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文檔簡介
1、生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第九章第九章 分子發(fā)光分析法分子發(fā)光分析法生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第七章第七章 分子發(fā)光分析法分子發(fā)光分析法生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第七章第七章 分子發(fā)光分析法分子發(fā)光分析法 基態(tài)分子吸收基態(tài)分子吸收能量能量( (電能、熱能、化學能或光能電能、熱能、化學能或光能等等) ),電子由基態(tài),電子由基態(tài)躍遷躍遷到激發(fā)態(tài),當電子由激發(fā)態(tài)到激發(fā)態(tài),當電子由激發(fā)態(tài)返返回回基態(tài)時,以發(fā)射基態(tài)時,以發(fā)射電磁輻射電磁輻射( (即光即光) )的形式釋放能量。的形式釋放能量。 分子發(fā)光:分子發(fā)光:分子分子 +電
2、能電能化學能化學能光能光能生物活性參生物活性參與化學發(fā)光與化學發(fā)光 電致發(fā)光電致發(fā)光化學發(fā)光化學發(fā)光光致發(fā)光光致發(fā)光生物發(fā)光生物發(fā)光熒光熒光磷光磷光生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第七章第七章 分子發(fā)光分析法分子發(fā)光分析法分子發(fā)光:分子發(fā)光:M +能能量量M*M +hv光致發(fā)光:光致發(fā)光:M + hvM*M +hv生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第七章第七章 分子發(fā)光分析法分子發(fā)光分析法第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光、磷光產生基本原理分子熒光、磷光產生基本原理 第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子
3、結構的關系第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程第六節(jié)第六節(jié) 定量分析方法定量分析方法生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理一、分子基態(tài)、激發(fā)態(tài)一、分子基態(tài)、激發(fā)態(tài)二、二、電子自旋多重度電子自旋多重度 三、激發(fā)態(tài)到基態(tài)的能量傳遞途徑三、激發(fā)態(tài)到基態(tài)的能量傳遞途徑生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理一、分子基態(tài)、激發(fā)態(tài)一、分子基態(tài)、激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài):激發(fā)態(tài): 基態(tài)分子吸收
4、能量后,價層電子躍遷到基態(tài)分子吸收能量后,價層電子躍遷到高能高能級級的分子軌道上稱為電子激發(fā)態(tài)的分子軌道上稱為電子激發(fā)態(tài) 。是分子的。是分子的亞穩(wěn)亞穩(wěn)定狀態(tài)定狀態(tài)。基態(tài):基態(tài): 在正常狀態(tài)下,分子處于在正常狀態(tài)下,分子處于最低能級最低能級的分子軌的分子軌道上稱為基態(tài)。是分子的道上稱為基態(tài)。是分子的穩(wěn)定狀態(tài)穩(wěn)定狀態(tài)。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理二、二、電子自旋多重度電子自旋多重度 電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),分子中的電子電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),分子中的電子可以處在不同的自旋狀態(tài)可以處在不同的自旋狀態(tài), ,常用常用電
5、子自旋多重度電子自旋多重度來描述來描述。M = 2S + 1S是電子的總自旋量子數(shù)是電子的總自旋量子數(shù)S為各電子自旋量子數(shù)的代數(shù)和。為各電子自旋量子數(shù)的代數(shù)和。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理 單重態(tài)(單重態(tài)(M=1):):電子自旋都配對的分子的電電子自旋都配對的分子的電子態(tài)稱為單重態(tài),子態(tài)稱為單重態(tài),用用“S”表示。表示。 三重態(tài)(三重態(tài)(M=3):):分子中的電子對的電子自旋分子中的電子對的電子自旋平行的電子態(tài)稱為三重態(tài),平行的電子態(tài)稱為三重態(tài),用用“T”表示。表示。S2 T2 S1 T1 S0 ( (洪特規(guī)
6、則洪特規(guī)則) ) 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理三、激發(fā)態(tài)到基態(tài)的能量傳遞途徑三、激發(fā)態(tài)到基態(tài)的能量傳遞途徑 電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài),返回基態(tài)時,電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài),返回基態(tài)時,通過通過輻射躍遷輻射躍遷( (發(fā)光發(fā)光) )和和非輻射躍遷非輻射躍遷( (熱熱) )等方式失去等方式失去能量。能量。傳遞途徑傳遞途徑輻射躍遷輻射躍遷熒光熒光磷光磷光內轉換內轉換系間跨越系間跨越振動弛豫振動弛豫非輻射躍遷非輻射躍遷延遲熒光延遲熒光外轉換外轉換返回速度快的途徑,發(fā)生幾率大返回速度快的途徑,發(fā)生幾率大!生物與化學工
7、程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析S2S0ehv1. 振動弛豫:振動弛豫:同一電子能級同一電子能級內以內以熱能量交換熱能量交換形式由形式由高振動能級至低相鄰振動能級間的躍遷。發(fā)生振動高振動能級至低相鄰振動能級間的躍遷。發(fā)生振動弛豫的時間弛豫的時間10 -12 s。( (一一) )、非輻射躍遷非輻射躍遷第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析S2S0S1ehv2. 內轉換內轉換:相同多重度相同多重度的電子能級中的電子能級中, 相等能級相等能級間的間的非輻射能級交換。發(fā)生內轉換的時間非輻射能級交換。發(fā)生內轉換的時間10
8、-12 s。第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析S2S0S1T1ehv3. 系間跨越系間跨越:不同多重態(tài)不同多重態(tài)在有在有重疊的轉動能級重疊的轉動能級間的間的非輻射躍遷。電子自旋改變,躍遷禁阻,通過自旋非輻射躍遷。電子自旋改變,躍遷禁阻,通過自旋- -軌道耦合等躍遷。軌道耦合等躍遷。第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析4. 外轉換外轉換:激發(fā)態(tài)分子與溶劑或其他分子之激發(fā)態(tài)分子與溶劑或其他分子之間產生相互作用而損失能量回到基態(tài)的非輻射間產生相
9、互作用而損失能量回到基態(tài)的非輻射躍遷。躍遷。 外轉換使熒光或磷光減弱或外轉換使熒光或磷光減弱或“猝滅猝滅”。第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析S2S0S1T11. 熒光發(fā)射:熒光發(fā)射:電子由電子由第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級級基態(tài)各振動能級基態(tài)各振動能級,發(fā)射時間約為發(fā)射時間約為10-710-9 s 。 發(fā)射熒光的能量比分子吸收的能量小發(fā)射熒光的能量比分子吸收的能量小,波長長波長長。 ehvhv( (二二) )、輻射躍遷輻射躍遷第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理
10、生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析2. 磷光發(fā)射磷光發(fā)射:電子由電子由第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級級基態(tài)各振動能級基態(tài)各振動能級。發(fā)光時間:發(fā)光時間:10-4100s 。S2S0S1T1hvehvS0 激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài)振動弛豫振動弛豫內轉換內轉換系間跨越系間跨越振動弛豫振動弛豫 T1 S0 第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光磷光產生基本原理分子熒光磷光產生基本原理生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征一、熒光激發(fā)光譜一、熒光激發(fā)光譜二、二、熒光發(fā)射光譜熒光發(fā)射光譜 三、熒光光譜的基本特征三、熒光光譜的基
11、本特征生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征一、熒光激發(fā)光譜一、熒光激發(fā)光譜 固定熒光波長,固定熒光波長,改變激發(fā)光波長改變激發(fā)光波長,測定不同波長的激測定不同波長的激發(fā)光激發(fā)所得到的發(fā)光激發(fā)所得到的熒光強度與激發(fā)光熒光強度與激發(fā)光波長曲線。波長曲線。 200260320380440500560620熒光激發(fā)光譜熒光激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜熒光發(fā)射光譜磷光光譜磷光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒(磷)光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒(磷)光光譜激發(fā)光譜相當于熒光物質的吸收光譜。激發(fā)光譜相當于熒光物質的吸收光譜。 生物與化學工程學院生物與化學工程學院
12、儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征二、二、熒光發(fā)射光譜熒光發(fā)射光譜 200260320380440500560620熒光激發(fā)光譜熒光激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜熒光發(fā)射光譜磷光光譜磷光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒(磷)光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒(磷)光光譜 固定激發(fā)波長,固定激發(fā)波長,掃描發(fā)射波長,掃描發(fā)射波長,測定測定化合物發(fā)射的熒光強化合物發(fā)射的熒光強度與不同發(fā)射波長曲度與不同發(fā)射波長曲線線。發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關。發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征三、熒光光譜的基本
13、特征三、熒光光譜的基本特征(一)、一)、Stokes位移位移 激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間的波長差值激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間的波長差值。產生原因:產生原因: 1. 振動弛豫及內轉換,產生位移主要原因;振動弛豫及內轉換,產生位移主要原因; 2. 基態(tài)不同振動能級間振動弛豫至最低振動能級;基態(tài)不同振動能級間振動弛豫至最低振動能級; 3. 外轉換。外轉換。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征(二)、發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關(二)、發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關 熒光分子吸收不同波長的能量,電子躍遷熒光分子吸收不同波長的能量,電子躍遷到不同激
14、發(fā)態(tài)能級,產生不同吸收帶,但都通到不同激發(fā)態(tài)能級,產生不同吸收帶,但都通過過無輻射躍遷方式無輻射躍遷方式回到回到第一激發(fā)單重態(tài)的最低第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級振動能級再躍遷回到再躍遷回到基態(tài)各振動能級基態(tài)各振動能級,產生波,產生波長一定的熒光。長一定的熒光。 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第二節(jié)第二節(jié) 熒光光譜與基本特征熒光光譜與基本特征(三)、熒光發(fā)射光譜與吸收光譜成鏡像關系(三)、熒光發(fā)射光譜與吸收光譜成鏡像關系 通常熒光發(fā)射光譜與它的吸收光譜(與激發(fā)通常熒光發(fā)射光譜與它的吸收光譜(與激發(fā)光譜形狀一樣)成鏡像對稱關系。光譜形狀一樣)成鏡像對稱關系。生物與化學工程學院
15、生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系一、分子產生熒光必須具備的條件一、分子產生熒光必須具備的條件二、二、化合物的結構與熒光化合物的結構與熒光 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系一、分子產生熒光必須具備的條件一、分子產生熒光必須具備的條件1. 具有合適的結構:通常是含有苯環(huán)和稠環(huán)的剛具有合適的結構:通常是含有苯環(huán)和稠環(huán)的剛性結構的有機分子;性結構的有機分子;2. 具有一定的熒光量子產率。具有一定的熒光量子產率。熒光量子產率(熒光量子產率():): 衡量熒光物
16、質發(fā)光能力。衡量熒光物質發(fā)光能力。 它表示激發(fā)分子發(fā)射出熒光它表示激發(fā)分子發(fā)射出熒光(或磷光或磷光) 的比例。的比例。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系f=發(fā)射的光量子數(shù)發(fā)射的光量子數(shù)吸收的光量子數(shù)吸收的光量子數(shù)f=發(fā)射發(fā)射熒光的分子數(shù)熒光的分子數(shù)被激發(fā)的分子數(shù)被激發(fā)的分子數(shù)生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系 熒光量子產率與激發(fā)態(tài)能量釋放各過程的速熒光量子產率與激發(fā)態(tài)能量釋放各過程的速率常數(shù)有關,可用各過程的速率常數(shù)來表示熒光率常數(shù)有關
17、,可用各過程的速率常數(shù)來表示熒光量子產率:量子產率:ffiiKKK 熒光發(fā)射過程的熒光發(fā)射過程的速率常數(shù),取決速率常數(shù),取決于分子結構。于分子結構。iICISCQiKKKK各種無輻射躍遷過程的速各種無輻射躍遷過程的速率常數(shù)之和。取決于分子率常數(shù)之和。取決于分子所處的化學環(huán)境,同時也所處的化學環(huán)境,同時也與化學結構有關。與化學結構有關。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系二、二、化合物的結構與熒光化合物的結構與熒光 (一)、(一)、 躍遷的類型躍遷的類型對于有機熒光物質對于有機熒光物質: : n * max100 平均
18、壽命平均壽命10-510-7 s;* max104 平均壽命平均壽命10-710-9 s S T速率速率kISC小。小。* 是有機化合物產生熒光的主要躍遷類型。是有機化合物產生熒光的主要躍遷類型。* * n生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系(二)、(二)、 共軛效應共軛效應產生熒光的有機物質,都含有共軛雙鍵體系,產生熒光的有機物質,都含有共軛雙鍵體系,共軛體系越大,熒光量子產率越高,向長波方向共軛體系越大,熒光量子產率越高,向長波方向移動。移動?;衔锘衔锪孔赢a率量子產率F ex(nm) em(nm) 苯苯萘萘蒽
19、蒽丁省丁省0.110.290.460.60205286365390278321400480生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系(三)、(三)、 剛性平面結構剛性平面結構芴芴f = 1聯(lián)苯聯(lián)苯f = 0.21. 減少分子振動,減小外轉換。減少分子振動,減小外轉換。2. 增大分子吸光截面,增大摩爾吸光系數(shù)。增大分子吸光截面,增大摩爾吸光系數(shù)。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系熒光黃熒光黃f = 0.92酚酞酚酞f = 0生物與化學工程學院生物
20、與化學工程學院儀器分析儀器分析第三節(jié)第三節(jié) 熒光產率與分子結構的關系熒光產率與分子結構的關系(三)、(三)、 取代基效應取代基效應1. 給電子取代基加強熒光給電子取代基加強熒光-NH2,-NHR ,-NR2,-OH, -OR ,-CN產生產生 p 共軛共軛2. 吸電子取代基減弱熒光吸電子取代基減弱熒光-C=O, -COOH ,-NO2n * 躍遷,躍遷, 摩爾吸光系數(shù)小,熒光發(fā)射弱,系間跨摩爾吸光系數(shù)小,熒光發(fā)射弱,系間跨躍較大,同樣使熒光減弱,相應磷光增強。躍較大,同樣使熒光減弱,相應磷光增強。 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光
21、強度的環(huán)境因素一、溶劑一、溶劑二、二、溫度溫度 三、溶液的三、溶液的PH值值四、四、內濾光作用與自吸現(xiàn)象內濾光作用與自吸現(xiàn)象 五、五、熒光猝滅熒光猝滅 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素一、溶劑一、溶劑 主要表現(xiàn)為主要表現(xiàn)為溶劑的極性、氫鍵、配位鍵溶劑的極性、氫鍵、配位鍵的形成對的形成對化合物的熒光發(fā)生變化?;衔锏臒晒獍l(fā)生變化。 * * 躍遷類型:激發(fā)態(tài)極性比基態(tài)大,溶劑極躍遷類型:激發(fā)態(tài)極性比基態(tài)大,溶劑極性增大,性增大,躍遷能量降低躍遷能量降低,發(fā)生紅移,熒光增強。,發(fā)生紅移,熒光增強。 氫鍵、配位鍵的形成主要影
22、響熒光分子的氫鍵、配位鍵的形成主要影響熒光分子的存在型存在型體、電離狀態(tài)體、電離狀態(tài),熒光強度和形狀均發(fā)生很大變化。,熒光強度和形狀均發(fā)生很大變化。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素二、二、溫度溫度 溫度升高,外轉換的幾率增加。熒光強度降低。溫度升高,外轉換的幾率增加。熒光強度降低。三、溶液的三、溶液的PH值值不同不同PH值下,熒光分子存在形式不同。值下,熒光分子存在形式不同。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素四、四、內濾光作用與自吸現(xiàn)象內濾光
23、作用與自吸現(xiàn)象 自吸現(xiàn)象自吸現(xiàn)象:化合物的熒光發(fā)射光譜的短波化合物的熒光發(fā)射光譜的短波長端與其吸收光譜的長波長端重疊,產生自吸長端與其吸收光譜的長波長端重疊,產生自吸收;如蒽化合物。收;如蒽化合物。 內濾光作用內濾光作用:溶液中含有能吸收熒光物質溶液中含有能吸收熒光物質發(fā)射的熒光的組分,如色胺酸中的重鉻酸鉀。發(fā)射的熒光的組分,如色胺酸中的重鉻酸鉀。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素五、五、熒光猝滅熒光猝滅 熒光分子與溶劑分子或者其他分子之間存在熒光分子與溶劑分子或者其他分子之間存在相互作用,使得熒光強度降低或消失的現(xiàn)象
24、。相互作用,使得熒光強度降低或消失的現(xiàn)象。(一)、(一)、 碰撞猝滅碰撞猝滅-動態(tài)猝滅動態(tài)猝滅 M* + Q M + Q + 熱量熱量激發(fā)態(tài)分子激發(fā)態(tài)分子猝滅劑猝滅劑生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素(二)、(二)、 生成化合物的猝滅生成化合物的猝滅-靜態(tài)猝滅靜態(tài)猝滅 M + Q M Q 基態(tài)的熒光物質與猝滅劑反應生成非熒光的基態(tài)的熒光物質與猝滅劑反應生成非熒光的化合物,導致熒光的猝滅?;衔铮瑢е聼晒獾拟?。(三)、(三)、 氧的猝滅氧的猝滅 氧對溶液熒光產生猝滅作用的原因比較復氧對溶液熒光產生猝滅作用的原因比較復雜
25、,可能包含著多種機理。雜,可能包含著多種機理。 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第四節(jié)第四節(jié) 影響熒光強度的環(huán)境因素影響熒光強度的環(huán)境因素(四)、(四)、 自猝滅自猝滅 熒光物質的濃度較大時,會使熒光強度降低。熒光物質的濃度較大時,會使熒光強度降低。此外,還有電荷轉移猝滅,光化學反應猝滅等。此外,還有電荷轉移猝滅,光化學反應猝滅等。 自猝滅可能有如下幾個原因:自猝滅可能有如下幾個原因:1. 熒光物質分子之間的碰撞能量損失熒光物質分子之間的碰撞能量損失; ;2. 熒光物質的自吸收熒光物質的自吸收; ;3. 熒光物質分子的締合。熒光物質分子的締合。生物與化學工程學院生物與化學工
26、程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程Cary Eclipse 熒光分光光度計熒光分光光度計熒光、磷光化學熒光、磷光化學/生物發(fā)光生物發(fā)光美國瓦里安技術中國有限公司美國瓦里安技術中國有限公司生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程一、一、熒光分光光度計結構流程熒光分光光度計結構流程 二、二、磷光分光光度計結構流程磷光分光光度計結構流程 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程一、一、熒光分光光度計結構流程熒光分光光
27、度計結構流程 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程光源光源樣品池樣品池激發(fā)激發(fā)單色器單色器檢測器檢測器數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理儀器控制儀器控制發(fā)射發(fā)射單色器單色器組成:組成:激發(fā)光源、樣品池、雙單色器、檢測器。激發(fā)光源、樣品池、雙單色器、檢測器。特殊點:特殊點:兩個單色器兩個單色器,光源與檢測器通常成,光源與檢測器通常成直角直角。生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程(一)、(一)、激發(fā)光源激發(fā)光源 氙燈氙燈、高壓汞燈,染料激光器。、高壓汞燈,染料激光器。(
28、二)、(二)、單色器單色器 激發(fā)單色器:激發(fā)單色器:選擇激發(fā)光波長,選擇激發(fā)光波長,用以分離出所需用的激發(fā)光。用以分離出所需用的激發(fā)光。發(fā)射單色器:發(fā)射單色器:選擇熒光發(fā)射波長,選擇熒光發(fā)射波長,用以濾去雜散光、瑞利光、用以濾去雜散光、瑞利光、拉曼光和雜質所發(fā)射的熒光。拉曼光和雜質所發(fā)射的熒光。 生物與化學工程學院生物與化學工程學院儀器分析儀器分析第五節(jié)第五節(jié) 分子發(fā)光光譜儀結構流程分子發(fā)光光譜儀結構流程(三)、(三)、樣品池樣品池 I0ItIf樣品池四面透光。樣品池四面透光。(四)、(四)、檢測器檢測器 光電倍增管。光電倍增管。 檢測器的方向與激發(fā)光的方向成直角,以消檢測器的方向與激發(fā)光的方向成直角,以消除樣品池中除樣品池中透射
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