亞硝酸酯和環(huán)己醇兩峰面積之和為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。五 食品營(yíng)養(yǎng)與檢測(cè)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù) 17 色譜分析在完全相同的條件下進(jìn)樣1L經(jīng)衍生化處理的試樣待測(cè)液上清液，保留時(shí)間定性，測(cè)定峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到樣液中的組分濃度；試樣上清液響應(yīng)值若超出線(xiàn)