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文檔簡(jiǎn)介
1、.1 .2l血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)測(cè)定測(cè)定l血清補(bǔ)體測(cè)定血清補(bǔ)體測(cè)定l細(xì)胞免疫檢測(cè)細(xì)胞免疫檢測(cè)l感染免疫檢測(cè)感染免疫檢測(cè)l自身免疫檢查自身免疫檢查l肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)l腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè).3lIg通常是指具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)通常是指具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。的球蛋白。l應(yīng)用免疫電泳與超速離心分析可將應(yīng)用免疫電泳與超速離心分析可將Ig分分5類:類: IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。lIgG:含量最多或最主要的:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一),唯一能夠通過(guò)胎盤的能夠通過(guò)胎盤的Ig。主
2、要由脾臟和淋巴結(jié)中的。主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成與分泌。漿細(xì)胞合成與分泌。lIgA:約占:約占10%,SIgA在局部免疫中起重要作在局部免疫中起重要作用。主要由腸系淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。用。主要由腸系淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。.4lIgM:分子量最大,由:分子量最大,由5個(gè)個(gè)IgM單體通過(guò)單體通過(guò)J鏈連接。是最早出現(xiàn)的鏈連接。是最早出現(xiàn)的Ig,是抗原刺激,是抗原刺激后最早出現(xiàn)的抗體,其殺菌、溶菌、溶后最早出現(xiàn)的抗體,其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比血、促吞噬以及凝集作用比IgG高高5001000倍。倍。l測(cè)定方法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(測(cè)定方法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(RID)或)或免疫比濁法
3、。免疫比濁法。.5l參考值:參考值: IgG:7.616.6g/L (RID法)法) IgA:7103350mg/L IgM :0.482.12 g/L .6l臨床意義臨床意義 免疫球蛋白增高免疫球蛋白增高多克隆增高多克隆增高:常見(jiàn)于各種慢性感染、慢性肝常見(jiàn)于各種慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如疾病,如SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。單克隆增高單克隆增高:主要見(jiàn)于免疫增殖性疾病,如主要見(jiàn)于免疫增殖性疾病,如多發(fā)性骨隋瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。多發(fā)性骨隋瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。 .7l免疫球蛋白降低:免疫球蛋白降低:常見(jiàn)于各
4、類先天性免疫缺陷常見(jiàn)于各類先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及長(zhǎng)病、獲得性免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及長(zhǎng)期使用免疫抑制劑的病人。期使用免疫抑制劑的病人。l血清血清IgD測(cè)定測(cè)定 免疫擴(kuò)散法:免疫擴(kuò)散法:062mg/L 已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗腺抗體和抗“O”抗體等均屬抗體等均屬IgD,但活性甚低。,但活性甚低。 .8 血清血清IgE:主要由鼻咽部、支氣管、胃腸主要由鼻咽部、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)道等粘膜固有層的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,能與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞胞抗體,能與肥大細(xì)胞、嗜堿性
5、粒細(xì)胞膜上的膜上的FceR結(jié)合,產(chǎn)生結(jié)合,產(chǎn)生I型變態(tài)反應(yīng)。型變態(tài)反應(yīng)。 ELASA:0.10.9mg/L 臨床意義:臨床意義: 1. I型變態(tài)反應(yīng)型變態(tài)反應(yīng) 2. IgE型骨髓瘤、寄生蟲(chóng)感染等型骨髓瘤、寄生蟲(chóng)感染等 3. 慢性肝炎、慢性肝炎、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。.9 l是一種單克隆是一種單克隆B淋巴細(xì)胞異常增殖時(shí)產(chǎn)生的淋巴細(xì)胞異常增殖時(shí)產(chǎn)生的IgG分分子或片段,一般不具有抗體活性。子或片段,一般不具有抗體活性。l參考值:參考值:蛋白電泳法,免疫電泳法:陰性蛋白電泳法,免疫電泳法:陰性l意義:意義:1.多發(fā)性骨髓瘤(多發(fā)性骨髓瘤(MM),占),占35%65%,其,其中
6、中IgG型占型占60%左右;左右; IgA型占型占20%左右;左右; 輕鏈型輕鏈型占占15%左右;左右; IgD、 IgE型罕見(jiàn)。型罕見(jiàn)。2.巨球蛋白血癥。巨球蛋白血癥。3.重鏈?。ㄖ劓湶。℉CDs)。)。4.半分子病。半分子病。5.惡性淋巴瘤。惡性淋巴瘤。6.良性良性M蛋白血癥。蛋白血癥。.10l補(bǔ)體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白,分補(bǔ)體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白,分3組:組:9種補(bǔ)體成分(種補(bǔ)體成分(C1C9););B、D、P、H、I 因子;補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,如因子;補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,如C1抑制物、抑制物、C4結(jié)合結(jié)合蛋白、促衰變因子等。蛋白、促衰變因子等。l總補(bǔ)體溶血活性(總補(bǔ)體溶血活性(C
7、H50)測(cè)定)測(cè)定l參考值參考值 試管法:試管法:50000100000U/L 意義:意義:增高增高 見(jiàn)于急性炎癥、急性組織損傷、惡見(jiàn)于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤及妊娠。性腫瘤及妊娠。降低降低 見(jiàn)于急性腎小球腎炎、見(jiàn)于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、性肝病、肝硬化、AIDS、嚴(yán)重?zé)齻取?、?yán)重?zé)齻取?11l血清血清C3:主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成,在經(jīng)典主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成,在經(jīng)典激活途徑與旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。激活途徑與旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。 參考值:參考值:免疫比濁法免疫比濁法0.851.
8、70g/L 增高增高 作為急性時(shí)相蛋白,在急性炎癥、傳染病作為急性時(shí)相蛋白,在急性炎癥、傳染病早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、抑制物排斥早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、抑制物排斥反應(yīng)時(shí)增高。反應(yīng)時(shí)增高。降低降低 補(bǔ)體合成能力降低;合成原補(bǔ)體合成能力降低;合成原料不足;消耗或丟失太多;先天性補(bǔ)體缺乏。料不足;消耗或丟失太多;先天性補(bǔ)體缺乏。.12l血清血清C4測(cè)定:測(cè)定:由肝臟、吞噬細(xì)胞合成,由肝臟、吞噬細(xì)胞合成,參與補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑。參與補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑。l參考值:參考值:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法:0.197+/-0.109/L。l臨床意義臨床意義基本與基本與C3相似,降低還見(jiàn)于多相似,
9、降低還見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性腎病、遺傳性C4缺乏缺乏癥等。癥等。.13l補(bǔ)體補(bǔ)體C1q測(cè)定測(cè)定l參考值:參考值:0.1790.04g/L l臨床意義:臨床意義:與與C3相似,降低還見(jiàn)于活動(dòng)相似,降低還見(jiàn)于活動(dòng)性混合性結(jié)締組織病、重度營(yíng)養(yǎng)不良、性混合性結(jié)締組織病、重度營(yíng)養(yǎng)不良、腎病綜合征、重度聯(lián)合免疫缺陷病等。腎病綜合征、重度聯(lián)合免疫缺陷病等。lB因子測(cè)定因子測(cè)定-C3激活劑前體激活劑前體.14l淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)l T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè):淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè):E玫瑰花玫瑰花形成試驗(yàn)、免疫熒光法(形成試驗(yàn)、免疫熒光法(IFA)、熒光激)、
10、熒光激活細(xì)胞分類法(活細(xì)胞分類法(FACS)、免疫金銀法以)、免疫金銀法以及免疫酶染色法等。及免疫酶染色法等。lE玫瑰花形成試驗(yàn)玫瑰花形成試驗(yàn) SRBC+CD2l參考值參考值 Et 64.4%6.7%l免疫熒光法免疫熒光法.15l意義意義 可用于可用于T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù),淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù), T淋巴細(xì)胞亞淋巴細(xì)胞亞群的分類以及判斷群的分類以及判斷T淋巴細(xì)胞的活化程度。淋巴細(xì)胞的活化程度。lCD3 分子表達(dá)于所有成熟分子表達(dá)于所有成熟T淋巴細(xì)胞的表面,淋巴細(xì)胞的表面,是總是總T淋巴細(xì)胞的重要標(biāo)志,淋巴細(xì)胞的重要標(biāo)志,CD3+ 常見(jiàn)于甲常見(jiàn)于甲狀腺功能亢進(jìn)、淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎、重癥肌狀腺功能亢進(jìn)、淋巴細(xì)胞性
11、甲狀腺炎、重癥肌無(wú)力以及器官移植后排斥反應(yīng)。無(wú)力以及器官移植后排斥反應(yīng)。 CD3+ 主要見(jiàn)主要見(jiàn)于免疫缺陷病,如于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺發(fā)育不、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征以及聯(lián)合免疫缺陷病等。亦可見(jiàn)于惡全綜合征以及聯(lián)合免疫缺陷病等。亦可見(jiàn)于惡性腫瘤、性腫瘤、SLE、免疫抑制劑治療等。、免疫抑制劑治療等。.16l白細(xì)胞分化抗原(白細(xì)胞分化抗原(cluster differentiation,CD)lCD3代表總代表總T淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,CD4是是輔助、誘導(dǎo)輔助、誘導(dǎo)T細(xì)胞的標(biāo)細(xì)胞的標(biāo)志,志,CD8是抑制、殺傷性是抑制、殺傷性T細(xì)胞的標(biāo)志。應(yīng)用單抗和熒細(xì)胞的標(biāo)志。應(yīng)用單抗和熒光標(biāo)記二抗
12、反應(yīng)在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞儀中計(jì)數(shù)光標(biāo)記二抗反應(yīng)在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞儀中計(jì)數(shù)CD的百分率。的百分率。l參考值參考值 :免疫熒光法(:免疫熒光法(IFA):): CD3為為63.1%10.8%; CD4 為為42.8%9.5%;CD8 19.6%5.9%;CD4 /CD8為(為(2.20.7)/1。流式細(xì)胞術(shù):流式細(xì)胞術(shù):CD3 61%85%;CD4 28%58%;CD8 19%48%;CD4 /CD80.92.0/1。.17l臨床意義臨床意義lCD3lCD4+T細(xì)胞下降細(xì)胞下降 常見(jiàn)于某些病毒感染性疾病,如常見(jiàn)于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、嚴(yán)重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術(shù)、應(yīng)用、嚴(yán)
13、重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術(shù)、應(yīng)用免疫抑制劑等;免疫抑制劑等; 升高升高見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期。見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期。lCD8+ T細(xì)胞下降細(xì)胞下降 常見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、常見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Sjogren綜合綜合征、重癥肌無(wú)力、征、重癥肌無(wú)力、DM(II型)以及膜型腎小球腎炎等;型)以及膜型腎小球腎炎等; 升高升高見(jiàn)于傳染性單核細(xì)胞增多癥急性期、見(jiàn)于傳染性單核細(xì)胞增多癥急性期、MCV以及慢以及慢性乙肝。性乙肝。lCD4 +/CD8+比值下降,比值下降,常見(jiàn)于常見(jiàn)于AIDS、瘤型麻風(fēng)病、惡、瘤型麻風(fēng)病、惡性腫瘤進(jìn)行期和復(fù)發(fā)時(shí)。也見(jiàn)于部分感染性疾病如傳性腫瘤進(jìn)行期和復(fù)發(fā)時(shí)。也見(jiàn)于部分感染性疾
14、病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、染性單核細(xì)胞增多癥、MCV、血吸蟲(chóng)病等;、血吸蟲(chóng)病等;增高增高見(jiàn)于見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期、SLE、Sjogren綜合征、重癥綜合征、重癥肌無(wú)力、膜型腎小球腎炎以及器官移植后排斥反應(yīng)等。肌無(wú)力、膜型腎小球腎炎以及器官移植后排斥反應(yīng)等。.18lT細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)l形態(tài)學(xué)法:形態(tài)學(xué)法: T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率細(xì)胞轉(zhuǎn)化率60.1%7.6%l3H-TdR摻入法:摻入法:培養(yǎng)淋巴細(xì)胞用液體閃樂(lè)培養(yǎng)淋巴細(xì)胞用液體閃樂(lè)爍儀測(cè)量,記錄每分鐘脈沖數(shù)(爍儀測(cè)量,記錄每分鐘脈沖數(shù)(cpm)。)。lSI(刺激指數(shù))(刺激指數(shù))=PHA刺激管刺激管cpm均值均值/對(duì)照管對(duì)照
15、管cpm均值均值lSI2為有意義,為有意義,2為淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低。為淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低。.19l臨床意義臨床意義l判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能水平,降低判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能水平,降低常見(jiàn)常見(jiàn)于細(xì)胞免疫缺陷或細(xì)胞免疫功能低下者,于細(xì)胞免疫缺陷或細(xì)胞免疫功能低下者,如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥結(jié)核、肝硬如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥結(jié)核、肝硬化等。化等。增高增高常見(jiàn)于常見(jiàn)于Down綜合征。綜合征。l估計(jì)疾病的療效與預(yù)后估計(jì)疾病的療效與預(yù)后.20l表面抗原:表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和和CD40等等l表面受體:表面受體:B細(xì)胞抗原受體(細(xì)胞抗原受體(BCR)、細(xì)胞因)、細(xì)胞因子受體(子受體(C
16、KR)、補(bǔ)體受體()、補(bǔ)體受體(CR)與)與Fc受體受體等。等。lB細(xì)胞表面免疫球蛋白(細(xì)胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是)是B細(xì)細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志。將熒光標(biāo)記的抗不同類胞的特征性表面標(biāo)志。將熒光標(biāo)記的抗不同類型型Ig的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè),可將的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè),可將B細(xì)胞分為細(xì)胞分為SmIgG、SmIgM、 SmIgA、 SmIgD、 SmIgE。.21l參考值:參考值:免疫熒光法(羊抗人)(以攜帶該標(biāo)免疫熒光法(羊抗人)(以攜帶該標(biāo)志的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)表示)志的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)表示)lSmIg+細(xì)胞總數(shù):均值細(xì)胞總數(shù):均值21%(16%28%)lSmIgG+ 細(xì)胞:均值細(xì)胞:均值7.1%(4
17、%13%)lSmIgM+細(xì)胞:均值細(xì)胞:均值8.9%(7%13%)lSmIgA+細(xì)胞:細(xì)胞: 均值均值2.2%(1%4%)lSmIgD+細(xì)胞:細(xì)胞: 均值均值6.2%(5%8%)lSmIgE+細(xì)胞:細(xì)胞: 均值均值0.9%(0%1.5%).22l臨床意義臨床意義lSmIg+細(xì)胞增高細(xì)胞增高 :常與常與B細(xì)胞惡性增殖有細(xì)胞惡性增殖有關(guān),主要見(jiàn)于慢淋、毛細(xì)胞白血病以及關(guān),主要見(jiàn)于慢淋、毛細(xì)胞白血病以及巨球蛋白血癥等。巨球蛋白血癥等。lSmIg+細(xì)胞減低:細(xì)胞減低:主要與體液免疫缺陷有主要與體液免疫缺陷有關(guān),常見(jiàn)于性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥、嚴(yán)關(guān),常見(jiàn)于性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病等。重聯(lián)合免
18、疫缺陷病等。.23lB細(xì)胞分化抗原細(xì)胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22測(cè)定測(cè)定l參考值:參考值:FACS:CD19+細(xì)胞細(xì)胞 11.74%3.73%l臨床意義臨床意義 CD19為全部為全部B細(xì)胞共有的表面細(xì)胞共有的表面標(biāo)志,標(biāo)志,增高增高見(jiàn)于見(jiàn)于B細(xì)胞系統(tǒng)的惡性種瘤,細(xì)胞系統(tǒng)的惡性種瘤,減低減低見(jiàn)于體液免疫缺陷病。見(jiàn)于體液免疫缺陷病。.24lNK細(xì)胞細(xì)胞能直接殺傷效應(yīng)細(xì)胞,具有抗腫瘤、能直接殺傷效應(yīng)細(xì)胞,具有抗腫瘤、抗感染和和免疫調(diào)節(jié)等功能,亦參與移植物排抗感染和和免疫調(diào)節(jié)等功能,亦參與移植物排斥反應(yīng)、自身免疫病和超敏反應(yīng)的發(fā)生。斥反應(yīng)、自身免疫病和超敏反應(yīng)的發(fā)生。lLDH釋放法
19、釋放法 l參考值參考值 細(xì)胞毒指數(shù):細(xì)胞毒指數(shù):27.5%52.5%l51Cr釋放法釋放法l參考值參考值 NK細(xì)胞活性(自然殺傷率):細(xì)胞活性(自然殺傷率):47.6%76.8%.25l臨床意義臨床意義l活性升高活性升高 常見(jiàn)于病毒感染的早期,常見(jiàn)于病毒感染的早期,Down綜合征,接綜合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強(qiáng)劑治療患受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強(qiáng)劑治療患者。者。l活性降低活性降低 常見(jiàn)于惡性腫瘤、重癥聯(lián)合免疫缺陷病,常見(jiàn)于惡性腫瘤、重癥聯(lián)合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制劑治療者等。和免疫抑制劑治療者等。l腫瘤療效觀察及預(yù)后評(píng)價(jià)腫瘤療效觀察及預(yù)后評(píng)價(jià)l免疫調(diào)節(jié)功能免
20、疫調(diào)節(jié)功能 NK細(xì)胞可釋放細(xì)胞可釋放INF-、INF-和和GM-CSF等細(xì)胞因子。等細(xì)胞因子。 病毒性肝炎的實(shí)驗(yàn)診斷病毒性肝炎的實(shí)驗(yàn)診斷 我國(guó)屬病毒性肝炎高發(fā)區(qū),全國(guó)有肝炎病人我國(guó)屬病毒性肝炎高發(fā)區(qū),全國(guó)有肝炎病人2700萬(wàn)萬(wàn)人,每年新發(fā)病例人,每年新發(fā)病例900萬(wàn)人,萬(wàn)人,HBsAg攜帶者達(dá)一億二千攜帶者達(dá)一億二千萬(wàn)人。慢性肝炎中有萬(wàn)人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒復(fù)制,有活性性病毒復(fù)制,30發(fā)展為肝硬化,發(fā)展為肝硬化,510發(fā)展為肝癌,故我國(guó)又是原發(fā)展為肝癌,故我國(guó)又是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的高發(fā)國(guó)家,慢性發(fā)性肝細(xì)胞癌的高發(fā)國(guó)家,慢性HBV攜帶者患肝癌危攜帶者患肝癌危險(xiǎn)性較非攜帶者高險(xiǎn)性較非攜
21、帶者高100倍。倍。 HBV的形態(tài)結(jié)構(gòu)的形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài):形態(tài): 球形顆粒,直徑約球形顆粒,直徑約42nm外膜:外膜: 厚約厚約7nm,HBsAg+脂類脂類內(nèi)核(核衣殼):內(nèi)核(核衣殼): 直徑直徑27nm,HBcAg、DNAP、 病毒病毒DNA、少量來(lái)源于宿主的磷酸激酶、少量來(lái)源于宿主的磷酸激酶 HBV在血清中的存在形式在血清中的存在形式完整的病毒顆粒完整的病毒顆粒(Dane顆粒顆粒),如前述,能復(fù)制,有傳染,如前述,能復(fù)制,有傳染 性;性; 乙肝表面抗原顆粒,為乙肝表面抗原顆粒,為22 nm的小球型顆粒,由的小球型顆粒,由HBsAg和脂類組成,不含和脂類組成,不含DNA,不能復(fù)制,不能復(fù)制,不
22、具有傳染性不具有傳染性*,數(shù),數(shù)量最多;量最多; 管型顆粒,長(zhǎng)管型顆粒,長(zhǎng)30-40 nm的,由的,由HBsAg和脂類組成,和脂類組成,不含不含DNA,不能復(fù)制,不能復(fù)制,不具有傳染性不具有傳染性*,血清中數(shù)量最少。,血清中數(shù)量最少。 HBV的基因結(jié)構(gòu)的基因結(jié)構(gòu) HBV基因組由一個(gè)雙鏈缺口環(huán)型基因組由一個(gè)雙鏈缺口環(huán)型DNA組成,約組成,約有有3,200個(gè)核苷酸,含有個(gè)核苷酸,含有4個(gè)開(kāi)放讀碼框個(gè)開(kāi)放讀碼框(ORF),分別為分別為ORF S/PreS、ORF C 、 ORF P、和、和ORF X, 分別編碼外膜蛋白分別編碼外膜蛋白(根據(jù)起始位點(diǎn)不同分別為根據(jù)起始位點(diǎn)不同分別為HBsAg、前、前S
23、1、前、前S2)、核殼蛋白、核殼蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和聚合酶和X蛋白蛋白(X抗原,抗原,HBxAg)。 基因型基因型1979年年 第一個(gè)第一個(gè)HBV DNA全序列全序列1988年年 日本學(xué)者將日本學(xué)者將HBV分為分為A、B、C、D四個(gè)基因型。四個(gè)基因型。 (Okamoto H, et al. J Gen Virol, 1988;69:2575)1992年年 增加增加E、F兩型兩型 (Norder H, et al. Virol,1992;73:3141)臨床意義臨床意義 不同的基因型可能致病性不同,我國(guó)以不同的基因型可能致病性不同,我國(guó)以B、C型為主,型為主,臺(tái)灣發(fā)現(xiàn):
24、臺(tái)灣發(fā)現(xiàn):50歲以上的肝硬化和肝細(xì)胞癌的患者歲以上的肝硬化和肝細(xì)胞癌的患者C型較多,型較多,而而50歲以下的肝細(xì)胞癌患者歲以下的肝細(xì)胞癌患者B型較多型較多(Kao JH, et al. Gastroenterology, 2000;118:554)。 目前實(shí)驗(yàn)室常用的至少有四對(duì)抗原抗體系統(tǒng):目前實(shí)驗(yàn)室常用的至少有四對(duì)抗原抗體系統(tǒng): HBsAg和抗和抗HBs HBcAg和抗和抗HBc HBeAg和抗和抗HBe Pre-S2和抗和抗Pre-S2。 HBsAg陽(yáng)性的意義陽(yáng)性的意義 (1)HBV感染的潛伏期;感染的潛伏期;(2)乙型肝炎急性期;)乙型肝炎急性期;(3)慢性或遷延性乙型肝炎活動(dòng)期;)慢性
25、或遷延性乙型肝炎活動(dòng)期;(4)肝炎后肝硬化或原發(fā)性肝癌;)肝炎后肝硬化或原發(fā)性肝癌;(5)無(wú)癥狀)無(wú)癥狀HBsAg長(zhǎng)期攜帶者。長(zhǎng)期攜帶者。 (6) HbsAg陰性不能完全排除慢性乙型肝炎。陰性不能完全排除慢性乙型肝炎。 注意注意!一、血清分離不佳或用肝素抗凝血常導(dǎo)致一、血清分離不佳或用肝素抗凝血常導(dǎo)致HBsAg假陽(yáng)性假陽(yáng)性 ;二、二、 HBsAg假陰性假陰性 常見(jiàn)的原因?yàn)椋撼R?jiàn)的原因?yàn)椋?5%的急性感染者肝炎的急性感染者肝炎癥狀出現(xiàn)后仍陰性,極少數(shù)的慢性感染者也為癥狀出現(xiàn)后仍陰性,極少數(shù)的慢性感染者也為HBsAg陰性,這陰性,這種情況需要檢測(cè)抗種情況需要檢測(cè)抗HBc-IgM及及HBV DNA;
26、 S基因突變導(dǎo)致基因突變導(dǎo)致HBsAg的氨基酸結(jié)構(gòu)改變,由于多數(shù)商用試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)采用的氨基酸結(jié)構(gòu)改變,由于多數(shù)商用試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)采用的為多克隆抗體檢測(cè)的為多克隆抗體檢測(cè)HBsAg的的a決定簇,這一區(qū)域的點(diǎn)突變即決定簇,這一區(qū)域的點(diǎn)突變即可導(dǎo)致臨界測(cè)定值或陰性結(jié)果;可導(dǎo)致臨界測(cè)定值或陰性結(jié)果;由于慢性病毒攜帶者(低水由于慢性病毒攜帶者(低水平平HBsAg攜帶者)或攜帶者)或HBV感染潛伏期,感染潛伏期, HBsAg濃度低于檢測(cè)濃度低于檢測(cè)水平的下限。水平的下限。 血清抗血清抗HBs檢測(cè)的意義檢測(cè)的意義(1)在乙型肝炎感染率調(diào)查時(shí))在乙型肝炎感染率調(diào)查時(shí), HBsAg、抗、抗-HBs和抗和抗-H
27、Bc均為感染率的指標(biāo)。在這三項(xiàng)指標(biāo)中均為感染率的指標(biāo)。在這三項(xiàng)指標(biāo)中, 只要其中一項(xiàng)陽(yáng)性只要其中一項(xiàng)陽(yáng)性, 表示受過(guò)表示受過(guò)HBV感染。感染。 (2)抗)抗HBs是對(duì)是對(duì)HBV免疫的指標(biāo)免疫的指標(biāo), 抗抗HBs陽(yáng)性率和滴陽(yáng)性率和滴度表示人群的免疫狀況。度表示人群的免疫狀況。 (3) 乙型肝炎的診斷和鑒別診斷乙型肝炎的診斷和鑒別診斷, 在在HBV感染后感染后3個(gè)月個(gè)月, 血清中出現(xiàn)抗血清中出現(xiàn)抗HBs。采集雙份血清(急性期和恢復(fù)期)。采集雙份血清(急性期和恢復(fù)期)同時(shí)檢測(cè)同時(shí)檢測(cè), 抗抗HBs陽(yáng)轉(zhuǎn),或恢復(fù)期與急性期比較陽(yáng)轉(zhuǎn),或恢復(fù)期與急性期比較, 抗體滴抗體滴度有度有4倍或倍或4倍以上增長(zhǎng)倍以上
28、增長(zhǎng), 表示這次感染為表示這次感染為HBV感染。感染。 (4)乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后)乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后, 采采集血清檢測(cè)抗集血清檢測(cè)抗HBs, 如抗如抗HBs陽(yáng)轉(zhuǎn)或抗體滴度明顯提高陽(yáng)轉(zhuǎn)或抗體滴度明顯提高, 表示疫苗免疫效果良好。否則免疫效果不佳。表示疫苗免疫效果良好。否則免疫效果不佳。 (5)對(duì)乙型肝炎預(yù)后的判斷。抗)對(duì)乙型肝炎預(yù)后的判斷??笻Bs的出現(xiàn)表示疾病的出現(xiàn)表示疾病處于恢復(fù)期,預(yù)后較佳。處于恢復(fù)期,預(yù)后較佳。同時(shí)可檢出抗同時(shí)可檢出抗HBs及及HBsAg見(jiàn)于以下幾種情形:見(jiàn)于以下幾種情形:急性急性HBV感染時(shí)一過(guò)性存在,兩者濃度均很低(以感染時(shí)
29、一過(guò)性存在,兩者濃度均很低(以免疫復(fù)合物的形式出現(xiàn)),以后再采血檢測(cè)僅有抗免疫復(fù)合物的形式出現(xiàn)),以后再采血檢測(cè)僅有抗HBs;前后或同時(shí)感染兩種亞型前后或同時(shí)感染兩種亞型HBV,HBsAg短暫或持續(xù)短暫或持續(xù)存在反映其中一種亞型感染,抗存在反映其中一種亞型感染,抗HBs及及HBsAg同時(shí)同時(shí)檢出通常要持續(xù)很久,且濃度均很高;檢出通常要持續(xù)很久,且濃度均很高;抗抗HBs假陽(yáng)性;假陽(yáng)性;1. 編碼編碼HBsAg的基因變異使得的基因變異使得HBsAg抗原性改變,抗原性改變,原型抗原型抗HBs不能將其清除。不能將其清除。注意注意!A、臨界陽(yáng)性一般是假陽(yáng)性,是由于臨界陽(yáng)性一般是假陽(yáng)性,是由于IgM型引起
30、的交叉反應(yīng)。型引起的交叉反應(yīng)。B、 抗抗HBc陰性而陰性而HBsAg陽(yáng)性一般發(fā)生在免疫缺陷病例,這時(shí)存陽(yáng)性一般發(fā)生在免疫缺陷病例,這時(shí)存 HBV復(fù)制的其他標(biāo)志如復(fù)制的其他標(biāo)志如 HBeAg及高滴度的及高滴度的HBV DNA。C、 對(duì)抗對(duì)抗HBc單獨(dú)陽(yáng)性,排除假陽(yáng)性后,美國(guó)單獨(dú)陽(yáng)性,排除假陽(yáng)性后,美國(guó)CDC有以下解釋:有以下解釋: 急性感染后的恢復(fù)早期(窗期)急性感染后的恢復(fù)早期(窗期) 在在HBV急性感染消退時(shí),急性感染消退時(shí), HBsAg減少甚至消失,抗減少甚至消失,抗HBs尚未出現(xiàn),抗尚未出現(xiàn),抗HBc是唯一能檢出是唯一能檢出 的特異性指標(biāo),此時(shí)抗的特異性指標(biāo),此時(shí)抗HBc IgM也為陽(yáng)性
31、。也為陽(yáng)性。 被動(dòng)轉(zhuǎn)移:被動(dòng)轉(zhuǎn)移:HBsAg攜帶者母親所生的嬰兒可因母體抗體被攜帶者母親所生的嬰兒可因母體抗體被 動(dòng)轉(zhuǎn)移(抗動(dòng)轉(zhuǎn)移(抗HBc可通過(guò)胎盤)而呈現(xiàn)抗可通過(guò)胎盤)而呈現(xiàn)抗HBc單獨(dú)陽(yáng)性。單獨(dú)陽(yáng)性。 遠(yuǎn)期感染伴抗遠(yuǎn)期感染伴抗 HBs消失,這種情況通常在感染后多年才會(huì)消失,這種情況通常在感染后多年才會(huì) 發(fā)生,且相當(dāng)少見(jiàn)(發(fā)生,且相當(dāng)少見(jiàn)(0.5%)。)。 遠(yuǎn)期感染伴有低水平遠(yuǎn)期感染伴有低水平HBsAg。 HDV重復(fù)感染繼發(fā)重復(fù)感染繼發(fā)HBsAg產(chǎn)生下降產(chǎn)生下降抗抗HBc始終不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)者占一定比例,可能始終不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)者占一定比例,可能系系1. 與抗原復(fù)合與抗原復(fù)合2. 種族差異
32、種族差異3. 免疫缺陷,如化療后免疫缺陷,如化療后4. 基因變異基因變異 HBeAg: A. 傳染性:傳染性:HBeAg是臨床上表示病毒復(fù)制較為實(shí)用的指標(biāo),因是臨床上表示病毒復(fù)制較為實(shí)用的指標(biāo),因此也反映了血清的感染性。慢性此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg攜帶者中,攜帶者中,HBeAg及及HBV-DNA檢測(cè)可以用來(lái)評(píng)估其傳染危險(xiǎn)性,特別是對(duì)醫(yī)務(wù)界的檢測(cè)可以用來(lái)評(píng)估其傳染危險(xiǎn)性,特別是對(duì)醫(yī)務(wù)界的HBsAg攜攜帶者,非常有必要了解他是否會(huì)傳染給他的病人,帶者,非常有必要了解他是否會(huì)傳染給他的病人,90% HBeAg陽(yáng)性陽(yáng)性HBsAg攜帶者可以傳染給她們的新生兒,而攜帶者可以傳染給她們的新生兒
33、,而HBeAg陰性或抗陰性或抗HBe陽(yáng)陽(yáng)性的孕婦中只有性的孕婦中只有10%會(huì)傳染給嬰兒。會(huì)傳染給嬰兒。 B. 預(yù)后:急性期預(yù)后:急性期HBeAg的消失通常伴隨的消失通常伴隨ALT的降低,預(yù)示著疾的降低,預(yù)示著疾病的好轉(zhuǎn);病的好轉(zhuǎn);HBeAg持續(xù)陽(yáng)性超過(guò)持續(xù)陽(yáng)性超過(guò)12個(gè)星期提示個(gè)星期提示HBV感染趨向慢性;感染趨向慢性;HBeAg陽(yáng)性的無(wú)癥狀者很少見(jiàn);如果在慢性感染期陽(yáng)性的無(wú)癥狀者很少見(jiàn);如果在慢性感染期HBeAg陽(yáng)性,一陽(yáng)性,一般為慢性急性化或病人免疫缺陷,這種情況的病人如果又出現(xiàn)般為慢性急性化或病人免疫缺陷,這種情況的病人如果又出現(xiàn)HBeAg的消失,則被認(rèn)為是預(yù)后好的信號(hào)。的消失,則被認(rèn)為
34、是預(yù)后好的信號(hào)。注意注意! 前前C區(qū)基因變異(如區(qū)基因變異(如1896位位gua變?yōu)樽優(yōu)?arg導(dǎo)致終止密碼導(dǎo)致終止密碼子的出現(xiàn)干擾了子的出現(xiàn)干擾了HBeAg的翻譯)導(dǎo)致不能生成和分泌的翻譯)導(dǎo)致不能生成和分泌HBeAg,血清中血清中HBeAg陰性,但這種突變并不影響乙肝病毒的復(fù)制,陰性,但這種突變并不影響乙肝病毒的復(fù)制,仍可形成完整的病毒顆粒,該種情況下盡管檢測(cè)不到仍可形成完整的病毒顆粒,該種情況下盡管檢測(cè)不到HBeAg,慢性慢性HBV感染炎癥反應(yīng)也相當(dāng)強(qiáng)。感染炎癥反應(yīng)也相當(dāng)強(qiáng)??箍?HBe: A、反映血清感染性:通常情況下反映血清感染性:通常情況下HBsAg(+)、抗)、抗HBe(+)病例
35、的傳染性較低,但有部分病例盡管抗病例的傳染性較低,但有部分病例盡管抗HBe(+)也具有很高的傳)也具有很高的傳染性,因此,要評(píng)價(jià)染性,因此,要評(píng)價(jià)HBeAg陰性血清的傳染性,推薦用檢測(cè)陰性血清的傳染性,推薦用檢測(cè)HBV DNA,1/3的病例能達(dá)到大于的病例能達(dá)到大于106基因組基因組/mL; B、監(jiān)視急性和慢性、監(jiān)視急性和慢性HBV感染:血清感染:血清HBeAg消失、抗消失、抗HBe出現(xiàn)出現(xiàn)對(duì)監(jiān)視急慢性對(duì)監(jiān)視急慢性HBV感染很有診斷價(jià)值,特別是抗感染很有診斷價(jià)值,特別是抗HBe出現(xiàn)更有預(yù)見(jiàn)出現(xiàn)更有預(yù)見(jiàn)價(jià)值,在干擾素治療中出現(xiàn)表明疾病狀況的改善;價(jià)值,在干擾素治療中出現(xiàn)表明疾病狀況的改善; C、
36、預(yù)后:抗、預(yù)后:抗 HBe陽(yáng)轉(zhuǎn)出現(xiàn)在陽(yáng)轉(zhuǎn)出現(xiàn)在HBeAg陰轉(zhuǎn)后早期(陰轉(zhuǎn)后早期(2周內(nèi)),周內(nèi)),可能預(yù)示急性肝炎恢復(fù)順利;如出現(xiàn)在晚期(可能預(yù)示急性肝炎恢復(fù)順利;如出現(xiàn)在晚期(HBeAg陰轉(zhuǎn)后陰轉(zhuǎn)后6周以上)周以上)或不出現(xiàn)抗或不出現(xiàn)抗HBe,則提示病程遷延,可能發(fā)展為慢性遷延性肝炎或慢,則提示病程遷延,可能發(fā)展為慢性遷延性肝炎或慢性活動(dòng)性肝炎。性活動(dòng)性肝炎。注意注意! HBeAg(-)/抗抗HBe(-)的慢性)的慢性HBV感染有不同的感染有不同的感染狀態(tài):有的表示復(fù)制病毒已清除,但無(wú)抗感染狀態(tài):有的表示復(fù)制病毒已清除,但無(wú)抗HBe應(yīng)答;應(yīng)答;有的復(fù)制病毒一時(shí)減少,有的復(fù)制病毒一時(shí)減少,HB
37、eAg消失后可再現(xiàn);有的消失后可再現(xiàn);有的由于前由于前C區(qū)變異不能編碼合成區(qū)變異不能編碼合成HBeAg。前前S2抗原及抗體抗原及抗體 pre-S2抗原檢測(cè)可作為判斷抗原檢測(cè)可作為判斷HBV復(fù)制的一項(xiàng)指復(fù)制的一項(xiàng)指標(biāo),同時(shí)可對(duì)標(biāo),同時(shí)可對(duì)HBV復(fù)制作出定量的推斷,動(dòng)態(tài)測(cè)定復(fù)制作出定量的推斷,動(dòng)態(tài)測(cè)定pre-S2抗原的變化,有助于急、慢性乙型肝炎的治抗原的變化,有助于急、慢性乙型肝炎的治療預(yù)后的判斷。療預(yù)后的判斷。 抗抗pre-S2在急性乙型肝炎恢復(fù)早期出現(xiàn),并發(fā)在急性乙型肝炎恢復(fù)早期出現(xiàn),并發(fā)揮其保護(hù)性抗體的作用,對(duì)觀察乙型肝炎病情進(jìn)展、揮其保護(hù)性抗體的作用,對(duì)觀察乙型肝炎病情進(jìn)展、預(yù)后及疫苗免
38、疫效果均有一定的作用。預(yù)后及疫苗免疫效果均有一定的作用。常規(guī)檢測(cè)常規(guī)檢測(cè)HBV抗原抗體的基本解釋抗原抗體的基本解釋HBsAg 急慢性急慢性HBV感染;可能具有傳染性;濃度降低表明感染;可能具有傳染性;濃度降低表明感感 染恢復(fù)染恢復(fù)HBeAg 反映反映HBV復(fù)制;有傳染性;其消失表明急慢性復(fù)制;有傳染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢復(fù)感染正在恢復(fù)抗抗-HBs 感染后免疫;對(duì)疫苗的免疫應(yīng)答感染后免疫;對(duì)疫苗的免疫應(yīng)答抗抗-HBe 表示表示HBV低復(fù)制或不復(fù)制低復(fù)制或不復(fù)制抗抗-HBc 低滴度表示過(guò)去感染,高滴度表示現(xiàn)行感染低滴度表示過(guò)去感染,高滴度表示現(xiàn)行感染1.抗抗HBc-IgM 高滴度是診
39、斷急性高滴度是診斷急性HBV感染最好的指標(biāo),監(jiān)視感染最好的指標(biāo),監(jiān)視慢性慢性HBV感染。感染。 不同廠家和方法不同廠家和方法HBV標(biāo)志物測(cè)定的比較標(biāo)志物測(cè)定的比較 HBsAg 抗抗-HBsHBeAg 抗抗-HBe抗抗-HBc 進(jìn)口進(jìn)口 34 9 22 27 42 A 34 9 12 18 37 B 34 8 13 14 37 C 32 8 33 15 37 n=44 PCR: +26 -18 前前S1: +20 -24 抗前抗前S1: +12 -32 國(guó)產(chǎn)國(guó)產(chǎn)“兩對(duì)半兩對(duì)半”試劑與進(jìn)口試劑比較(陽(yáng)性符合率試劑與進(jìn)口試劑比較(陽(yáng)性符合率%) A B C HBsAg 100(34/34) 100(
40、34/34) 94.1(32/34)抗抗-HBs 100(9/9) 88.9(8/9) 88.9(8/9)HBeAg 54.5(12/22) 59.1(13/22) (33/22)抗抗-HBe 66.7(18/27) 51.9(14/27) 55.6(15/27)抗抗-HBc 88.1(37/42) 88.1(37/42) 88.1(37/42).47lHBeAgHBeAg,Anti-HBeAnti-HBe或抗或抗HbeHbelHBeAgHBeAg,Anti-HBcAnti-HBc或抗或抗HbcHbc 測(cè)定方法:測(cè)定方法:ELASAELASA,RIARIAHBsAgHBsAg,Anti-HBs
41、Anti-HBs或抗或抗HBsHBs.48lHBsAg(+)表示肝中有表示肝中有HBV見(jiàn)于:見(jiàn)于:乙型肝炎潛伏期和急性期。乙型肝炎潛伏期和急性期。 慢性遷延性肝炎,慢性活動(dòng)性肝炎,肝硬化,慢性遷延性肝炎,慢性活動(dòng)性肝炎,肝硬化,肝癌。肝癌。 慢性慢性HBsAg攜帶者。攜帶者。 Anti-HBs或抗或抗HBs:中和抗體中和抗體.49lHBeAg:有乙型肝炎,是病毒復(fù)制活躍,有乙型肝炎,是病毒復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng)的指標(biāo);持續(xù)陽(yáng)性易轉(zhuǎn)變?yōu)槁齻魅拘詮?qiáng)的指標(biāo);持續(xù)陽(yáng)性易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?;性肝炎?HBeAg+和和 HBsAg+可垂直傳可垂直傳播。播。lAnti-HBe或抗或抗Hbe:出現(xiàn)于急性感染的出現(xiàn)于急
42、性感染的恢復(fù)期,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。意味著恢復(fù)期,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。意味著HBV部部分被清除或抑制,復(fù)制減少,傳染性降分被清除或抑制,復(fù)制減少,傳染性降低。低。.50lAnti-HBc或抗或抗HBc:反映肝細(xì)胞受到反映肝細(xì)胞受到HBVHBV侵害侵害的一種指標(biāo),主要包括的一種指標(biāo),主要包括IgMIgM、IgGIgG、IgAIgA。l抗抗HBc IgMHBc IgM陽(yáng)性陽(yáng)性是最早出現(xiàn)的特異性抗體,是是最早出現(xiàn)的特異性抗體,是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標(biāo),診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標(biāo),并提示病人的血液有強(qiáng)傳染性。也見(jiàn)于慢性活并提示病人的血液有強(qiáng)傳染性。也見(jiàn)于慢性活動(dòng)性肝炎。動(dòng)性肝炎。l
43、抗抗HBc IgG HBc IgG 其陽(yáng)性滴度高,表明患有乙型肝炎,其陽(yáng)性滴度高,表明患有乙型肝炎,指正在感染;低滴度為既往感染指標(biāo),體內(nèi)時(shí)指正在感染;低滴度為既往感染指標(biāo),體內(nèi)時(shí)間長(zhǎng)。間長(zhǎng)。.51lHBV-DNA定性和定量測(cè)定:定性和定量測(cè)定:目前定量測(cè)目前定量測(cè)定范圍為定范圍為102 108 拷貝拷貝/ml。l與血清免疫學(xué)結(jié)果的綜合評(píng)價(jià)與血清免疫學(xué)結(jié)果的綜合評(píng)價(jià)HBsAg和和Anti-HBsHBeAg,Anti-HBe ,Anti-HBc5項(xiàng)標(biāo)志物的變化和聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義項(xiàng)標(biāo)志物的變化和聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義.52l抗抗-HCV(ELISA)l抗抗-HCV IgM陽(yáng)性陽(yáng)性 常見(jiàn)于急性常見(jiàn)于急
44、性HCV感染,是診斷丙感染,是診斷丙肝的早期敏感指標(biāo);是肝的早期敏感指標(biāo);是HCV活動(dòng)的指標(biāo),是判斷活動(dòng)的指標(biāo),是判斷HCV傳染性的指標(biāo)。傳染性的指標(biāo)。 l抗抗-HCV IgGlHCV-RNA測(cè)定測(cè)定l測(cè)定方法測(cè)定方法 逆轉(zhuǎn)錄巢式逆轉(zhuǎn)錄巢式PCR法,熒光定量法,熒光定量PCR法法l(第三代試劑抗原包括(第三代試劑抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易發(fā)生變;丙肝病毒易發(fā)生變異,異,抗抗-HCV陽(yáng)轉(zhuǎn)時(shí)間差異較大)陽(yáng)轉(zhuǎn)時(shí)間差異較大).53l參考值:參考值: 乳膠凝集法乳膠凝集法(LAT):):500U l意義:增高意義:增高 常見(jiàn)于常見(jiàn)于A組溶血鏈球菌感染相關(guān)疾組溶血鏈球菌感染相關(guān)疾病,如
45、扁桃腺炎、感染性心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕熱、病,如扁桃腺炎、感染性心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕熱、鏈球菌感染后腎小球腎炎等。鏈球菌感染后腎小球腎炎等。lASO 在在A組溶血鏈球菌感染后組溶血鏈球菌感染后1周開(kāi)始升高,周開(kāi)始升高,46周達(dá)高峰,可持續(xù)幾個(gè)月或幾年。周達(dá)高峰,可持續(xù)幾個(gè)月或幾年。l假陽(yáng)性與假陰性假陽(yáng)性與假陰性.54l肥達(dá)(肥達(dá)(Widal)反應(yīng))反應(yīng)l參考值參考值lO凝集價(jià)凝集價(jià)1:80l傷寒傷寒H凝集價(jià)凝集價(jià)1:160l副傷寒副傷寒A、B、C凝集價(jià)凝集價(jià)1:80l傷寒、副傷寒沙門菌抗體傷寒、副傷寒沙門菌抗體IgM測(cè)定測(cè)定l參考值參考值 ELASA法:法:陰性或滴度陰性或滴度1:20。.55l臨床意義臨床
46、意義lO升高,升高,H正常正常lH正常,正常,O升高升高lO升高,升高,H升高升高lO升高,升高,A、B、C任何一項(xiàng)升高任何一項(xiàng)升高.56lC-反應(yīng)蛋白反應(yīng)蛋白是一種由肝臟合成的,能與肺炎雙球菌是一種由肝臟合成的,能與肺炎雙球菌C多糖體起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,具有激活補(bǔ)體,多糖體起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,具有激活補(bǔ)體,促進(jìn)吞噬和免疫調(diào)理作用。促進(jìn)吞噬和免疫調(diào)理作用。l參考值:參考值:8.2mg/L(免疫比濁法)(免疫比濁法)l意義意義 組織損傷組織損傷,如大手術(shù),嚴(yán)重創(chuàng)傷,燒傷,心肌梗,如大手術(shù),嚴(yán)重創(chuàng)傷,燒傷,心肌梗死等,發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下死等,發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,
47、病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降。又復(fù)升高提示繼發(fā)感染或深部靜脈血栓形成。降。又復(fù)升高提示繼發(fā)感染或深部靜脈血栓形成。l風(fēng)濕熱活動(dòng)期,可達(dá)風(fēng)濕熱活動(dòng)期,可達(dá)200mg/L以上。以上。l細(xì)菌性感染常明顯升高,病毒性感染升高不明顯或輕細(xì)菌性感染常明顯升高,病毒性感染升高不明顯或輕度升高。度升高。l惡性腫瘤,器官移植后排斥反應(yīng),妊娠等可見(jiàn)明顯升惡性腫瘤,器官移植后排斥反應(yīng),妊娠等可見(jiàn)明顯升高可在發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下高可在發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降至正常。降至正常。.57l參考值參考值lIFA,ELASA:陰性:陰性l特異性特異性IgM-感染后感染后23天檢出,天檢出,710天
48、達(dá)天達(dá)高峰。特異性高峰。特異性IgG感染后兩周出現(xiàn),可持感染后兩周出現(xiàn),可持續(xù)多年。續(xù)多年。.58l檢測(cè)抗檢測(cè)抗HIV(I型或型或II型)型)是是AIDS診斷的一個(gè)主要指標(biāo)。診斷的一個(gè)主要指標(biāo)??乖瓰榭乖瓰镠IV感染的感染的T細(xì)胞株的病毒抗原(細(xì)胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原抗原污染可出現(xiàn)假陽(yáng)性)污染可出現(xiàn)假陽(yáng)性) 。l方法:方法:初篩試驗(yàn)初篩試驗(yàn)ELASA ,乳膠凝集法,免疫印跡法,乳膠凝集法,免疫印跡法,斑點(diǎn)免疫滲透法。斑點(diǎn)免疫滲透法。 確認(rèn)試驗(yàn)確認(rèn)試驗(yàn) 可選用蛋白印跡試驗(yàn)(可選用蛋白印跡試驗(yàn)(WB),), PCR法檢查法檢查HIV病毒病毒DNA。lHIV抗原檢測(cè)抗原檢測(cè) P24抗原(抗
49、原(病毒衣殼蛋白,具群特異病毒衣殼蛋白,具群特異性性)。)。 HIV核酸檢測(cè)核酸檢測(cè) DNA-PCR;RNA-PCR.59l是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性傳播疾病。傳播疾病。l梅毒螺旋體抗體檢測(cè):非密螺旋體抗原梅毒螺旋體抗體檢測(cè):非密螺旋體抗原試驗(yàn)和密螺旋體抗原試驗(yàn),前者為篩選試驗(yàn)和密螺旋體抗原試驗(yàn),前者為篩選試驗(yàn)和治療效果監(jiān)測(cè),后者為確診診斷。試驗(yàn)和治療效果監(jiān)測(cè),后者為確診診斷。l暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查l梅毒螺旋體梅毒螺旋體PCR檢測(cè)檢測(cè).60l參考值參考值 CLIA,RIA,ELASA:血清:血清25g/Ll臨床意義臨床意義l原發(fā)性肝癌明顯升
50、高,原發(fā)性肝癌明顯升高,AFP300 g/Ll病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但升高但常常 300 g/L。l生殖腺胚胎性腫瘤血清生殖腺胚胎性腫瘤血清AFP升高升高l妊娠小扁豆凝集素(妊娠小扁豆凝集素(LCA)結(jié)合型)結(jié)合型AFP25%提示原發(fā)性肝癌。提示原發(fā)性肝癌。.61l自身免疫性疾病自身免疫性疾?。ˋID)lAID-器官特異性和非器官特異性(抗原為細(xì)胞器官特異性和非器官特異性(抗原為細(xì)胞核或胞漿成分)及中間型。核或胞漿成分)及中間型。l抗核抗體(抗核抗體(ANA):):是以細(xì)胞的核成分為靶抗是以細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有
51、四原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有四種熒光圖譜:均質(zhì)型(抗種熒光圖譜:均質(zhì)型(抗dsDNA抗體和抗組蛋抗體和抗組蛋白抗體);周邊型(抗白抗體);周邊型(抗dsDNA抗體);斑點(diǎn)型抗體);斑點(diǎn)型或顆粒型(抗或顆粒型(抗U1-RNP、抗、抗Sm、抗、抗Scl-70、抗、抗SS-B/La、抗、抗SS-A/Ro等);核仁型(核糖體、等);核仁型(核糖體、U3-RNP、RNA聚合酶)。聚合酶)。.62l抗核抗體(抗核抗體(ANA)檢查:)檢查:抗各種細(xì)胞核成分抗各種細(xì)胞核成分(脫氧核糖核蛋白(脫氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核、可提取的核抗原抗原-ENA和和RNA等)。等)。l參考值:參考
52、值:IFA法陰性,血清滴度法陰性,血清滴度1:40為陽(yáng)性為陽(yáng)性l見(jiàn)于見(jiàn)于SLE(80%100%)、)、MCTD(100%)、)、原發(fā)性膽汁性肝硬化原發(fā)性膽汁性肝硬化95%100%)、)、DM (30%50%)、)、RA等。等。.63l抗抗DNA抗體分為:抗體分為:抗抗ds-DNA、抗、抗ss-DNA、抗、抗z-DNA 抗抗z-DNA 對(duì)對(duì)SLE有特異性,檢出率在有特異性,檢出率在90%以上。以上。l抗抗dsDNA抗體測(cè)定的臨床意義抗體測(cè)定的臨床意義l見(jiàn)于見(jiàn)于SLE活動(dòng)期,陽(yáng)性率活動(dòng)期,陽(yáng)性率70%90%。特異性教高。特異性教高(95%)敏感性較低)敏感性較低-診斷與治療監(jiān)控。另外參與診斷與治療監(jiān)控。另外參與SLE發(fā)病機(jī)制。發(fā)病機(jī)制。l抗抗Sm抗體測(cè)定:抗體測(cè)定:為為SLE所特有,疾病特異度達(dá)所特有,疾病特異度達(dá)99%,且能反應(yīng)疾病活動(dòng)的程度,靈敏度較低,平均為且能反應(yīng)疾病活動(dòng)的程度,靈敏度
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