廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《劍葉龍血樹組培種苗規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》(征求意見(jiàn)稿)編制說(shuō)明

1、廣西地方標(biāo)準(zhǔn)劍葉龍血樹組培種苗規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(征求意見(jiàn)稿)編 制 說(shuō) 明一、標(biāo)準(zhǔn)編制工作意義劍葉龍血樹(Dracaena cochinchinensis (Lour) S.C.Chen) 又名千年木、血竭樹、交趾龍血樹，是漸危種，屬國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物，2003年被國(guó)際自然與自然資源保護(hù)聯(lián)合會(huì)劃歸為易受危害的物種列為紅色名單，被定為佛得角紅皮書中的瀕危物種，是目前國(guó)內(nèi)公認(rèn)的國(guó)產(chǎn)龍血竭的基源植物。 血竭是一種名貴傳統(tǒng)中藥，在我國(guó)的使用歷史已有1500年以上。據(jù)本草綱目記載，龍血竭性溫、平，味甘、咸，無(wú)毒，入血分，歸肺、脾、腎三經(jīng)，具有活血化瘀、消腫止痛、收斂止血，軟堅(jiān)散結(jié)、生肌斂瘡等顯著功效，被

2、譽(yù)為活血圣藥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，血竭具有改善機(jī)體微循環(huán)、調(diào)整機(jī)體新陳代謝、改善機(jī)體免疫功能等作用。雖然血竭在國(guó)內(nèi)的使用歷史悠久，但在1972年以前一直是依靠東南亞和非洲進(jìn)口，價(jià)格十分昂貴。1973年蔡希陶先生在云南思茅地區(qū)孟連縣境內(nèi)的石灰山上發(fā)現(xiàn)了大片可以產(chǎn)生血竭的龍血樹，才暫時(shí)緩解了我國(guó)血竭的資源壓力，從而誕生了國(guó)產(chǎn)龍血竭的歷史。但是龍血樹的生長(zhǎng)非常緩慢，一年之內(nèi)樹干增粗還不到1厘米，龍血竭又為龍血樹受傷后流出的紅色液體，產(chǎn)量非常有限。而且隨著醫(yī)藥觀念的轉(zhuǎn)變，越來(lái)越多的人群傾向于使用傳統(tǒng)中醫(yī)藥來(lái)防病治病，中藥資源的用量急劇上升，越來(lái)越多的藥用植物趨于稀缺，甚至瀕危。近年來(lái)，市場(chǎng)對(duì)龍血竭需求的

3、不斷擴(kuò)大，目前龍血竭價(jià)格已漲到1000-1300元/kg，致使人們對(duì)劍葉龍血樹野生資源實(shí)施了不合理的掠奪性采伐，劍葉龍血樹野生資源日趨枯竭，瀕危滅絕，已經(jīng)被國(guó)際上很多國(guó)家列為珍稀瀕危保護(hù)植物。也由此出現(xiàn)了多種龍血竭的混偽品在全國(guó)各地市場(chǎng)上廣泛流通，引發(fā)了惡性循環(huán)的市場(chǎng)現(xiàn)象和多起中毒事故。目前對(duì)劍葉龍血樹的研究主要在其藥用價(jià)值方面，也就是對(duì)其藥物化學(xué)成分的研究。對(duì)劍葉龍血樹的植物形態(tài)、藥材性狀、形態(tài)解剖學(xué)和理化特征等也有一定的研究，這在一定程度上也為劍葉龍血樹的生藥學(xué)鑒定提供了一定的依據(jù)。關(guān)于龍血樹的組織培養(yǎng)方面的研究方面，目前的報(bào)道主要集中在海南龍血樹，包括2005年以海南龍血樹的幼嫩莖段為材

4、料進(jìn)行了組織培養(yǎng)的研究，建立了組織培養(yǎng)體系。以及為了克服愈傷組織成苗途徑易產(chǎn)生突變苗和培養(yǎng)周期較長(zhǎng)的不足，楊本鵬等以海南龍血樹的頂芽和側(cè)芽作為外植體，通過(guò)對(duì)培養(yǎng)材料和培養(yǎng)條件的系統(tǒng)研究，建立了海南龍血樹腋芽萌生途徑成苗的組織培養(yǎng)和快速繁殖體系，這些研究為其他龍血樹的組織培養(yǎng)提供了參考。關(guān)于劍葉龍血樹組織培養(yǎng)方面的研究還比較少，經(jīng)查閱中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)批準(zhǔn)發(fā)布公告與中華人民共和國(guó)地方標(biāo)準(zhǔn)備案公告，目前劍葉龍血樹組培種苗規(guī)范化生產(chǎn)無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，又無(wú)地方標(biāo)準(zhǔn)，因此，本標(biāo)準(zhǔn)的制定，為提供優(yōu)質(zhì)的劍葉龍血樹種苗提供理論指導(dǎo)，對(duì)龍血樹屬種質(zhì)資源保存和可持續(xù)利用具有重要意義。二、標(biāo)準(zhǔn)編制及研究過(guò)程

5、1、標(biāo)準(zhǔn)編制過(guò)程2012年開(kāi)始，標(biāo)準(zhǔn)編制小組在廣西中醫(yī)藥管理局下達(dá)的廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科技專項(xiàng)（任務(wù)書編號(hào)：GZPT1234）“劍葉龍血樹細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的研究”的支持下開(kāi)展劍葉龍血樹組培苗繁殖技術(shù)研究，經(jīng)過(guò)兩年多的調(diào)查、研究和實(shí)踐，掌握了劍葉龍血樹組培苗規(guī)范化生產(chǎn)的技術(shù)，目前已經(jīng)申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利1項(xiàng)一種劍葉龍血樹組織培養(yǎng)快速繁殖方法）、撰寫相關(guān)研究論文1篇。標(biāo)準(zhǔn)主管部門廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局下達(dá)2014第四批廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制定（修訂）項(xiàng)目計(jì)劃的通知（桂質(zhì)監(jiān)函2014381號(hào)）后，我們及時(shí)成立了以廣西壯族自治區(qū)藥用植物園韋瑩為主持人，韋坤華、李林軒、李翠、黃寶優(yōu)、繆劍華、王一諾、農(nóng)東新

6、為組員的標(biāo)準(zhǔn)編制小組，及時(shí)部署了工作方案和小組成員調(diào)研、編制工作時(shí)間安排表。在編制過(guò)程中，我們?cè)趶V泛調(diào)查和試驗(yàn)研究的同時(shí)還咨詢了相關(guān)權(quán)威專家，力爭(zhēng)編制工作過(guò)程科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)，方法、技術(shù)路線正確。2、標(biāo)準(zhǔn)研究過(guò)程前期研究發(fā)現(xiàn)，劍葉龍血樹愈傷組織誘導(dǎo)及苗生長(zhǎng)的影響因素有外植體、激素配比、培養(yǎng)條件等。相對(duì)而言，取劍葉龍血樹芽為外植體愈傷組織發(fā)生時(shí)間早，但在培養(yǎng)過(guò)程中，污染率和長(zhǎng)勢(shì)均比種子誘導(dǎo)效果差，因而認(rèn)為種子為最佳外植體；不同的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度對(duì)愈傷組織性狀存在差異，愈傷組織緊密或疏松，對(duì)芽的分化也有顯著的影響；光照培養(yǎng)對(duì)劍葉龍血樹愈傷組織發(fā)生時(shí)間、性狀和出愈率有較大影響，更有利于劍葉龍血樹愈傷組織

7、的誘導(dǎo)。前人研究發(fā)現(xiàn)劍葉龍血樹愈傷組織易褐化，并在培養(yǎng)基中添加活性炭、PVP吸附劑抑制褐化，本研究利用活性炭作為褐化抑制劑，取得較好的抑制褐化效果。此外，編制小組對(duì)劍葉龍血樹組培苗的壯苗生根、快繁技術(shù)進(jìn)行了多次的正交試驗(yàn)，解決了組培苗褐化、繁殖率低等技術(shù)難題。標(biāo)準(zhǔn)編制項(xiàng)目下達(dá)后，按照廣西區(qū)質(zhì)監(jiān)局關(guān)于編制標(biāo)準(zhǔn)工作的要求，編制小組于項(xiàng)目實(shí)施期間，多次進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、叢生芽分化等試驗(yàn)，篩選出各個(gè)培養(yǎng)階段最佳激素配比和培養(yǎng)條件，并進(jìn)行多次比較分析，確保數(shù)據(jù)及方法的科學(xué)性。同時(shí)，小組成員在編制過(guò)程多渠道去咨詢內(nèi)行專家，確保標(biāo)準(zhǔn)的可靠性。編制小組根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的格式和編寫方法，按照GB/T 1.1-2009的

8、標(biāo)準(zhǔn)編寫格式規(guī)定劍葉龍血樹組培種苗規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程廣西地方標(biāo)準(zhǔn)“工作組討論稿”。根據(jù)專家反饋意見(jiàn)，編制小組對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了進(jìn)一步的修改和完善。并和相關(guān)科研單位、科研院校等多次溝通交流，借鑒其他研究者及專家的方法技術(shù)，對(duì)收到的反饋意見(jiàn)進(jìn)行分析、采納、修改，形成了本標(biāo)準(zhǔn)的征求意見(jiàn)稿。三、標(biāo)準(zhǔn)編制原則1、制定本標(biāo)準(zhǔn)的目的是規(guī)范劍葉龍血樹組培苗生產(chǎn)，為解決龍血樹屬藥用植物野生資源短缺提供快速繁殖的新方法和優(yōu)質(zhì)物種。2、本標(biāo)準(zhǔn)的格式和編寫方法執(zhí)行GB/T 1.1-2009的規(guī)定。3、本標(biāo)準(zhǔn)的制定力求科學(xué)、準(zhǔn)確、系統(tǒng)，內(nèi)容與當(dāng)前廣西劍葉龍血樹組培苗生產(chǎn)的實(shí)際和社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況緊密結(jié)合，可操作性強(qiáng)。4、本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

9、了規(guī)定了劍葉龍血樹組培苗的術(shù)語(yǔ)和定義、培育技術(shù)、包裝、運(yùn)輸和生產(chǎn)檔案。適用于劍葉龍血樹組培苗生產(chǎn)公司和企業(yè)通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范化生產(chǎn)組培苗。5、本標(biāo)準(zhǔn)的編寫以劍葉龍血樹組培苗規(guī)范化繁育技術(shù)研究的數(shù)據(jù)為基本依據(jù)，同時(shí)結(jié)合了生產(chǎn)企業(yè)和市場(chǎng)流通現(xiàn)狀。四、主要技術(shù)內(nèi)容的確定1、范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了劍葉龍血樹組培苗的規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程。2、規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB

10、 4285 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)3、主要技術(shù)內(nèi)容（1）組培瓶苗培育組培瓶苗的培育包括外植體的選擇、外植體的消毒、外植體接種、誘導(dǎo)培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)7個(gè)部分。（2）馴化苗培育馴化苗培育包括苗床選址、苗床滅菌、苗床構(gòu)建、移栽煉苗前處理、移栽煉苗、苗床育苗管理和苗期病蟲害防治7個(gè)部分。（3）病蟲害防治劍葉龍血樹組培苗育苗期常見(jiàn)的病蟲害為紅蜘蛛等螨類害蟲，病蟲害的防治參照GB 4285 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。五、與現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)（征求意見(jiàn)稿）是依據(jù)中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法、中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范、廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)等國(guó)家相關(guān)的法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上結(jié)合地方實(shí)際情況制定出來(lái)的，因此與現(xiàn)行法律、法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突。六、實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施建議標(biāo)準(zhǔn)必須是在遵循法律法規(guī)及國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的前提下，綜合劍葉龍血樹組培苗生產(chǎn)企業(yè)的實(shí)際要求制定，標(biāo)準(zhǔn)必須具有法律依據(jù)及可操作性。將劍葉龍血樹組培種苗規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程作為推薦性標(biāo)準(zhǔn)試行一年后，對(duì)不完善的地方加以完善和修正，為進(jìn)一步規(guī)范市場(chǎng)，建議該標(biāo)準(zhǔn)為強(qiáng)制性地方標(biāo)準(zhǔn)。參考文獻(xiàn)1. 林芹,黎明,雷震鳴,李科,等.劍葉龍血樹的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究J,Journal of Guangxi Traditional Chinese M